Методы очистки крови: Методы очищения крови — Клиники Беларуси
Методы очищения крови — Клиники Беларуси
Методы очищения крови
Отделение клинической трансфузиологии располагается на базе многопрофильной 6-й городской клинической больницы, что позволяет проводить любые виды лабораторного и инструментального обследования на высоком уровне, корректировать лечение основного и сопутствующих заболеваний, госпитализировать больных в палаты терапевтического и ортопедического профиля различной степени комфортности.
Лечение основано на методах очищения крови от токсических веществ, коррекции ее реологии (текучести), иммунитета и метаболических нарушений. Все операции проводятся на современной аппаратуре, с использованием новейших технологий и только одноразовых стерильных материалов. Лечение полностью исключает инфицирование вирусом гепатита В, С, ВИЧ и другими возбудителями, передающимися через кровь.
Выполняются следующие виды медицинских услуг:
Плазмаферез
Ультрафиолетовое облучение крови
Вызывает уничтожение микробов в организме пациента, повышает сопротивляемость иммунной системы, снижает свертываемость и вязкость крови, повышает обмен веществ. Кровь пациента пропускается в стерильной одноразовой системе над источником ультрафиолетовых лучей. Сеанс длится от 20 до 49 мин. Курс включает 5-8 сеансов.
Надвенное лазерное облучение крови
Улучшает микрциркуляцию, стимулирует обмен веществ, омолаживает организм, успокаивает нервную систему, снимает бессонницу, уменьшает боль, отек, воспаление, снижает артериальное давление. Курс лечения — 5-10 процедур.
Кожное лазерное облучение
При герпетическом поражении кожи, фурункулезе 5-10 процедур.
Аутосеротерпия
Снижает аллергическеие и аутоиммунные реакции, стимулирует иммунитет. Курс лечения 10 дней и повторный курс через 2 недели.
К другим методам относятся кровопускание, магнитотерапия, местное применение обогащенной тромбоцитами плазмы и др.
В 2017 году проведено 6258 лечебных процедур с положительным клиническим эффектом.
Отделение работает с понедельника по пятницу с 8 до 16 часов.
Контактные тел. (8-017) 239-59-22: 239-59-23.
О плазмаферезе — современном методе очищения крови — подробно
Ещё знаменитый ГИППОКРАТ* с греческого острова Кос считал кровь одной из главных жидкостей организма. По его мнению, «добрая кровь» является основой крепкого здоровья и «благоприятных черт» организма. Различные способы очищения крови спокон веков помогали противостоять болезням.
В последние десятилетия в клинической практике всё большее применение находит метод гравитационной хирургии – плазмаферез. По сути говоря, это воздействие на кровь вне организма, при этом кровь берётся из организма, проходит через специальные аппараты и возвращается в организм изменённой. Забранную кровь разделяют на её составляющие –плазму (жидкую часть, в которой растворены как нужные для жизнедеятельности вещества, так и вредные, вызывающие болезни) и клетки крови (эритроциты, лейкоциты и тромбоциты). Разделение крови происходит под действием гравитационных сил в специальной центрифуге, отсюда такое «космическое» название – гравитационная хирургия.
Гравитационная хирургия крови определяется как хирургия жидких субстрактов организма путём активного удаления из этих субстрактов патологических элементов с помощью сил гравитации. Эти операции рассматриваются как метод интенсивной неспецифической терапии, повышающий эффективность общепринятых методов фармакологического воздействия. «Методы гравитационной хирургии крови показаны при всех патологических состояниях, где требуется коррекция состава плазмы, клеток крови, а также иммунных нарушений» (Гаврилов О.К. и соавторы).
Плазмаферез при условии использования современной аппаратуры технически несложен, не требует применения дорогостоящего расходного материала, что делает доступным этот метод любому лечебному учреждению. Одновременно с детоксикационным воздействием плазмаферез оказывает и выраженный иммуннокоррегирующий эффект. Отличительной особенностью плазмафереза является то, что при проведении повторных операций за счет эффекта гемодилюции токсические вещества удаляются не только из сосудистого русла, но и из тканевого депо. Подтверждением этому служит значительное снижение концентрации патологических продуктов непосредственно после сеанса плазмафереза, однако уже через 6 – 8 часов содержание их в крови приближается к исходному уровню. Последующие сеансы плазмафереза способствуют удалению и этих веществ, что приводит к более полноценной санации всей внутренней среды, учитывая, что основная часть патологических веществ находится во внесосудистом пространстве. Таким образом, из организма могут быть удалены и длительно находящиеся там ксенобиотики, поступившие из окружающей среды и естественные патологические метаболиты.
С лечебной целью широкое применение плазмафереза начинается с 60-х годов прошлого столетия. В настоящее время лечебный плазмаферез применяется в комплексной терапии более чем 100 соматических и неврологических заболеваний, протекающих с интоксикацией, экзогенными и эндогенными отравлениями, при заболеваниях, сопровождающихся изменением коллоидно – осмотического и биохимического состава крови (Лопаткин Н.А., Лопухин Ю.М.)
Лечебный эффект плазмафереза связан с удалением антигенов, антител, иммунных комплексов, экзо- и эндотоксинов, бактерий, продуктов распада воспалительного происхождения, а также с восстановлением физколлоидного состава и вязкости крови, нормализацией микроциркуляции в органах и тканях.
В 3-ей городской больнице плазмаферез широко и по достоинству занимает ведущее место в комплексном лечении больных как с соматической, так и с хирургической патологией.
Курс лечения плазмаферезом обычно состоит из трёх сеансов с интервалом между сеансами 3-4 дня. За один сеанс плазмафереза удаляется в среднем 950 грамм с использованием аппарата «НАЕМОNETICS PCS-2».
Восполнение плазмапотери осуществляется кристаллоидными растворами в объёме 1.000 мл с добавлением витаминов группы В и С. При этом следует отметить, что эффективность процедуры зависит не только от степени выраженности патологического состояния, но и от тщательности подбора показаний к предполагаемой операции плазмафереза.
Значимых осложнений, как правило, не было отмечено. Однако следует отметить тот факт, что у определённого контингента больных, особенно с сердечно–сосудистой патологией, возраст свыше 65 лет, к концу сеанса плазмафереза отмечалась гипотония, проявлениями которой были появление слабости, потливости. Эти проявления носили кратковременный преходящий характер и легко купировались возмещением объёмом коллоидных растворов. Резко положительная динамика от плазмафереза отмечена при лечении больных с бронхиальной астмой, подагрой, хроническими гепатитами.
_____________________________
* Гиппократ — (около 460 года до н. э., остров Кос — между 377 и 356 годами до н. э., Ларисса) — знаменитый древнегреческий врач. Вошёл в историю как «отец медицины».
** Резистентность организма (лат. resistentia сопротивление, противодействие; синоним сопротивляемость) устойчивость организма к воздействии) различных повреждающих факторов.
***Методы экстракорпоральной интоксикации
Прибыловский В.С.
Врач анестезиолог- реаниматолог ГБ №3
Лечебный плазмаферез и озонотерапия
ПЛАЗМАФЕРЕЗ – это удаление из крови вредных веществ.Наша кровь состоит из клеток: красных и белых кровяных телец, тромбоцитов, и плазмы – жидкой части крови, в которой растворены жиры, белки, углеводы, гормоны, витамины, продукты жизнедеятельности клеток, шлаки и токсины, микробы. Во время плазмафереза у пациента берут 450мл. крови, затем ее центрифугируют. При этом клетки крови оседают, и их вместе с физраствором возвращают пациенту. А полученная плазма будет удалена, и вместе с ней и все вредные вещества.
Эффективность Плазмафереза основывается на трех факторах: очищении, укреплении иммунитета и улучшении текучести крови.
Во-первых, из организма удаляются вредные вещества: сначала те, что есть на данный момент в крови, потом те, которые поступают в кровь из органов и тканей, и так до полной очистки.
Во-вторых, в ответ на удаление плазмы организм мобилизует все свои защитные механизмы, укрепляется иммунитет.
В-третьих, очищенная кровь становится менее вязкой, к тому же плазмаферез удаляет излишнее содержание холестерина.
У больных Плазмаферез улучшает самочувствие, останавливает развитие болезней, выводит из крови остатки лекарств и вещества, которые стали причиной заболевания.
Здоровый человек ощущает после процедуры, что его организм намного лучше противостоит стрессам, воздействиям неблагоприятной экологии, алкоголя, никотина и других вредных веществ. Останавливается возрастное увядание кожи, образование морщин и отеков: ведь плазмаферез – это оздоровление, идущее изнутри и в равной степени воздействующее на все системы и органы нашего тела.
А еще при помощи Плазмафереза излечиваются многие болезни, которые без него не лечатся никакими другими средствами, к примеру, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, сепсис и другие тяжелые поражения систем и органов.
С помощью Плазмафереза возможно эффективное лечение аллергий и аутоиммунных заболеваний, удаление последствий химиотерапии в онкологии, лечение хронических интоксикаций при наркомании, алкоголизме и т.д.
К помощи Плазмафереза прибегают для уменьшения в плазме концентрации белков, липидов, гормонов, токсинов, антигенов, антител, иммунных комплексов. В результате процедуры Плазмафереза кровь освобождается от солей и других вредных веществ, накапливающихся в организме. Происходит «омолаживание» организма в целом.
Плазмаферез помогает в следующих случаях:
- Дерматология (экзема, псориаз, аллергия, острая или хроническая крапивница, дерматит, фурункулез)
- Гастроэнтерология (все формы гепатитов, повышенный уровень холестерина, хронические холецистит и панкреатит, язвенная болезнь желудка и 12-ти перстной кишки)
- Неврология (рассеянный склероз, миастения)
- Эндокринология (сахарный диабет, ожирение, гипертиреоз)
- Заболевания органов дыхания (хронический бронхит, бронхиальная астма)
- Синдром хронической усталости
- Акушерство и гинекология ( инфекции, хронические воспалительные заболевания матки и придатков, нарушение менструального цикла, бесплодие, невынашивание беременности, подготовка к ЭКО, гестозы беременных, климактерический синдром)
- Ревматоидный артрит , артрозы, артриты
- Гипертоническая болезнь, ишемическая болезнь сердца
Плазмаферез (очищение крови для удаления токсических веществ)
Плазмаферез – это метод экстракорпоральной (вне организма) терапии, суть которого состоит в удалении плазмы, в которой содержатся токсические и метаболические вещества, носители причин болезней.
В зависимости от метода получения плазмы выделяют аппаратный, центрифужный, мембранный и седиментационный (отстаивание) плазмаферезы. В современном варианте плазмаферез проводят в специальных плазмафильтрах или сепараторах, в которых происходит разделение крови на форменные элементы (клетки) и плазму. Плазма удаляется, а клетки крови вместе с плазмозамещающими растворами возвращаются в кровоток пациента.
Для проведения процедуры пациент подключается к аппарату через одну из периферических вен, посредством катетера, соединенного с набором магистралей и плазмафильтра. Весь процесс выделения плазмы и возврата клеток выполняется автоматически и безопасно, так как используются только стерильные наборы одноразовых материалов.
Длительность процедуры составляет 1,5-2 часа.
Плазмаферез проводят для уменьшения в плазме концентрации вредных белков, липидов, гормонов, токсинов, антигенов, антител, иммунных комплексов. К сожалению, метод не избирательный и не позволяет удалять из организма именно те компоненты, которые вызывают или поддерживают болезнь. Поэтому, вместе с плазмой из организма удаляются многие другие вещества , часть из которых необходима организму и поддерживать нормальный обмен веществ. Поэтому, метод при определенных условиях требует заместительной терапии белковыми и другими препаратами.
В настоящее время плазмаферез имеет не только технологическое значение как метод подготовки селективного (иммуносорбция) или полуселективного (криоаферез) удаления из крови вредных веществ, но применяется как самостоятельный метод детоксикации. Показания к проведению плазмафереза, которые в XX веке были чрезмерно широкими (более 200 заболеваний), последние годы постепенно сузились. Проведенные международные многоцентровые исследования показали, что безусловный эффект плазмафереза ограничен следующими заболеваниями и синдромами:
Показания
- поражения сердца при аллергических и аутоиммунных заболеваниях
- вирусное поражение сердечной мышцы (вирусный миокардит)
- осложнения инфаркта
- воспаление сердца аутоиммунного происхождения
- атеросклероз
- системные васкулит
- бронхиальная астма
- фиброзирующий альвеолит
- гемосидероз
- неспецифический язвенный колит
- болезнь Крона
- хроническое аутоиммунное воспаление печени;
- токсические энцефалопатии
- сахарный диабет и его осложнения (поражение сосудов глаз, почек, головного мозга, ног)
- снижение чувствительность к инсулину;болезнь Адиссона
- псориаз поражение суставов при псориазе
- пузырчатка
- герпес
- тяжелые аллергические состояния
- токсикодермии.
- атопический дерматит
- ревматоидный артрит
- системная красная волчанка
- дерматомиозит
- системная склеродермия
- поллиноз
- аллергические реакции на различные вещества
- аллергические реакции на физические факторы: солнечные лучи, тепло, холод и пр.
- поражения глаз при заболеваниях органов внутренней секреции
- воспаление сосудистой оболочки глаза хроническое воспаление орбиты
- поражение сосудов глазного яблока при сахарном диабете
- гломерулонефрит воспаление почек при системной красной волчанке
- синдром Гудпасчура
- тяжелые инфекции почек и мочеточников
- тяжелое нарушение функции почек
- рассеянный склероз
- хронические инфекционные заболевания нервной системы
- аллергическое воспаление ткани головного мозга
- отравление этиловым спиртом, похмельный синдром
- наркомания, токсикомания
Противопоказания Абсолютные противопоказания к проведению плазмафереза (противопоказания, при которых процедуру нельзя проводить ни в коем случае):
- тяжелые поражения головного мозга
- тяжелые кровотечения
Относительные противопоказания к проведению плазмафереза (противопоказания, которыми можно пренебречь):
- Повышенная кровоточивость
- Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки в стадии обострения
- Сердечные аритмии
- Низкое содержание белка в плазме крови
- Острые инфекции
- Месячные у женщин
Отделение экстракорпоральных методов очистки крови
Отделение экстракорпоральных методов обработки крови:
Заведующая отделением экстракорпоральных методов обработки крови (ЭКМОК) Давыденко Татьяна Евгеньевна врач анестезиолог-реаниматолог, трансфузиолог высшей категории, кандидат медицинских наук |
Отделение Экстракорпоральных методов обработки крови СПб ГБУЗ «Госпиталь для ветеранов войн» создано в 1996 году как отделение, осуществляющее помощь пациентам с разнообразной патологией современными способами экстракорпоральной детоксикации и фотогемотерапии. На протяжении длительного времени методическую, научно-практическую, организационную помощь отделению оказывали Центр лазерной медицины и кафедра патфизиологии Санкт-Петербургского государственного медицинского универ ситета им. акад.И.П.Павлова. За время совместной работы выполнено более 40 научных работ, в которых поднимались вопросы практического использования методов фотогемотерапии (совершенствовались показания, был определен круг противопоказаний, вопросы технологического обеспечения при проведении методик, поднимались вопросы эффективности этих методов при различной патологии)
Накопленный клинический опыт показал, что трансфузиологические операции экстракорпоральной детоксикации и фотогемотерапии улучшают результаты лечения различных заболеваний и травм. Однако высокая лечебная эффективность и безопасность этих процедур возможны только при их применении в специализированных подразделениях лечебного учреждения, строгом соблюдении методики выполнения и соответствующей подготовки медперсонала
В отделении экустракорпоральных методов обработки крови СПбГБУЗ госпиталь для ветеранов войн представлены все наиболее широко используемые в настоящее время процедуры и операции экстракорпоральной гемокоррекции:
- ПЛАЗМАФЕРЕЗ
- ЦИТАФЕРЕЗ
- ПЛАЗМОСОРБЦИЯ
- ПЛАЗМООБМЕН
- ПЛАЗМООБМЕН АУТОПЛАЗМОЙ, подвергшейся КРИОСОРБЦИОННОЙ ОБРАБОТКЕ
- ГЕМОСОРБЦИЯ
- экстракорпоральная фармакотерапия
- ФОТОГЕМОТЕРАПИЯ (ВЛОК И УФОК)
- Специальные программы инфузионной терапии с индивидуальным подходом в выборе метода и кратности проведения методик
Отделение оснащено современной аппаратурой, позволяющей проводить процедуры и трансфузиологические операции на высоком уровне. Весь персонал отделения — это высоквалифицированные специалисты, имеющие огромный опыт работы по специальности .
Наиболее популярны и эффективны следующие методики:
Плазмаферез — наиболее известный метод очищения крови, при котором из организма человека удаляется плазма, содержащая токсические вещества и продукты нарушенного обмена веществ.
Фотогемотерапия — изменение свойств и состава крови под воздействиемультрафиолетового и лазерного света.
Методы гемокоррекции наиболее эффективны в лечении следующих заболеваний:
любые формы проявления сосудистых нарушений: церебральный атеросклероз, в том числе, осложненный инсультом, ишемическая болезнь сердца, гипертоническая болезнь, диабетическая ангиопатия
- обменные нарушения ( дислипидемия, подагра, ожирение, нарушения углеводного обмена)
- иммунология (иммунодефицитные состояния, хронический рецидивирующий фурункулез, рожистое воспаление, герпетическая инфекция, саркоидоз легких, экзогенный и аллергический альвеолит)
- аллергические и инфекционно-аллергические заболевания: бронхиальная астма,
рецидивирующая крапивница, отек Квинке, поллиноз, токсикодермии различного генеза и др.
- дерматологические заболевания (псориаз,экзема, атопический дерматит, нейродермит)
- многие хирургические заболевания: облитерирующий атеросклероз сосудов нижних конечностей, варикозное расширение вен нижних конечностей и осложнения течения болезни, хронический гастрит, панкреатит, язвенная болезнь желудка и 12-перстной кишки и многие др..
В последние годы методы гемокоррекции активно используются в косметологии с целью омоложения организма и активации процессов тканевого обмена. В любом возрасте проведение курсов экстракорпорального очищения организма, стимуляция иммунитета позволяют улучшить качество и продолжительность активной жизни.
Лечение в отделении
проводится как в стационарных, так и амбулаторных условиях.
Консультативные дни:
ежедневно, кроме субботы и воскресенья
с 10.00 до 14.00
Запись осуществляется через колл- центр госпиталя
телефон call-центра (812) 670-94-44 (по будним дням с 9.00 — 17.00)
запись на амбулаторную консультацию и лечение по хозрасчету и ДМС (кабинет №109):
телефоны: (812) 670-91-31 и (921) 184-96-71
Как добраться: до станции метро: от м. Ломоносовская: автобус №8, 12, 118, 140; троллейбус №27 до остановки Дальневосточный проспект, пройти 610 метров до дома 63 по Дальневосточному проспекту, вход через Амбулаторно-консультативное отделение.
Чистка крови в организме: методы очищения, процедура
Пока мы молоды и активны наш организм словно неустанный агрегат успевает за безумными ритмами работы и радостями досуга. Только неожиданно работа этой машины начинает давать сбои. Мы были абсолютно здоровы — и вдруг стали практически больны. Что происходит?
С пищей, водой, воздухом в организм человека постоянно поступают десятки тысяч ненужных и даже ядовитых веществ. Добавьте к этому стрессы, недосыпание, плохую экологию. Органы-чистильщики-почки, печень, легкие и другие, ответственные за уборку организма, перестают справляться со своей задачей, естественные защитные силы организма начинают слабеть. Что делать?
Хорошо бы вывести все эти шлаки из организма. Но как? Способов на самом деле много, но наиболее эффективным на сегодняшний день справедливо считается лечебный плазмаферез – очищение организма на глубоком, клеточном уровне.
Каким образом выполняется такое очищение крови и насколько это эффективно?
Суть метода очень просто понять, если вспомнить, что кровь состоит из двух составляющих- клеток крови (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты и др.) и плазмы. У каждой составляющей своя задача — эритроциты несут к клеткам крови организма кислород и питательные вещества, а через плазму от клеток отводятся продукты жизнедеятельности, так называемые токсины. С помощью плазмафереза мы отделяем загрязненную плазму от «хорошей крови». Плазма с токсинами удаляется, а клетки крови возвращаются в организм. Новые свежие клетки плазмы образуются через 1-2 дня, что определяет кратность проведения плазмафереза. За курс проведения плазмафереза очищается весь обьем циркулирующей плазмы.
Перед проведением плазмафереза пациент получает консультацию врача, где проводится осмотр пациента, определяются показания, составляется программа лечения.
При первом сеансе токсины, аллергены удаляются непосредственно из крови- первичный этап очистки организма. Результатом проведения второго сеанса является очистка межклеточной жидкости. После третьего сеанса токсины удаляются уже из самих клеток. Таким образом в результате нескольких процедур плазмафереза очищается организм на клеточном уровне, что невозможно достичь другими методами, например, медикаментозными. Кровь становится более чистой и подвижной. Организм чувствует себя отдохнувшим, а человек- словно заново родившимся. Улучшается настроение, сон, аппетит, уходят постепенно симптомы заболевания. По окончания курса результат лечения подтверждается лабораторными данными. Эффект сохраняется 6-12 месяцев. В сочетании с правильно подобранным основным лечением эффект продлевается на годы.
Отделение гравитационной хирургии крови предлагает пройти очищение крови в организме человека по доступной цене в СПб.
Кому можно рекомендовать плазмаферез?
Всегда следует руководствоваться одним простым принципом: болезнь легче предупредить чем лечить. Этого можно добиться, укрепляя и восстанавливая защитные силы организма и здоровья в целом.
Хорошо поддаются лечению методом плазмафереза такие заболевания как аллергия, хронический гепатит, болезнь Крона, бронхиальная астма, ревматоидный полиартрит, подагра, бронхиальная астма, саркоидоз, псориаз, различные дерматиты, высокий холестерин, язвенный колит, миастения, рассеянный склероз и многие другие заболевания. Особенно если эти заболевания протекают с осложнениями, трудно поддаются обычной терапией с частыми обострениями.
Можно ли использовать плазмаферез с косметической целью, для омоложения, например?
Очищающее действие на состояние органов и систем способствует продлеванию жизни в целом и улучшает внешний вид. Поскольку при плазмаферезе удаляются токсины, улучшается работа мелких сосудов и текучесть крови, то кожа становится более упругой и свежей, морщины не появляются так быстро. Поэтому пациенты получающие плазмаферез выглядят гораздо лучше, свежее. В этом и есть омолаживающий эффект. Косметический эффект скорее всего очевиден у пациентов обратившихся с проблемами кожи (фурункулез, аллергический дерматит, пузырчатка, псориаз, герпес и др.). В процессе лечения уходит отек, воспаление, устраняется дефект кожных покровов, затягиваются мелкие раны — кожа приобретает здоровый вид.
Когда противопоказано проведение плазмафереза?
Есть, конечно, противопоказания для проведения процедуры, однако круг их узок. Так как в методике применяется антикоагулянт, она требует осторожного подхода в ситуациях, когда можно спровоцировать кровотечение, например при язвенной болезни, остром геморрое, во время месячных. Необходим также контроль общего белка крови и альбумина. Так как часть этих веществ удаляется при плазмаферезе, то при низких ее показателях рекомендовано воздержаться от проведения этой процедуры. Показания и противопоказания всегда определяет врач.
Существуют ли другие методы чистки крови?
Одна из модификаций терапевтического плазмафереза – это каскадная плазмофильтрация. Это избирательное удаление токсинов определенной молекулярной массы(причинных факторов заболеваний). Для очищения крови устанавливаются фильтры под каждое конкретное заболевание и при этом удаляются только те вещества которые вырабатываются при этом заболевании.
Каскадная фильтрация плазмы крови по своей эффективности, пожалуй, является одним из самых значимых методов очищения крови, благодаря своей признанной врачебным сообществом эффективности. Каскадная фильтрация плазмы применяется при лечении ряда трудно поддающихся обычной терапии тяжелейших заболеваний. Среди таких заболеваний врачи отмечают системный атеросклероз, гепатит С, высокий холестерин, ревматоидный артрит, тиреоидит, экзема, нейродермит; гломерулонефрит, сухая макулодистрофия, синдром диабетической стопы и многие другие болезни.
А можно ли применять только плазмаферез, не используя лекарственные препараты?
Проведение плазмафереза не отменяет применение лекарственных препаратов, а наоборот усиливает их действие. В том случае, когда имеется несколько хронических заболеваний в стадии обострения применение плазмафереза уменьшает дозу лекарств (не безвредных для организма) поскольку повышается рецепторная чувствительность клеток за счет очистки и доза препаратов уменьшается. Кроме того плазмаферез повышает эффективность проводимой основной терапии , сокращает сроки пребывания в стационаре, способствуют более быстрому выздоровлению. Повышает качество жизни пациентов, компенсирует влияние вредных факторов окружающей среды.
Где можно получить такое очищение крови?
В клинике МЧС, в отделении гравитационной хирургии крови мы выполняем эту процедуру с помощью надежных аппаратах плазмафереза производителей мирового уровня, делающей процедуру очищения легко переносимой, комфортной, безопасной. На каждого пациента составляется индивидуальная программа проведения плазмафереза с учетом особенностей его состояния. Во время проведения процедуры можно слушать музыку, смотреть телевизор, просто отдыхать.
Лечебный плазмаферез (очищение крови) — деятельность направления и специалисты
В основе многих заболеваний лежат стойкие нарушения в обмене веществ, иммунитете, гормональном обмене, микрофлоре кишечника, нервно-психической деятельности и др. Эти нарушения скрыты от глаз и мы наблюдаем лишь их последствия, проявляющиеся в избыточном весе, дисбактериозе, сахарном диабете, гипертонии, заболеваниях щитовидной железы, различных кожных заболеваниях, аллергических проявлениях, тревожности и страхах и др.
Все эти и другие нарушения приводят к ситуации, когда собственный организм не справляется с высокой концентрацией токсичных веществ в организме. Начинается болезнь…
Что такое лечебный плазмаферез?
Плазмаферез — современный, зачастую безальтернативный, метод лечения заболеваний различных органов и систем, состоящий в удалении жидкой части крови — плазмы, в которой и содержатся токсические и метаболические компоненты — носители причин болезней.
Плазмаферез хорошо зарекомендовал себя, как метод очищения крови от холестерина и жиров при лечении атеросклероза и дислипидемий. Успешно применяется у больных с печеночной (гепатиты, цирроз печени, гепатоз) и почечной (гломерулонефрит, поликистоз почек) недостаточностью. Высокоэффективно использование этого метода в лечении больных с обменными нарушениями, в частности, подагрой (отложении солей). Методика плазмафереза широко используется при подготовке к предстоящему зачатию, планированию беременности и в программе экстракорпорального оплодотворения.
Как производится плазмаферез?
При плазмаферезе производится удаление определенного количества крови из кровотока, разделение ее на фракции (компоненты), изъятие (греческое — аферезис) — с возвращением клеточных компонентов (эритроцитов, лейкоцитов и др. клеток) в кровяное русло. Для предупреждения возможных расстройств кровообращения одновременно с удалением плазмы проводится восполнение объема крови сбалансированными замещающими растворами. Способ замещения, объем и состав растворов, последовательность их введения выбирают в зависимости от количества удаляемой плазмы, состояния пациента, вида заболевания и других факторов. По сравнению с другими методами экстракорпорального очищения крови (гемосорбция, плазмосорбция, гемодиализ, гемофильтрация), плазмаферез оказывает наименьшее повреждающее действие на клетки крови и хорошо переносится больными. При правильном выборе и квалифицированном проведении процедура является эффективным лечебным методом и находит широкое применение в клинической практике.
Какой результат от лечебного плазмофереза?
После сеанса плазмафереза можно наблюдать значительное снижение концентрации патологических продуктов, однако, уже через несколько часов содержание их в крови приближается к исходному уровню. Это говорит о том, что в сосудистое русло поступили вещества, находившиеся до того в межклеточном пространстве и клетках. Последующие сеансы плазмафереза способствуют удалению и этих веществ, что приводит к более полноценной санации всей внутренней среды, учитывая, что основная часть вредных продуктов находится во вне сосудистых пространствах. При этом надо учитывать, что в организме существует подвижное равновесие концентраций различных веществ во внутриклеточном, внеклеточном (интерстициальном) и внутрисосудистом пространстве. Изменение их содержания в одном из этих пространств влечет их перераспределение в остальных. Таким образом, могут быть удалены из организма длительно находящиеся в нем вредные токсические компоненты, поступившие из окружающей среды, и естественные патологические метаболиты.
Показания к проведению плазмафереза
Показания расширяются с развитием медицины, ее представлений о причинах заболеваний. С помощью процедуры плазмафереза происходит очищение не только крови, но и всех тканей, и даже клеток внутренних органов и кожи, происходит «омолаживание» организма в целом. Современный плазмаферез используют в практике эстетической и пластической коррекции.
В большинстве случаев врач рекомендует 3–5 процедур лечебного плазмафереза через 1-2 дня. Однако существуют и противопоказания для проведения плазмафереза.
Список показаний
Список противопоказаний
Гарантии
В нашем центре процедура плазмафереза проводится на автоматизированном сертифицированном оборудовании (Haemonetics Cоrporation, США), врачами высшей категории, имеющими большой клинический опыт и прошедшими специальную подготовку. Используется только одноразовый расходный материал, что исключает риск инфицирования и передачи гемотрансмиссивных инфекций.
Как записаться на процедуру плазмафереза?
Записаться на процедуру в удобное для вас время можно в регистратуре нашего центра. Перед проведением плазмафереза необходимо пройти обязательное обследование (Общий анализ крови, МНО) и собеседование со специалистом, выполняющим процедуру плазмафереза – врачом-анестезиологом.
На собеседовании врач обсудит с вами показания к плазмаферезу, целесообразность и детали проведения процедуры, даст рекомендации.
Необходимые анализы, собеседование и саму процедуру плазмафереза можно пройти в один день.
Запись по тел: (343) 283 0 808
Текущий прогресс в методах очистки крови, используемых в реанимации
Прогноз для пациентов с острым накоплением патогенных или токсичных веществ в жидкостях их тела — состоянием, серьезно влияющим на выживаемость — можно значительно улучшить путем очистки крови. Наиболее подходящий метод очистки крови и продолжительность его использования должны выбираться на основе эффективности и стоимости.Было разработано несколько методов очистки крови, таких как гемодиализ (HD), гемофильтрация (HF), гемодиафильтрация, непрерывная гемофильтрация (CHF), гемадсорбция и плазмаферез. Каждый метод имеет разные возможности удаления и ограничения; поэтому необходимо тщательно оценить время и продолжительность использования в случае различных болезненных состояний. Выживаемость пациентов, получавших HF со средним фильтратом 35 мл / мин, выше, чем наблюдаемая после обычного HD.У пациентов с синдромом системной воспалительной реакции и синдромом полиорганной дисфункции провоспалительные цитокины должны быть удалены с помощью HF или CHF, как и токсины, накопленные в исходном заболевании. До сих пор не разработан идеальный фильтр для удаления значительного количества провоспалительных цитокинов с минимальной потерей альбумина. В случае острой печеночной недостаточности аммиак, метаболиты аминокислот и альбумин-связывающий билирубин должны быть удалены с помощью комбинации HF и плазмафереза.Использование свежезамороженной плазмы в качестве замещающей жидкости при плазмообмене также важно для восполнения дефицита факторов свертывания и основных метаболических факторов. Активация регенерации тканей / органов путем удаления патогенных факторов или замены факторов, необходимых для регенерации, может быть важной в случае синдрома полиорганной дисфункции. У тяжелобольных пациентов с комбинированными состояниями использование более двух методов очистки крови одновременно или в разное время в течение заболевания может улучшить прогноз пациента больше, чем использование отдельных методов.
Очистка крови — обзор
5.55.1 Введение
Очистка крови — это терапия, основанная на экстракорпоральном лечении крови, и в настоящее время она широко используется для лечения многих заболеваний, которые не поддаются традиционным методам лечения, таких как лекарственные препараты. администрация и хирургия. Он работает, удаляя токсины или патогенные агенты из кровообращения с помощью методов биосепарации, включая диализ, фильтрацию, адсорбцию или комбинацию любого из них.Благодаря своей способности к прямому и быстрому удалению патогенных агентов от пациентов, терапия по очистке крови в основном используется в трех областях клиники: (1) в области интенсивной терапии, такой как плазмаферез для токсикантов; (2) жизнеобеспечение при недостаточности органов, например гемодиализ при почечной недостаточности; и (3) устранение метаболических и иммунных нарушений, таких как иммуноадсорбция при аутоиммунных заболеваниях. В настоящее время наиболее известным применением является гемодиализ для лечения пациентов с почечной недостаточностью.По оценкам, более 1 миллиона пациентов во всем мире остаются в живых благодаря гемодиализу. Если бы сегодня не было метода гемодиализа, все эти пациенты умерли бы от почечной недостаточности в течение 2 недель.
Несколько терапевтических технологий и сложных устройств были разработаны и клинически применены за последние три десятилетия. Развитие этих технологий вызвано растущим пониманием гематологии и патофизиологии в медицинских исследованиях, а также достижениями в методах биосепарации.
Медицинские открытия в патофизиологии многих болезней значительно расширили область применения терапии по очищению крови. За последние 30 лет был идентифицирован широкий спектр новых патогенных агентов, присутствующих в кровообращении. Было обнаружено, что эти молекулы играют ключевую роль в патофизиологии связанных заболеваний, таких как аутоиммунные заболевания, синдром системной воспалительной реакции, диализный амилоидоз (DRA) и даже рак. Поскольку уровни этих патогенных агентов в крови тесно связаны с развитием заболеваний, а также отражают их тяжесть, были предприняты огромные усилия для изучения использования различных методов очистки крови для контроля патологических состояний [1].Например, белок А, происходящий из белка клеточной стенки Staphylococcus aureus , стал эффективным адсорбентом для лечения многих аутоиммунных заболеваний, включая ревматоидный артрит, миастению (MG) и идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру. Более того, было предпринято множество попыток удалить β 2 -микроглобулин (β 2 M, молекулярная масса 11 800 Да) из крови, поскольку β 2 M был идентифицирован как предшественник белка, ответственный за отложение амилоида, патологический состояние, неизбежно возникающее в результате терминальной стадии почечной недостаточности (ТПН) или длительного применения заместительной почечной терапии.Кроме того, удаление опухолевых антигенов (например, α-фетопротеина, связанного с раком печени, карциноэмбрионального антигена, обнаруженного в различных карциномах, а также тиоэстеразы или цитокератинов, связанных с раком груди) с использованием адсорбентов с иммобилизованными моноклональными антителами рассматривается как потенциальный кандидат. для очистки крови при лечении рака. Кроме того, борьба с сепсисом и септическим шоком путем удаления воспалительных цитокинов и выведение вируса из кровотока — горячие темы, находящиеся в стадии обширных исследований.
Мишени для очистки крови могут охватывать широкий спектр молекул, различающихся по размеру, полярности, химическим и биологическим свойствам. Соответственно, очистка крови может выполняться множеством различных методов. В принципе, в основе различных терапевтических подходов лежит наука о биоразделении. Методы, основанные на мембране и / или адсорбции, составляют основную часть применяемой в настоящее время стратегии очистки крови. Мембранные методы (гемодиализ, плазмаферез и ультрафильтрация) разделяют соединения в соответствии с размером пор и не удаляют выборочно определенные компоненты.Удаление токсина достигается путем диффузии и / или фильтрации с помощью мембраны с определенным размером пор. Изменяя проницаемость фильтров, можно фильтровать различные компоненты крови, от низкомолекулярных растворимых токсинов, таких как уремические токсины, до средних и крупных белков, таких как связанный с билирубином альбумин. Если размер пор достаточно велик, чтобы обеспечить проницаемость примерно 100% белка, можно провести плазмаферез. Таким образом, материал мембраны и структура пор являются двумя основными факторами, влияющими на производительность фильтров.Адсорбционные методы (гемоперфузия и плазменная перфузия), напротив, позволяют более избирательно удалять определенные соединения. Плазма или кровь могут быть перфузированы через колонку, содержащую адсорбент (обычно синтетические шарики), связанный со специфическими соединениями, которые действуют через их физико-химические или биологические свойства. Каждый адсорбент характеризуется своими иммобилизованными лигандами, и эффективность адсорбента может определяться непосредственно свойствами его лиганда. Следовательно, разработка методов адсорбции в основном сосредоточена на лиганде, работая над достижением высокой специфичности, хорошей стабильности и относительно низкой стоимости.
Хотя методы очистки крови имеют общие механизмы с подходами к биосепарации в биоинженерии, они имеют свои особенности и особые требования. Самый главный вопрос — их гемосовместимость. Считается, что, когда кровь вступает в контакт с инородными материалами, ряд компонентов крови будет удерживаться на этих инородных материалах, что может привести к активации определенных компонентов в крови посредством различных ферментативных процессов. Гемосовместимость может вызывать активацию комплемента и лейкоцитов в различной степени, а также высвобождение медиаторов воспаления, включая цитокины, оксид азота, свободные радикалы кислорода и факторы активации тромбоцитов.Эти реакции могут привести к серьезным побочным эффектам во время процедур по очистке крови. Таким образом, выбор подходящих материалов и улучшение их гемосовместимости всегда является одной из основных задач при разработке терапевтических устройств. В этой статье рассматриваются различные клинические методы очистки крови в соответствии с их механизмами биоразделения. Также подчеркивается гемосовместимость этих методов очистки.
(PDF) Текущий прогресс в методах очистки крови, используемых в реанимации
110 Сайто
10 Haase M, Bellomo R, Baldwin I, Haase-
Fielitz A, Fealy N, Davenport P, Morgera
S, Goehl H, Storr M, Boyce N, Neumayer
HH: гемодиализная мембрана с высоким пределом молекулярной массы
и уровнями цитокинов
при сепсисе, осложненном острой почечной недостаточностью:
— рандомизированное исследование фазы 1.Am J Kidney Dis
2007; 50: 296–304.
11 Коул Л., Белломо Р., Харт Дж., Журнуа Д.,
Давенпорт П., Типпинг П., Ронко С. Фаза А
2 рандомизированное контролируемое исследование непрерывной гемофильтрации
при сепсисе. Crit Care Med
2002; 30: 100–106.
12 Оноре П.М., Зидней А.Л., Матсон-младший: Высокий объем
и гемофильтрация с высокой проницаемостью
при сепсисе: доказательства и ключевые проблемы
. Crit Care 2003; 3: 69–76.
13 Morgera S, Slowinski T, Melzer C, Sobottke
V, Vargas-Hein O, Volk T, Zuckermann-
Becker H, Wegner B, Müller JM, Baumann
G, Kox WJ, Bellomo R, Neumayer HH: Почечная
заместительная терапия с фильтрами hemo-
с высоким порогом отсечки: влияние конвекции и диффузии на клиренс цитокинов
и белковый статус. Am J
Kidney Dis 2004; 43: 444–453.
14 Йоргин П.Д., Эклунд Д.К., аль-Узри А., Уайтселл
L, Теодору А.А.: Параллельное центрифугирование —
плазмаферез и непрерывная вено —
венозная гемодиафильтрация.Педиатр Нефрол
2000; 14: 18–21.
15 Hirata N, Shizume Y, Shirokaze J, Suemitsu
J, Yoshida H, Yamawaki N: Плазменный сепаратор
Plasmaflo OP. Ther Apher Dial 2003; 7: 64–68.
16 Суэока A: Текущее состояние технологии афереза -
технологий. 2. Мембранный плазменный фракционер.
Ther Apher 1997; 1: 135–146.
17 Ямадзаки З., Иноуэ Н.: вспомогательное устройство для печени,
с использованием мембранного сепаратора плазмы и лайзера dia-
.Med Prog Technol 1987; 12: 17–24.
18 Сайто А., Наито Х., Хирохата М:
Гемофильтрация с использованием фильтров с высокими точками отсечения —
у пациентов с накоплением
молекулярных веществ от 1000 до 65000
дальтон; in Smeby LC, Jorstad S, Wideroe
TE (ред.): Иммунные и метаболические аспекты
терапевтических систем очистки крови.
Базель, Каргер, 1986, стр. 197–201.
19 Mori T, Eguchi Y, Shimizu T, Endo Y,
Yoshioka T, Hanasawa K, Tani T: случай
острой печеночной недостаточности, пролеченный с помощью диафильтрации плазмы нового плазмафереза
для
использования моста до трансплантации печени .Ther
Apher 2002; 6: 463–466.
20 Kawanshi H, Nishiki M, Sugiyama M, Cho T,
Tsuchiya T, Ezaki H: разработка полиэфируретанового листа
, залитого
порошкообразным углем для использования в гемоперфузии
. Artif Organs 1984;
8: 167–173.
21 Накаджи С., Хаяши Н.: Адсорбция билирубина
колонка Medisorba BL-300. Ther Apher Dial
2003; 7: 98–103.
22 He NH, Wang YJ, Wang ZW, Liu J, Li JJ, Liu
GD, Wang YM: эффекты гемоперфузии
адсорбция и / или плазмаферез при лечении тяжелого вирусного гепатита
: сравнительный анализ
исследование.World J Gastroenterol 2004; 10: 1218–
1221.
23 Cruz DN, Perazella MA, Bellomo R, de
Cal M, Polanco N, Corradi V, Lentini P,
Nalesso F, Ueno T, Ranieri VM , Ronco C:
Эффективность иммобилизованной полимиксином B колонки волокна
при сепсисе: систематический обзор.
Crit Care Med 2007; 1: R47.
24 Reinhart K, Meier-Hellman A, Beale R,
Forst H, Boehm D, Willatts S, Rothe KF,
Adolph M, Hoffmann JE, Boehme M, Bredle
DL, EASy-Study Group: открытый рандомизированное
фаза 2 испытания адсорбера экстракорпорального эндотоксина
при подозрении на грамотрицательный сепсис
.Crit Care Med 2004; 32:
1662–1668.
25 Штанге Дж., Мицнер С., Рамлоу В., Глише Т.,
Хикштейн Х, Шмидт Р.: Новая процедура
для удаления связанных с белком лекарств
и токсинов. ASAIO J 1993; 39:
M621 – M625.
26 Mitzner S, Stange J, Klammt S, Risler T, Erley
CM, Bader BD, Berger ED, Lauchart W,
Peszynski P, Freytag J, Hickstein H, Loock
J, Löhr JM, Liebe , Emmrich J, Korten G,
Schmidt R: Улучшение гепаторенального син-
дрома с экстракорпоральным диализом альбумина
MARS: результаты проспективного рандомизированного
контролируемого клинического исследования.Трансплантация печени
2000; 6: 277–286.
27 Gordon BR, Saal SD. Аферез липопро-
теина низкой плотности с использованием сульфатцеллюлозной системы Liposorber dextran
для пациентов с гиперхолестеринемией
, резистентных к медикаментозной терапии
. Дж. Клин Афер 1996; 11:
128–131.
Устройство для непрерывной экстракорпоральной очистки крови с использованием металлических наномагнитов с целевой направленностью | Нефрологическая диализная трансплантация
Аннотация
Справочная информация. Настоящая работа иллюстрирует, как очистка крови на основе магнитной сепарации с использованием сверхпрочных наномагнитов железа может быть реализована в схеме экстракорпоральной очистки крови. С помощью этого многообещающего метода сегодняшняя очистка крови может быть расширена для специальной фильтрации высокомолекулярных соединений, не ограничиваясь отсечкой фильтров или насыщением поверхности колонки.
Методы. Кровь, содержащая дигоксин (низкомолекулярное лекарство) и интерлейкин-1 (воспалительный белок), циркулировала ex vivo через устройство, состоящее из утвержденных линий переливания крови.Специфичные для мишени наномагниты вводились непрерывно, а затем извлекались с помощью магнитного сепаратора перед рециркуляцией крови.
Результаты. Магнитная очистка крови была успешно проведена в условиях потока: уже в однопроходных экспериментах эффективность удаления достигла значений 75 и 40% для дигоксина и интерлейкина-1β соответственно. Циркуляция 0,5 л крови, отравленной дигоксином, в замкнутом контуре, концентрация дигоксина снижалась с исходно токсичных до терапевтических в течение 30 минут, а степень очистки 90% была достигнута через 1 минуту.5 ч.
Выводы. Магнитная сепарация может быть успешно реализована в устройстве для экстракорпоральной очистки крови. Одновременная и специфическая фильтрация высокомолекулярных соединений может предложить новые многообещающие терапевтические инструменты для будущего лечения сложных заболеваний, таких как сепсис и аутоиммунные расстройства.
Введение
Новые механистические представления о сложных заболеваниях (сепсис, аутоиммунные расстройства) позволяют идентифицировать новые потенциальные терапевтические цели и предъявляют высокие требования к современным методам очистки крови [1, 2].Несмотря на замечательные достижения современных систем очистки крови, целенаправленная фильтрация множества соединений остается серьезной проблемой, особенно для молекул, различающихся по физико-химическим характеристикам (т.е. массе, размеру, заряду) и высокомолекулярных соединениях, таких как белки. Если диффузия медленная (большие целевые молекулы) и фильтрация не подходит (например, из-за отсечки фильтров), пациентам требуется (центробежный) плазмаферез (потеря плазмы, риск трансфузионных реакций) или очистка крови с помощью адсорбентов.Новые технологии, такие как адсорбенты, покрытые антителами [3] или системы детоксикации на основе микросфер (MDS) [4, 5], в настоящее время внедряются специально для достижения терапевтических целей. Было показано, что использование сферических непористых частиц в качестве адсорбентов выгодно благодаря лучшей доступности поверхности (отсутствие диффузии пористости) из-за большей площади внешней поверхности и более коротких расстояний диффузии по сравнению с мембранами [6]. Совсем недавно мы представили концепцию магнитной очистки крови с использованием целевых металлических наномагнетиков для избирательного и эффективного удаления токсинов из цельной крови небольшими партиями [7].В этом подходе лиганды (например, антитела), иммобилизованные на крошечных свободно текущих магнитных частицах, специфически захватывают вредные соединения. Применяя внешние магнитные градиентные поля, наномагнетики, содержащие токсины, могут быть немедленно отделены и удалены из крови.
Чтобы приблизить эту многообещающую технологию на шаг ближе к клиническому применению, была разработана первая реализация в непрерывно действующей экстракорпоральной цепи. Специфичные для мишени (например, функционализированные антителами) металлические наномагниты непрерывно вводятся в непрерывный кровоток, где они специфически захватывают желаемые соединения.Последующее удаление нагруженных патогенами наномагнитов из кровотока путем непрерывной магнитной сепарации позволяет рециркулировать очищенную кровь. Чтобы продемонстрировать потенциал этого нового подхода к удалению молекул, полностью различающихся по характеру, в качестве модельных соединений были использованы дигоксин и интерлейкин-1β (IL-1β) [7]. Дигоксин (молекулярная масса 780 г / моль) — типичный представитель низкомолекулярных препаратов с узким терапевтическим окном. Напротив, гораздо более крупный интерлейкин-1β (молекулярная масса 17 000 г / моль) является провоспалительным белком.Среди других цитокинов он играет решающую роль в оркестровке воспалительных процессов, таких как инфекции [8]. Антитела к дигоксину и IL-1β были закреплены на углеродной поверхности металлических наномагнитов с сильным магнитным углеродным покрытием и использовались в качестве улавливающих фрагментов. Используя эти два модельных соединения, мы демонстрируем, как магнитное разделение может быть успешно реализовано в устройстве для экстракорпоральной очистки крови, обеспечивающем быструю и эффективную скорость очистки. Это открывает привлекательные возможности для будущих терапевтических стратегий, когда мы удаляем вредное соединение из крови пациента, а не пытаемся лечить путем добавления другого соединения (т.е. препарат) для противодействия негативному действию возбудителя.
Материалы и методы
Синтез целевых наномагнетиков
Покрытые углеродом наночастицы железа с геометрией ядро / оболочка (C / Fe, средний диаметр 30 нм, намагниченность насыщения 150 ЭМЕ / г, удельная поверхность 30 м 2 / г) были изготовлены и промыты в растворе кислоты (1 неделя в HCl, 24 об.%) Перед использованием для растворения не полностью покрытых частиц в соответствии с ранее описанными процедурами [6, 7].Наномагниты использовали для магнитной маркировки фрагментов антител к дигоксину (Beacon Pharmaceuticals Ltd, Кент, Великобритания) и человеческих антител к интерлейкину-1 (IL-1) (eBioscience, Inc., Сан-Диего, Калифорния).
Функционализированные анти-дигоксином наномагнетики (C / Fe-анти-дигоксин) были получены с помощью ступенчатой процедуры, как сообщалось ранее [7]: вкратце, анти-дигоксиновые FAB-фрагменты (антигенсвязывающие фрагменты) были ковалентно связаны с амино-реактивным сшивающий агент (сложный эфир MAL-dPEG 24 -NHS; Quanta Biodesign, Powell, OH) на конце NHS.Впоследствии комплекс FAB-сшивающий агент был ковалентно связан с наномагнетиками, функционализированными тиолами.
Для синтеза наномагнетиков против интерлейкина-1β (C / Fe-anti-IL-1β) антитело к интерлейкину-1β было помечено с помощью стороннего соединения: стрептавидина (Leinco Technologies, Inc., Сент-Луис , МО) впервые физадсорбировался на внешних оболочках наномагнетиков. Затем биотинилированные антитела против человеческого IL-1 закрепляли на покрытых стрептавидином наномагнитах.
Агенты с магнитной меткой хранились в гидроксиэтилкрахмале (тетраспан 6%; B.Braun Medical AG, Земпах, Швейцария, с содержанием гидроксиэтилкрахмала 6%) и перед применением в течение коротких периодов (<3 мин) обрабатывали ультразвуком. Хорошая стабильность дисперсии была достигнута до концентраций наномагнита 5 мг / мл (см. Дополнительные материалы). Концентрации наномагнита в используемых дисперсиях поддерживались как можно более высокими, чтобы минимизировать объем, добавляемый в кровь.
Кровь
Кровь для экспериментов была взята у здоровых добровольцев и стабилизирована гепарином натрия (25000 ЕД, 5 мл, B.Braun Medical AG) в концентрации 250 Ед / мл. Кровь, используемая в непрерывных экспериментах (500 мл), была куплена в Blutspend Zürich (Шлирен, Швейцария) в виде отдельных пакетов со свежезамороженной плазмой (FFP, A +) и концентратом эритроцитов (EC, A +), а затем восстановлена.
Устройство для непрерывной магнитной очистки крови
Экстракорпоральный контур был собран из утвержденных наборов для переливания крови (Dispomed, Gelnhausen, Германия) следующим образом: линия, оснащенная портом для инъекции силикона и камерой на 10 мл (арт.51800) был присоединен к выносным линиям (арт. 51130), все линии имели внутренний диаметр 3 мм. Для управления потоком жидкости использовались два разных перистальтических насоса: REGLO Digital (Ismatec SA, Glattbrugg, Швейцария) для перекачивания дисперсии частиц и одобренная для гемофильтрации головка насоса, поставляемая Infomed SA (Женева, Швейцария) для кровотока. Во время экспериментов контейнер с дисперсией наночастиц постоянно встряхивали во время перекачивания. Дозирование оставалось постоянным с течением времени, чтобы обеспечить постоянную концентрацию наномагнетиков в устройстве.
Многоканальная система впрыска была разработана для впрыска дисперсии наночастиц. Стандартная трубка Tygon (R-3607, 0,27 мм; Ismatec SA) надевалась на канюли из нержавеющей стали (Ismatec SA, арт. ISM 581), которые затем использовались в качестве инжекционных форсунок, совместив их с отверстием для инъекции путем перфорации.
Для магнитной сепарации линию очистки крови пропускали через магнитный сепаратор (средняя напряженность поля ∼0,5 Тл). Градиенты сильного поля внутри НКТ были достигнуты с помощью сборки намагниченных стальных проволок, как первоначально было предложено Бокенфельдом и др. .[9] (подробное описание в дополнительных материалах). Наномагнетики подвергались воздействию интенсивных градиентных полей, которые заставляли их постепенно отклоняться от траектории кровотока и в конечном итоге прилипать к стенкам трубки.
Сбор проб
Эффективность удаления патогенов за один проход определяли путем сбора свежеочищенной крови через трехходовой соединитель (Dispomed Witt oHG, арт. 70017) после магнитного сепаратора (конфигурация с разомкнутым контуром). Образцы для экспериментов по непрерывной очистке крови отбирали из резервуара для смешанной крови, где концентрация загрязняющих веществ постепенно снижалась с течением времени (конфигурация с замкнутым контуром).
Химические анализы
Концентрация дигоксина была измерена в лаборатории клинической химии Университетской клиники Цюриха. Нижний предел обнаружения составил 0,2 нмоль / л. Концентрации интерлейкина-1β измеряли в двух экземплярах коммерческими иммуноферментными анализами (BD Biosciencies, Allschwil, Швейцария) при нижнем пределе обнаружения 1 пг / мл.
Теоретическая оценка эффективности очистки
Теоретическая эффективность удаления патогенов была рассчитана исходя из постоянной эффективности удаления за проход и идеально перемешанного резервуара крови (гомогенная концентрация токсина в резервуаре).Соответствующее уравнение, описывающее изменение концентрации токсина в резервуаре крови, приведено ниже. Концентрация обозначается как C и C 0 — это начальная концентрация вредного соединения в резервуаре: и t — это время, прошедшее с начала, а τ обозначает время цикла. Отношение т / τ равняется количеству циклов, проходящих через установку очистки. V R и V T — экстракорпоральный и общий объем соответственно, а x — фиксированное удаление за один проход (концентрация токсина в крови, покидающей экстракорпоральное устройство, относительно концентрации токсина на входе Устройство).Краткий вывод уравнения зазора можно найти в дополнительных материалах.Результаты
Сборка магнитного устройства для очистки крови
Первый прототип устройства непрерывной экстракорпоральной очистки крови на основе магнитной сепарации был собран из трех частей: (i) инъекционного порта для введения наномагнита в кровоток, (ii) контактной камеры, где наномагниты связываются с целевыми молекулами и (iii) блок сепаратора, использующий градиенты магнитного поля для удаления наномагнетиков, нагруженных патогенами, из крови перед рециркуляцией (рис. 1).
Рис. 1.
Магнитная сепарация, реализованная в устройстве для экстракорпоральной очистки крови ( A ). Наномагнетики, диспергированные в гидроксиэтилкрахмале ( B ), непрерывно вводятся в кровоток ( C ). После улавливания токсинов путем избирательного улавливания фрагментов, иммобилизованных на поверхности наномагнита, нагруженные токсином частицы магнитно отделяются от кровотока перед тем, как кровь рециркулирует в резервуар для крови.Капельные камеры объемом 10 миллилитров использовались для увеличения времени контакта между наномагнитами и кровью и для обеспечения однородной концентрации наномагнетиков ( D ).
Рис. 1.
Магнитная сепарация, реализованная в устройстве для экстракорпоральной очистки крови ( A ). Наномагнетики, диспергированные в гидроксиэтилкрахмале ( B ), непрерывно вводятся в кровоток ( C ). После улавливания токсинов путем избирательного улавливания фрагментов, иммобилизованных на поверхности наномагнита, нагруженные токсином частицы магнитно отделяются от кровотока перед тем, как кровь рециркулирует в резервуар для крови.Капельные камеры объемом 10 миллилитров использовались для увеличения времени контакта между наномагнитами и кровью и для обеспечения однородной концентрации наномагнетиков ( D ).
Непрерывное введение наномагнитов в кровоток
Для преодоления ограничений поверхностного насыщения, которые ухудшают частую замену картриджей сорбента при сегодняшней очистке крови, критически важно постоянное введение наномагнетиков с вакантными сайтами связывания. Чтобы решить эту проблему, был разработан инжектор с несколькими портами для непрерывного введения свежих наномагнетиков.Множественные дисперсии наномагнита с различной целевой специфичностью могут быть одновременно подключены к инжектору и поданы в кровоток с разной скоростью (рис. 1).
Магнитные наночастицы с металлическим ядром были использованы для достижения оптимального разделения частиц после обработки. Использование металлических наномагнетиков дает доступ к превосходным магнитным свойствам (намагниченность насыщения в 3–10 раз выше, чем у традиционных наночастиц на основе оксида железа), но способствует увеличению агломерации из-за магнитных диполь-дипольных взаимодействий.Чтобы продлить стабильность дисперсии, различные (содержащие белок или биополимер) одобренные продукты для внутривенных инъекций были оценены на предмет дисперсии наномагнитов. Среди физиологических растворов на основе полимеров гидроксиэтилкрахмал оказался наиболее эффективным для обеспечения стабильных дисперсий (≤5 мг наномагнитов / мл) при сохранении доступности сайта связывания (рис. 1).
Наномагнитная камера контакта с кровью
После введения наномагнитов в экстракорпоральный кровеносный контур решающее значение имеет контакт с кровью (площадь, время), поскольку он непосредственно связан с эффективностью экстракции.Чтобы обеспечить однородную концентрацию наномагнитов в крови и увеличить время контакта наномагнита с кровью (и, следовательно, время связывания), в качестве контактных камер использовались капельные камеры наборов для переливания крови объемом 10 мл каждая (рис. 1). Количество подключенных контактных камер позволяло контролировать точное время контакта между частицами и кровью.
Магнитный сепаратор — непрерывное отделение наномагнитов от кровотока
Наконец, высокоэффективный магнитный сепаратор, собранный в соответствии с концепцией, первоначально описанной Бокенфельдом и др. .[9] использовался как непрерывно работающий блок магнитной сепарации (рис. 2). Экстракорпоральный контур пропускали через блок разделения несколько раз (4 раза), чтобы гарантировать полное отделение частиц перед рециркуляцией крови (см. Рисунок 2).
Рис. 2.
Магнитный сепаратор. Схематическое изображение распределения наномагнетиков в кровотоке во время воспоминания в магнитном сепараторе ( A ). Магнитный сепаратор, работающий в непрерывных условиях ( B ).Устройство для очистки крови многократно пропускается через разделительную установку для достижения полного отделения наномагнитов от крови ( C ).
Рис. 2.
Магнитный сепаратор. Схематическое изображение распределения наномагнетиков в кровотоке во время воспоминания в магнитном сепараторе ( A ). Магнитный сепаратор, работающий в непрерывных условиях ( B ). Устройство для очистки крови многократно пропускается через разделительную установку для достижения полного отделения наномагнитов от крови ( C ).
Настройка кровообращения Ex vivo
Для непрерывных экспериментов по очистке крови кровь заливалась в резервуар (резервуар объемом 1 л, рис. 1) и циркулировала через устройство с использованием утвержденного перистальтического насоса со скоростью 15 мл / мин, что ранее было описано как выполнимое. скорость потока в модели гемодиализа in vitro [10]. Седиментация частиц была минимальной при этой скорости потока при достаточно высоком времени контакта наномагнита с кровью.Утвержденные трансфузионные линии были собраны в экстракорпоральный контур с общим объемом 50 мл (одноразовые части) и объемом между точкой введения наномагнита и магнитным сепаратором 30 мл. При общей скорости потока 15 мл / мин соответствующее время контакта кровь-наномагнит в экстракорпоральном контуре составляло 2 мин. На основании результатов, полученных в серийных экспериментах (см. Дополнительные материалы и более раннее исследование [7]), 0,5 мг наночастиц / мл крови применялось для удаления как дигоксина, так и IL-1β.Чтобы продемонстрировать непрерывную магнитную очистку крови, были выполнены опыты по очистке крови in vitro и с использованием как разомкнутых (рис. 3), так и замкнутых контуров (рис. 4).
Рис. 3.
Магнитная очистка крови в непрерывных условиях ( A ). Образцы, собранные после сепаратора (конфигурация с разомкнутым контуром), показывают зависящую от концентрации наномагнита экстракцию дигоксина ( B ) и интерлейкина-1β ( C ). Второй цикл очистки очищенной крови снова показывает значительное снижение уровня дигоксина ( B ).
Рис. 3.
Магнитная очистка крови в непрерывных условиях ( A ). Образцы, собранные после сепаратора (конфигурация с разомкнутым контуром), показывают зависящую от концентрации наномагнита экстракцию дигоксина ( B ) и интерлейкина-1β ( C ). Второй цикл очистки очищенной крови снова показывает значительное снижение уровня дигоксина ( B ).
Рис. 4.
Непрерывная очистка 500 мл крови с добавлением дигоксина с использованием конфигурации с замкнутым контуром, когда очищенная кровь рециркулирует в резервуар для крови после сепаратора.Образец, взятый непосредственно после сепаратора при t = 2 мин (закрашенные треугольники), показывает концентрацию дигоксина в свежеочищенной крови. Все остальные экспериментальные точки (темные кружки) относятся к образцам, взятым из резервуара с кровью, где очищенная кровь смешалась с отравленной, как это произошло бы у пациента. Красная кривая представляет рассчитанную динамику клиренса при условии идеально перемешанного резервуара крови и постоянной эффективности удаления.
Рис. 4.
Непрерывная очистка 500 мл крови с добавлением дигоксина с использованием конфигурации с замкнутым контуром, когда очищенная кровь рециркулирует в резервуар для крови после сепаратора.Образец, взятый непосредственно после сепаратора при t = 2 мин (закрашенные треугольники), показывает концентрацию дигоксина в свежеочищенной крови. Все остальные экспериментальные точки (темные кружки) относятся к образцам, взятым из резервуара с кровью, где очищенная кровь смешалась с отравленной, как это произошло бы у пациента. Красная кривая представляет рассчитанную динамику клиренса при условии идеально перемешанного резервуара крови и постоянной эффективности удаления.
Очистка крови за один проход (ex vivo)
На рис. 3 показаны результаты однократных прохождений через устройство магнитной очистки крови («конфигурация с разомкнутым контуром», кровь проходит через устройство только один раз).Эффективность удаления определялась на образцах, отобранных сразу после сепаратора. Значительная эффективность очистки была достигнута в непрерывных условиях: 66 и 38% для дигоксина и IL-1β соответственно. Что касается дигоксина, образец крови (60 мл) собирали после очистки при первом прохождении и подвергали второму циклу очистки (повторное добавление свежих наномагнитов с вакантными участками связывания). Опять же, эффективность очистки 70% была достигнута с использованием той же дозы наночастиц (0.5 мг / мл) (рис. 3).
Непрерывная очистка крови ex vivo
Чтобы смоделировать более реалистичный сценарий, очистка крови работала в непрерывном режиме, когда очищенная кровь рециркулировала в резервуар для крови после выхода из блока разделения (конфигурация с замкнутым контуром). Непрерывное лечение проводилось на 500 мл крови с добавлением дигоксина (5,7 нмоль / л). В схему была добавлена одна дополнительная камера смешивания, чтобы увеличить эффективное время контакта до 2.5 мин при поддержании стандартной скорости потока 15 мл / мин. Что касается наложенного ограничения разбавления (≤20%), в целом 100 мл дисперсии FeC-анти-дигоксина (5 мг / мл) позволяли вводить в течение 90 минут (устойчивая концентрация наночастиц 0,38 мг / мл). мл). Образцы, взятые после сепаратора после первых 2 мин работы, позволили оценить начальную эффективность удаления за один проход 75%. Далее каждые 4 минуты отбирали пробы из резервуара для крови (рис. 4).Через 30 мин концентрация дигоксина уменьшилась вдвое и опустилась ниже токсичных уровней. Через час обработка была завершена при окончательной степени очистки 89%.
Теоретическая эффективность зазора
Теоретический уровень очистки был рассчитан на основе предположений об идеально перемешанном резервуаре крови (гомогенная концентрация) и постоянной доле дигоксина, удаляемой при каждом проходе (постоянная эффективность удаления за один проход). Расчетная эффективность удаления как функция времени показана на рисунке 4 красной линией и сравнивается с экспериментальными данными.
Обсуждение
Мы представляем первую реализацию очистки крови на основе магнитной сепарации [7] в непрерывно работающем устройстве для экстракорпоральной очистки крови. Возможность магнитной очистки крови с использованием функционализированных наномагнитов с металлическим сердечником доказана в экспериментах ex vivo , демонстрирующих чрезвычайно высокую эффективность удаления, что является очень многообещающим для будущего лечения в клинически критических ситуациях. Прототип устройства для магнитной очистки крови состоит из одноразового блока (стандартного утвержденного набора для переливания), в котором кровь циркулирует так же, как в стандартных системах очистки крови.Предметы, предназначенные для магнитной сепарации, такие как инжектор наномагнита и блок магнитной сепарации, были спроектированы как блоки многоразового использования.
Миниатюрная многолинейная система портов для инъекций, в которой диспергированные наномагниты вводятся в экстракорпоральный контур, позволяет одновременно вводить наномагнетики с различной целевой специфичностью. Это возможно благодаря независимому регулированию расхода каждой линии впрыска. Каждая линия может быть подключена к разному комплекту функционализированных наномагнитов.Такая гибкость дает возможность выполнять удаление веществ с учетом специфики пациента и различных клинических условий. Используя специфические для мишени наномагнетики, мы заявляем, что целенаправленная селективность этих магнитно-меченых лигандов до сих пор достигается только с помощью MDS (одновременного и селективного) [11] или колонок, покрытых FAB (Glycosorb) [12, 13]. Более того, наноразмерные частицы показывают сопоставимую контактную поверхность на вес по сравнению с мембранами или адсорбционными матрицами. Отсутствие диффузии пор затрудняет доступ к поверхности в случае сыпучих частиц.Таким образом, вся поверхность легко доступна и обеспечивает уникально быстрое связывание лиганда.
Более высокая эффективность очистки дигоксина может быть объяснена различными характеристиками связывания (константа связывания, кинетика связывания и диапазон концентраций соединения) и разной способностью наномагнетиков FeC-анти-дигоксин и FeC-анти-IL-1β. Эффективность удаления можно дополнительно оптимизировать за счет увеличения количества сайтов связывания на частицу (достижимого с помощью оптимального синтеза) и использования антител с еще более высокой константой связывания.Теоретический зазор был оценен исходя из того, что резервуар представляет собой идеально перемешанный резервуар (гомогенное распределение концентрации токсина), а контур контура — как преобразователь (фиксированная часть поступающего вещества постоянно преобразуется). Хотя модель является элементарной, теоретические значения (красная линия) хорошо согласуются с экспериментально определенной динамикой клиренса.
Дальнейшее фундаментальное улучшение предложенного подхода представлено непрерывностью подачи свежей адсорбционной поверхности, несущей свободные центры связывания.Это позволяет избежать насыщения, которое неизбежно для любого не регенерирующего сорбента. Например, если имеет место неспецифическая адсорбция, среда захватывает желаемые и нежелательные соединения, например по наблюдениям Де Вризе и др. . [14, 15] на адсорбенте Hopsal AN69: противовоспалительные соединения (т.е. антагонист рецептора IL-1) были подвержены адсорбции в такой же степени, как и провоспалительные агенты. Этот неблагоприятный факт ускоряет процесс насыщения (потеря целевых сайтов связывания на адсорбенте) и, таким образом, снижает скорость адсорбции, помимо удаления более широкого класса соединений, чем то, что может быть нацелено.
В используемом здесь режиме непрерывной очистки ex vivo основное предположение, также ранее сделанное Uchino et al . [16], состоит в том, что контейнер для крови может воспроизводить человеческое тело. Эта ограниченная модель не может принимать во внимание, что человеческое тело динамически взаимодействует с изменениями, вызванными экстракорпоральными факторами, то есть пациенты с сепсисом постоянно производят цитокины (т.е. синтез de novo ) во время терапии [2].
Экспериментальные условия, использованные в исследуемых экспериментах по очистке крови ex vivo , можно сравнить с реальными клиническими измерениями [17] с потенциалом расширения.Ожидается, что использование нескольких параллельных линий позволит обеспечить аналогичную эффективность экстракции для объема цельной крови пациента (4,5 л) при использовании тех же условий, что и в экспериментах ex vivo , показанных здесь. Хотя используемые наборы для переливания крови состояли из клинически одобренных материалов, токсичность введенных наномагнитов должна быть тщательно исследована, прежде чем технология магнитной очистки крови может быть оценена в первых in vivo испытаниях на животных .
Для клинического применения биосовместимость и / или полное удаление наномагнитов из крови перед рециркуляцией имеют решающее значение и в конечном итоге определяют клиническую применимость предлагаемого подхода.Различные настройки для устройств магнитной сепарации с высоким градиентом поля для эффективного улавливания магнитных частиц в условиях потока были разработаны и в настоящее время проходят испытания [9, 18, 19]. По сравнению с обычно используемыми шариками полимер / оксид металла, металлические наномагнетики обладают более высокими магнитными моментами, которые облегчают магнитное восстановление и разделение [20]. Матричные эффекты крови (высокий фон железа) и высокая химическая стабильность позволяют количественно определить комплекс наномагнетиков железа, инкапсулированных в углерод.Первые эксперименты с использованием смесей вода-глицерин с кровоподобной вязкостью и вышеупомянутых рабочих условиях (концентрация частиц перед сепаратором 500 ppm, скорость потока 15 мл / мин) показали, что железные наномагнетики <4,5 ppm обнаруживаются после сепаратора ( как определено атомно-абсорбционной спектроскопией, см. Дополнительные материалы), что соответствует эффективности удаления не менее 99%.
Хотя первые тесты гемосовместимости наномагнетиков с углеродным покрытием показали многообещающие результаты (нормальный гемолиз и параметры метаболизма железа, неизменная свертываемость крови) [7], биосовместимость — с особым акцентом на возможные взаимодействия с сосудистым отделом — требует тщательного исследования. чтобы обеспечить безопасное внедрение этой технологии (например,г. исключить опасность эмболизации). Совместимость наномагнитов с человеческим телом представляет собой серьезное ограничение представленного устройства для очистки крови на этом этапе, поскольку небольшое количество наномагнитов остается в крови после обработки (<1%). В качестве следующего шага к клиническому применению in vivo необходимо оценить эффективность и переносимость магнитной очистки крови на животных моделях (например, модель тяжелой интоксикации и грамотрицательного сепсиса на грызунах), чтобы доказать возможность применения в живом организме и получить представление в динамические взаимодействия организма с устройством для очистки крови (например,г. активация каскада свертывания или каскада комплемента, de novo синтез цитокинов).
Выводы
Успешное внедрение магнитной очистки крови в непрерывно работающий экстракорпоральный аппарат доказывает возможность использования магнитной сепарации для очистки крови. Результаты были достигнуты при первом внедрении такого устройства, которое уже показало многообещающую способность обрабатывать реальный объем крови пациента в клинически значимое время при увеличении масштаба.Он сочетает в себе множество положительных характеристик, о которых заявлялось в прошлом: высокая скорость выведения за относительно короткие сроки, индивидуальная настройка и потенциально высокая селективность по отношению к целям и отсутствие потерь жидкости или полезных веществ [16, 21–25]. В клинически сложных ситуациях, например сепсис и синдром системной воспалительной реакции [26], система, предложенная здесь, может предложить новый инструмент, который будет добавлен к существующим. Многочисленные наиболее привлекательные с клинической точки зрения гипотезы, такие как удаление цитокинов при сепсисе и его влияние на смертность, теперь еще предстоит доказать в первых испытаниях на животных.Необходимы подробные тесты in vivo , чтобы приблизить очистку крови на основе магнитной сепарации к повседневному клиническому применению.
Швейцарский национальный научный фонд (№ 406440-131268).
Заявление о конфликте интересов. R.N.G и W.J.S заявляют о праве собственности на акции компании Turbobeads GmbH. Авторы не имеют других соответствующих аффилированных или финансовых отношений с какой-либо организацией или организацией, имеющей финансовый интерес или финансовый конфликт с предметом или материалами, обсуждаемыми в рукописи, кроме тех, которые раскрыты.При создании этой рукописи не было задействовано никаких писателей. Результаты, представленные в этой статье, ранее не публиковались полностью или частично, за исключением абстрактной формы.
Список литературы
1.,,. ,,.Терапия экстракорпоральной очисткой крови при сепсисе и системном воспалении: биологическое обоснование
,Очистка крови в интенсивной терапии
,2001
, vol.Т. 132
Базель, Швейцария
Karger
(стр.367
—374
) 2.,,, И др.Действительно ли циркулирующие цитокины имеют значение при сепсисе?
,Kidney Int
,2003
, т.63
S71
3.,,, et al.Иммуноадсорбция на основе антител как терапевтическое средство
,Blood Purif
,1993
, vol.11
(стр.145
—149
) 4.,,, Et al.Система детоксикации на основе микросфер: новый метод конвективной очистки крови
,Artif Organs
,1996
, vol.20
(стр.420
—425
) 5.,,, Et al.Разработка аффинных микрочастиц для экстракорпоральной очистки крови на основе кристаллических белков поверхности клеток бактерий
,Ther Apher Dial
,2001
, vol.5
(стр.433
—438
) 6.,,.Высокопрочные металлические наномагниты для диагностики и медицины: углеродные оболочки обеспечивают долгосрочную стабильность и надежный химический линкер
,Nanomedicine
,2009
, vol.4
(стр.787
—798
) 7.,,, Et al.Очистка крови с использованием функционализированных наномагнетиков ядро / оболочка
,Small
,2010
, vol.6
(стр.1388
—1392
) 8 ..Хемокины — хемотаксические цитокины, которые опосредуют воспаление
,New Engl J Med
,1998
, vol.338
(стр.436
—445
) 9.,,, Et al.Параметрическое исследование портативного магнитного сепаратора для отделения наносфер от системы кровообращения
,Сен Sci Technol
,2010
, vol.45
(стр.355
—363
) 10.,,, Et al.Влияние сверхчистого и нестерильного диализата на воспалительную реакцию во время in vitro гемодиализа
,Kidney Int
,1996
, vol.49
(стр.236
—243
) 11.,.Экстракорпоральное удаление провоспалительных цитокинов путем специфической адсорбции на микросферах
,Asaio J
,1996
, vol.42
M911
12., , , и другие.ABO-несовместимая трансплантация почки от живого донора: иммуноабсорбция с колонками Glycosorb® неспецифична
,Swiss Med Wkly
,2008
, vol.138
(стр.56S
—56S
) 13.,,, Et al.Селективный аферез с использованием гликозорба AB (R) даклизумаба и индукции микофенолата мофетила без спленэктомии при АВО-несовместимых трансплантациях печени от живых доноров у взрослых
,Liver Transpl
,2004
, vol.10
стр.16
14.,,, et al.Удаление цитокинов при непрерывной гемофильтрации у пациентов с сепсисом
,J Am Soc Nephrol
,1999
, vol.10
(стр.846
—853
) 15.,,, Et al.Адсорбционные свойства цитокинов различных адсорбентов в иммуноадсорбционных колонках и недавно разработанный адсорбент: исследование in vitro
,Blood Purif
,2004
, vol.22
(стр.530
—536
) 16.,,, И др.Гемофильтрация сверхвысокого потока: новый метод удаления цитокинов
,Intensive Care Med
,2002
, vol.28
(стр.651
—655
) 17.,,, Et al.Аппараты для непрерывной заместительной почечной терапии
,Semin Dial
,2009
, vol.22
(стр.123
—132
) 18.,,, Et al.Характеристика прототипа компактного высокоградиентного магнитного сепаратора для детоксикации крови
,Sep Sci Technol
,2009
, vol.44
(стр.1954
—1969
) 19.,,, Et al.Теоретический анализ ферромагнитных микрочастиц в текущей жидкости под действием внешних магнитных сил
,Дж Magn Magn Mater
,2010
, vol.322
(стр.2454
—2464
) 20.,,.Ковалентно функционализированные наночастицы кобальта как платформа для магнитного разделения в органическом синтезе
,Angew Chem Int Ed
,2007
, vol.46
(стр.4909
—4912
) 21.,,, Et al.Влияние экстракорпоральной поддержки печени системой рециркуляции молекулярных адсорбентов и прометеем на окислительно-восстановительное состояние альбумина при острой или хронической печеночной недостаточности
,Ther Apher Dial
,2009
, vol.13
(стр.431
—436
) 22.,,.Клинический обзор: экстракорпоральное очищение крови при тяжелом сепсисе
,Crit Care
,2003
, т.7
(стр.139
—145
) 23 ..Аферез как терапия для пациентов с тяжелым сепсисом и синдромом полиорганной дисфункции
,Ther Apher Dial
,2001
, vol.5
(стр.123
—127
) 24 ..Есть ли будущее у адсорбционных методов при сепсисе?
,Blood Purif
,2000
, т.18
(стр.149
—155
) 25.,,, Et al.Экстракорпоральное удаление циркулирующих иммунных комплексов: переднее неселективное в зависимости от пациента
,Blood Purif
,2000
, vol.18
(стр.156
—160
) 26.,,. ,,.Обработка крови и плазмы: обоснование гемофильтрации большого объема
,Острая травма почек. Contrib Nephrol
,2007
, т.Т. 156
Базель, Швейцария
Karger
(стр.387
—395
)Заметки автора
© Автор 2011. Опубликовано Oxford University Press от имени ERA-EDTA.Все права защищены. Для получения разрешений обращайтесь по электронной почте: [email protected]
Гибридная терапия очисткой крови на основе иммуноадсорбента наноантител верблюда для пациентов с хронической почечной недостаточностью в нефрологическом отделении
В данной статье предлагается исследование влияния гибридной терапии очистки крови на основе иммуноадсорбента наноантител верблюда на пациентов с хронической почечной недостаточностью в отделении нефрологии. В данной работе гибридная терапия очисткой крови на основе иммуноадсорбента верблюжьих наноантител была применена к пациентам с хронической почечной недостаточностью и изучен лечебный эффект пациентов.Чтобы выделить эффект, для сравнения была создана контрольная группа. В этой статье был проанализирован клиренс низкомолекулярного токсина, средне-молекулярного токсина и адекватность диализа. Это исследование показало, что средняя адекватность диализа в контрольной группе составляла 1,23%, а в экспериментальной группе — 1,26%. Адекватность диализа в экспериментальной группе была значительно лучше, чем в контрольной. Кроме того, клиренс токсинов с малой и средней молекулярной массой в экспериментальной группе был значительно лучше, чем в контрольной группе.Видно, что гибридная терапия очисткой крови на основе иммуноадсорбента верблюжьих наноантител эффективна при лечении пациентов с хронической почечной недостаточностью в отделении нефрологии. Поэтому применение наноантител верблюда при лечении почечной недостаточности имеет большое значение.
1. Введение
Вообще говоря, хроническая почечная недостаточность относится к разнообразным хроническим заболеваниям почек, вызванным снижением скорости клубочковой фильтрации, что приводит к задержке токсических веществ, электролитному и кислотно-щелочному дисбалансу, эндокринным расстройствам и другим клиническим симптомам. и в конечном итоге перерастает в терминальную почечную недостаточность.Заболеваемость хронической почечной недостаточностью в последние десять лет имеет тенденцию к росту. Лечение этого заболевания — поддерживающее. Это длительный процесс, требующий больших человеческих и финансовых ресурсов, будь то тяжелое бремя для страны, семьи или отдельного человека. Поэтому очень важно изучить лечение хронической почечной недостаточности.
Ученые обнаружили, что у верблюдов есть естественные антитела к тяжелой цепи. Это антитело не содержит легкой цепи.Это однодоменное антитело, полученное после клонирования вариабельной области антител тяжелой цепи верблюда. Это антитело называется наноантителом и содержит только одну вариабельную область тяжелой цепи [1, 2]. Наноантитела верблюжьего происхождения обладают многими характеристиками, такими как небольшая молекулярная масса, высокая стабильность, хорошая растворимость, легкая экспрессия, слабая иммуногенность, сильное проникновение, сильное нацеливание и простая гуманизация. Благодаря этим характеристикам наноантитела, полученные из верблюда, достигли хорошего эффекта от применения при диагностике и лечении заболеваний.Применение наноантител верблюжьего происхождения также может снизить стоимость [3, 4]. Таким образом, большое значение будет иметь изучение действия наноантител, полученных из верблюда, при лечении пациентов с почечной недостаточностью, для профилактики и лечения пациентов с почечной недостаточностью [5, 6].
Кроличьи антитела против верблюжьих антител могут быть обнаружены с помощью ELISA и вестерн-блоттинга, и их реактивность по отношению ко всем различным подклассам верблюжьих IgG, которые очищены из сыворотки с помощью дифференциальной аффинной хроматографии на белок-g и белок-а, одинакова.Исходя из этого, Шен использовал сырую кроличью сыворотку в качестве сырья, очищенную белком на колоночной аффинной хроматографии, и приготовил стандартный запас кроличьих антител против верблюжьих (1 мг / мл) для обнаружения верблюжьего иммуноглобулина и его производных нанотел [7, 8 ]. С другой стороны, кроличьи антитела против верблюжьих антител также могут распознавать нанотела, и Шен предлагает альтернативный метод обнаружения основной массы этих рекомбинантных белков [9, 10]. В его исследовании обсуждается синтез нанотел, что имеет определенное эталонное значение для исследования данной статьи, но в его исследовании отсутствуют исследования по клиническому применению нанотел [11, 12].Чтобы изучить возможность трансформации иммунотоксинов в клинические антитела, Купер гуманизировал последовательность наноантител и дополнительно усек токсин pe38 из экзотоксина Pseudomonas A (PE) для получения более устойчивой к протеазе формы [3, 13]. Купер успешно сконструировал иммунотоксин, модифицированный молекулами CD7, с последовательностью наноантитела pe38 и доказал его потенциал в лечении CD7-положительных злокачественных опухолей, особенно острого Т-клеточного лимфобластного лейкоза [14, 15]. В исследовании Купера отсутствуют экспериментальные данные, и его убедительность слаба [16, 17].Экарт получил от иммунизированного верблюда антитело против cd133 с высоким титром, что послужило основой для получения наночастиц против cd133 [18, 19]. Экарт амплифицировал фрагмент гена внеклеточного домена CD133 с помощью ПЦР и соединил его с плазмидой pET28a для создания прокариотического вектора экспрессии. Рекомбинантный белок CD133 индуцировали экспрессию IPTG [20, 21]. Кроме того, он иммунизировал одного самца двугорбого верблюда и двух новозеландских кроликов очищенным антигеном rcd133. Титр поликлонального антитела и его специфическое связывание с белком CD133 определяли с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) и вестерн-блоттинга [22, 23].Исследования Экарта подтвердили, что поликлональные поликлональные антитела верблюда с высоким титром против cd133 обладают более высокой специфичностью, чем кроличьи, что заложило хорошую основу для будущих экспериментов, но для практического применения необходимы дальнейшие исследования [24].
Почечная недостаточность всегда была заболеванием, которое ставило в затруднительное положение физическое и психическое здоровье людей, а хроническая почечная недостаточность очень опасна для пациентов. С развитием науки и технологий гибридная терапия очистки крови на основе иммуноадсорбента верблюжьих наноантител стала применяться у пациентов с хронической почечной недостаточностью, но ее эффективность требует дальнейшего изучения.Таким образом, в данной работе изучается влияние гибридной терапии очисткой крови на основе иммуноадсорбента наноантител верблюда на пациентов с хронической почечной недостаточностью в отделении нефрологии. В процессе исследования в данной статье анализируется эффект клиренса низкомолекулярных токсинов, клиренс токсинов средней молекулярной массы и адекватность диализа. Результаты этого исследования показывают, что терапевтический эффект гибридной терапии очистки крови на основе иммуноадсорбента верблюжьих наноантител лучше, чем терапевтический эффект общей терапии очистки крови во всех аспектах.Поэтому применение наноантител верблюда при лечении почечной недостаточности имеет большое значение.
2. Материалы и методы
2.1. Материалы
Основными ингредиентами, используемыми в этой статье, являются следующие: сефароза CL-6B, ДМСО, эпихлоргидрин, 6-аминогексановая кислота, этаноламин, N, N-диметилформамид, 1-этил- (3-диметиламинопропил) карбодиимид, соляная кислота, ацетон, N-гидроксисукцинимид, фенолфталеин, тиосульфат натрия, иммуноглобулин (Ig), сывороточный альбумин человека (HSA), глицин и наноантитела верблюжьего происхождения.
Основными используемыми инструментами являются: меченый ферментом прибор, спектрофотометр видимого диапазона UV-1201, вакуумный насос циркуляционной воды SH-II, перистальтический насос постоянного потока BT0O-100M, стеклянная колонка и воронка с песчаным ядром G3.
2.2. Экспериментальные методы
2.2.1. Общая информация
Отобрано 45 пациентов с хронической почечной недостаточностью в отделении нефрологии с декабря 2018 по декабрь 2019 в стационаре. Возраст этих пациентов составлял 70 лет, младшему — 21 год.Средний возраст составил 46 лет, в том числе 28 пациентов мужского пола и 17 пациентов женского пола. У этих пациентов не было симптомов инфекции и исключены такие осложнения, как опухоль, сердечная недостаточность, отек легких и заболевание печени.
2.2.2. Схема эксперимента
Очистка крови в основном основана на принципе полупроницаемой мембраны, кровь и диализат вводятся в инструмент одновременно для проникновения, а направление потока противоположно. Удаление метаболитов или токсичных веществ из организма достигается за счет диспергирования, транспортировки и адсорбции на обеих сторонах гемодиализной мембраны.С другой стороны, остаточная вода в организме может быть удалена путем чрезмерной фильтрации и осмоса, а полезные компоненты, такие как кислый карбонат, могут быть добавлены для устранения влияния электролита, кислоты и щелочи.
В эксперимент включены 45 пациентов, случайным образом разделенных на две группы — экспериментальную и контрольную, в том числе 23 пациента в экспериментальной группе и 22 пациента в контрольной группе. В двух группах пациентов по возрасту нет значимой разницы между двумя группами, что не является статистически значимым.С другой стороны, с гендерной точки зрения, пациенты между двумя группами не были статистически значимыми, то есть не было значительной разницы между двумя группами по полу. В экспериментальном процессе экспериментальная группа получала гибридную терапию по очистке крови на основе иммуноадсорбента верблюжьих наноантител, в то время как контрольная группа получала обычную терапию по очистке крови. Другие переменные контролировались в тех же условиях, чтобы поддерживать единственную переменную и гарантировать надежность данных.
2.2.3. Индекс наблюдения
До и после лечения очисткой крови нам необходимо составить некоторые индексы наблюдения, чтобы определить экспериментальный эффект. Поэтому мы выбрали забор артериальной крови, затем разделили сыворотку и выполнили стандартное обнаружение в лаборатории больницы для определения креатинина сыворотки (SCR), азота мочевины (BUN), фосфора крови (P) и других показателей две группы пациентов. С другой стороны, нам также необходимо измерить паратироидный гормон (ПТГ), что было выполнено с помощью радиоиммуноанализа.Кроме того, нам также необходимо рассчитать скорость клиренса каждого токсина и адекватность диализа (kt / V ):
В формуле (1) CB и CA — это концентрации в крови до и после диализа.
Тогда формула расчета адекватности диализа (kt / V ) выглядит следующим образом:
В формуле (2) Ln представляет собой натуральный логарифм, R представляет собой отношение концентрации булочки после диализа к этой перед диализом UF представляет собой объем ультрафильтрации, а W представляет собой вес пациентов после диализа.
2.2.4. Обработка данных
Чтобы сделать данные более убедительными, в данной статье проводится их обработка. В процессе обработки данных используется программа обработки данных SPSS 20.0. С другой стороны, все данные в этой статье были протестированы с помощью теста F, и критерия хи-квадрат. Среди данных каждой группы есть данные с разницей, то есть, когда данные каждой группы есть, данные будут иметь статистическую значимость.
3. Наноантитела
3.1. Структура наноантител
Как известно, антитела представляют собой иммуноглобулины, секретируемые лимфоцитами или клетками памяти B , которые могут специфически связываться с соответствующими антигенами и являются важной частью иммунной системы человека. Наночастицы — это самые маленькие из известных антигенных фрагментов. Обычно молекулярная масса scFv составляет около 30 кДа, а молекулярная масса наночастиц составляет около 15 кДа, что эквивалентно одной десятой нормального антитела. С другой стороны, внутри наночастиц есть сульфитные связи, а на поверхности есть много гидрофильных остатков.Как известно, обычные антитела имеют шесть CDR, а наноантитела — только три. Однако, хотя наноантитела имеют только три CDR, они уже имеют полный антигенсвязывающий фрагмент. Не только это, но также они обладают сильной специфичностью и высокой аффинностью. Мы уже знаем, что наноантитела имеют три CDR. Сколько у него CDR? Четыре. Аминокислотная последовательность области скелета наноантитела относительно консервативна. Таким образом можно изменить высоту аминокислотной последовательности CDR, что является одним из определяющих факторов специфичности наноантитела.
3.2. Характеристики наноантител
3.2.1. Малая молекула, сильная структурная стабильность
Наночастицы очень маленькие и имеют молекулярную массу, составляющую одну десятую от нормального антитела. При комнатной температуре наноантитела легче хранить и использовать, чем другие обычные антитела. Более того, при 37 ° C в течение недели наноантитела могут поддерживать более 80% биологической активности. С другой стороны, структура наноантитела очень стабильна. Даже если он хранится при температуре 90 ° C в течение длительного времени, его природа может быть восстановлена, а его биологическая активность может быть восстановлена после восстановления комнатной температуры.
3.2.2. Хорошая растворимость и сильное проникновение в ткани
Гидрофобные остатки и гидрофильные остатки связаны с растворимостью веществ. В наноантителах гидрофобные остатки становятся гидрофильными остатками. Таким образом, растворимость наноантител очень хорошая, что лучше, чем растворимость обычных антител. С одной стороны, наночастицы обладают сильной способностью проникать в ткань, могут проникать в плотную ткань, играть в ней определенную роль и даже эффективно преодолевать гематоэнцефалический барьер.
3.2.3. High Affinity
Из-за структурной специфичности наноантител, наноантитела могут достигать частей тела, недоступных для обычных антител. Таким образом, наноантитела могут распознавать специфические структуры эпитопа. Таким образом, и белки, и вирусы в макромолекулах, гаптенах и пептидах в малых молекулах могут распознаваться один за другим с высоким сродством.
3.2.4. Слабая иммуногенность по отношению к человеческому телу
Как мы все знаем, размер и химическая структура молекул антител влияют на иммуногенность, в то время как молекулярная масса нанотел очень мала.Более того, нанотела имеют только один домен, поэтому иммуногенность нанотел будет слабее.
3.2.5. Легко экспрессировать, очищать и модифицировать
Нанотела не только малы по молекулярной массе, но и относительно просты по структуре. Мало того, нанотела кодируются одним геном. Таким образом, он может быть синтезирован в микроорганизмах, а методы генной инженерии могут быть использованы, чтобы позволить нанотелам экспрессироваться в больших количествах в некоторых микроорганизмах, тем самым достигая крупномасштабного производства и получения большего количества нанотел, тем самым снижая производственные затраты.
4. Полученное из верблюда наноантитело
Для поддержания нормальной функции антитела тяжелой цепи ген VHH верблюда был избирательно разработан во многих важных функциональных участках. В области FR2 области VH обычных антител v37, g44, L45 и w47 взаимодействуют с областью VL, тогда как в антителе тяжелой цепи эти четыре аминокислотных остатка являются характерными мутациями, а сайты мутаций — это F (Y) 37, E44, R45 и g47. Изменения этих четырех положений увеличивают гидрофильность VHH, поэтому нет необходимости формировать двустороннюю структуру с VL, чтобы поддерживать структуру стабильной.Ген верблюда VHH и ген VH человека очень похожи, сходство достигает 80–90%, а структура очень похожа. Они содержат три гипервариабельные области (FVR) и четыре области скелета (FR). Разница между VHH верблюда и VH человека невелика, но ее нельзя игнорировать. CDR1 и CDR3 VH были длиннее, чем VH. Участок CDR3 гена VHH состоит из примерно 16–18 аминокислот, тогда как участок гена VH человека и мыши состоит только из 14 и 12 аминокислот. В то же время мутации гена VHH fr2v37, G44, L45 и w47 существенно различались.
4.1. Приготовление адсорбента
Основные этапы синтеза адсорбента следующие: (1) Активация эпоксидной смолы. На этом этапе мы сначала берем 5 мл сефарозы CL-6B, затем промываем ее бидистиллированной водой и сливаем, а затем заменяем этанол в агарозном геле с бидистиллированной водой. После полной очистки сефароза CL-6B затем сушится и 2M NaOH используется для очистки геля, а затем жидкость сливается. После завершения этой процедуры мы сначала наливаем 5 мл 2MNaOH в коническую бутылку на 50 мл, затем помещаем высушенный гель в коническую бутылку и встряхиваем, чтобы его можно было равномерно перемешать.Затем добавляли 15 мл ДМСО и 2,5 мл EPI. Кроме того, сефарозу CL-6B помещали в коническую колбу на 50 мл и сразу же помещали в шейкер с постоянной температурой при 37 ° C. В то же время был начат отсчет времени. В этом процессе время реакции составляло 12 мин. После реакции сефарозу CL-6B очищали 30% ацетоном, 70% ацетоном и 100% ацетоном. После этого сефарозу CL-6B очищали 70% ацетоном и 30% ацетоном. После этого сефароза CL-6B была очищена большим количеством воды. (2) Связывание 6-аминокапроновой кислоты. На этом этапе гель сефарозы CL-6B-EPI сначала помещается в воронку песчаного керна G3, а затем промывается pH = л 1 концентрация 0.1 М буфер карбонат натрия / бикарбонат натрия. После завершения этого этапа слейте воду и добавьте 10 мл буферного раствора карбоната натрия / бикарбоната натрия, pH = мкл мкл. Наконец, добавляли 6-аминокапроновую кислоту с конечной концентрацией 0,34 М (примерно 250-кратный избыток молярной массы эпоксидной смолы), и доводили pH 2 м NaOH до pH 11,37 ° C, а затем проводили реакцию. выполняется при 170 об / мин в течение 17 ч. (3) Этаноламин блокирует эпоксидные группы. Мы поместили высушенную сефарозу CL-6B в сухую коническую колбу и затем добавили 20 мл 6% водного раствора этаноламина с pH = 10.Реакцию проводили при температуре 30 ° C и скорости вращения 175 об / мин в течение по меньшей мере 4 часов. После завершения реакции, в соответствии с соответствующей последовательностью, промойте большим количеством воды с двойным паром, промойте 1M NaCl, промойте водой с двойным паром, а затем измерьте плотность оставшейся эпоксидной группы. (4) NHS На этом этапе, мы сначала используем гель агарозы, чтобы промыть бидистиллированной водой. Для этой очистки требуется много бидистиллированной воды. После завершения этой процедуры мы используем 1 M NaCl для промывки, а затем используем бидистиллированную воду для промывки.После слива используем ДМФА для промывки, которую нужно проделать дважды. После этих шагов мы добавили 5 мл ДМФ в сухую коническую колбу и добавили ED-CHCl с конечной концентрацией 0,2 мкм и NHS 0,2 мкм, все из которых были молярно-массовым избытком в 100 раз плотностью эпоксидной смолы. После этого реакцию проводили при температуре 30 ° C и скорости 175 об / мин в течение 6 часов. После реакции его очистили большим количеством ДМФ и хранили в ДМФ при комнатной температуре. (5) Конъюгация наноантител На этом этапе мы использовали ультрафильтрацию, чтобы превратить раствор в буферный раствор PBS с pH 7.4 и концентрацией 10 мМ, а затем определяли концентрацию белка методом BCA. После этого гель агарозы промывали большим количеством воды и добавляли сефарозу CL-6B к буферу PBS для промывки и сушки. Затем 3,4 мл раствора наноантител добавляли в центрифугу на 10 мл и в центрифужную пробирку добавляли 1 мл геля сефарозы CL-6B при температуре 30 ° C в течение 175 об / мин. Время реакции составляло 2 часа. После центрифугирования супернатант отбирали для определения и определяли содержание белка в супернатанте, и супернатант отбирали для хранения при ультрафильтрации.После этого его дважды промывали 1 м NaCl, а затем центрифугировали сефарозу CL-6B при 8000 об / мин. После центрифугирования супернатант собирали и подвергали ультрафильтрации для извлечения наноантитела, полученного из верблюда. После этого непрореагировавшие наноантитела верблюжьего происхождения в супернатанте отсасывали с помощью пипетки. Оставшийся непрореагировавший NHS герметизировали 6% -ным раствором этаноламина с pH 8,0 и центрифугировали при 30 ° C и 175 об / мин в течение 4 ч. (6) Консервация. дистиллированной водой, а затем промыть раствором PBS после высыхания.После двукратной очистки снова слейте воду. После этого поместите приготовленный адсорбент в л × PBS с pH 7,4, храните его в холодильнике при 4 ° C, а затем добавьте конечную концентрацию 0,2% в зависимости от объема PBS, азида натрия, использованного в качестве антибактериального агента.
5. Результаты и обсуждение
5.1. Анализ клиренса двух групп низкомолекулярных токсинов
Через 6 месяцев клиренс низкомолекулярных токсинов в двух группах был проанализирован и сравнен с таковым до эксперимента [25, 26].
5.1.1. Анализ эффекта клиренса SCR крови
Эффект клиренса SCR крови в двух группах до и после эксперимента был проанализирован, и результаты показаны на рисунке 1.
Рисунок 1 показывает эффект клиренса SCR крови между две группы. На рисунке 1 мы можем видеть, что нет существенной разницы между двумя группами в средней концентрации SCR крови до эксперимента. Среди них средняя концентрация SCR в крови контрольной группы до эксперимента составила 703.12 мк моль / л, а средняя концентрация СКВ экспериментальной группы составляет 698,56 мк моль / л без существенной разницы. После эксперимента среднее значение концентрации СКВ крови в контрольной группе составило 502,43 мкМ моль / л, а среднее значение концентрации СКВ крови в экспериментальной группе составило 456,26 мкМ моль / л. Среднее значение концентрации СКВ крови в экспериментальной группе было значительно ниже, чем в контрольной группе, и данные между двумя группами имели очевидные различия.Кроме того, средняя скорость выведения SCR в контрольной группе составляла 28,5%, а в экспериментальной группе — 34,7%. Средняя скорость клиренса SCR в экспериментальной группе была значительно выше, чем в контрольной группе [27]. Следовательно, клиренс SCR в экспериментальной группе был лучше, чем в контрольной группе.
5.1.2. Анализ эффекта клиренса крови
PЭффект клиренса крови p в двух группах до и после эксперимента был проанализирован, и результаты показаны на рисунке 2.
Из рисунка 2 видно, что до эксперимента средняя концентрация P в крови контрольной группы составляла 2,43 ммоль / л , а средняя концентрация P в крови экспериментальной группы составляла 2,56 ммоль / л. Таким образом, до эксперимента не было значительной разницы между двумя группами. Затем, после эксперимента, средняя концентрация P в крови в контрольной группе составила 1,98 ммоль / л, а средняя концентрация в крови P в экспериментальной группе была равна 1.82 ммоль / л. Средняя концентрация P в крови в опытной группе была ниже, чем в контрольной группе. Рассчитывали скорость клиренса p из крови. Средняя скорость клиренса крови p в контрольной группе составила 18,5%, а средняя скорость клиренса крови p в экспериментальной группе составила 28,9%.
5.2. Анализ эффекта клиренса промежуточного молекулярного токсина (ПТГ) между двумя группами
Анализировали эффект клиренса ПТГ между двумя группами.Результаты показаны в Таблице 1 и на Рисунке 3.
|
Из таблицы 1 и рисунка 3 видно, что до эксперимента не было значительных различий в концентрации ПТГ в крови между двумя группами. Средняя концентрация ПТГ в крови контрольной группы составляла 296,35 пг / мл, а в экспериментальной группе — 295,35 пг / мл. Однако после различных методов лечения среднее значение концентрации ПТГ в контрольной группе составило 248.56 пг / мл, а среднее значение концентрации ПТГ в опытной группе составило 125,35 пг / мл. Среднее значение концентрации ПТГ в опытной группе было достоверно ниже, чем в контрольной. Кроме того, уровень клиренса ПТГ в экспериментальной группе составлял 57,6%, а в контрольной группе — только 16,1%. Видно, что лечебный эффект у опытной группы лучше.
5.3. Адекватность диализа (kt /
V ) Анализ между двумя группамиАнализировали концентрацию булочки крови между двумя группами.Результаты представлены в таблице 2.
|