Никотиновая кислота при похудении отзывы: Никотиновая кислота для похудения: инструкция, эффективные препараты, отзывы

Содержание

Никотиновая кислота для похудения, какие отзывы и как принимать?

Витамин РР или никотиновая кислота, действительно, помогают худеть, но не за счет сжигания жира или прочих волшебных эффектов — это вещество существенно ускоряет обмен веществ, что и позволяет активнее сбрасывать лишние кг. Но для этого придется в любом случае прилагать усилия — заниматься спортом, правильно питаться и пр.

Механизм действия кислоты

Более 60 метаболических процессов в организме зависят от наличия никотиновой кислоты — если ее поступает недостаточно, эти процессы замедляются.

Кроме того, ниацин позволяет:

  • снизить долю плохого холестерина в организме;
  • насытить клетки кислородом;
  • привести в порядок нервную систему, что ликвидирует переедание, возникающее, как реакция на стресс;
  • витамин отвечает за красоту кожи и волос, поэтому его полезное действие особенно оценят женщины.

Важно: никотиновая кислота не способна расщеплять жиры, контролировать аппетит или иным образом воздействовать на тех, кто привык неправильно питаться. Она реально помогает похудеть тем, кто страдает от замедленного метаболизма. За счет очищения можно заодно почистить организм от шлаков и токсинов, что также крайне важно.

Как насытить организм

Просто отлично, если вы будете каждый день употреблять продукты, богатые витамином РР, абсолютный рекордсмен по содержанию никотиновой кислоты — пивные дрожжи. Употребляя продукты питания, богатые кислотой, вполне можно набрать дневную норму и обойтись без таблеток.

Нормы употребления

Человек должен употреблять более 20 мг вещества в сутки. Когда вы приобретаете витамин в аптеке, как правило, его содержится в таблетке минимум 50 мг. Не рекомендовано употреблять более витамина, чем указано в инструкции того или иного препарата — похудеть быстрее у вас не получится, поскольку излишки витамина выводятся в неизменном виде с мочой.

Важно: передозировка грозит диареей, головной болью, нарушением зрения, зудом и покраснениями на коже, обострением аллергии.

Как принимать никотиновую кислоту

Дефицит вещества в организме можно установить по наличию следующих симптомов:

  1. Частые простуды.
  2. Запор.
  3. Сухость кожи.
  4. Проблемы с аппетитом.
  5. Бессонница.
  6. Апатия и упадок сил.
  7. Раздражительность.
  8. Головокружения и головная боль.
  9. Сильная утомляемость.
  10. Учащенное сердцебиение.

Определяете свою возрастную норму, согласно информации ниже:

Приобретаете в аптеке никотиновую кислоту в таблетках или драже, принимаете после еды, согласно инструкции, прилагаемой к упаковке лекарства.

Никотиновая кислота хорошо переносится, редко вызывает реакции, поэтому ее назначают детям и беременным женщинам. При приеме месячными курсами рекомендуется делать перерывы на 3-4 недели. Терапия может быть длительной, но не постоянной.

Еще раз повторим: витамин РР — не панацея для похудения, это лишь средство вспомогательной терапии для желающих сбросить лишний вес.

Ещё интересно почитать:

  • Какие можно придумать мотивации для похудения?
  • Что такое антиоксиданты и как они работают?

Витамины Раствор для инъекций Никотиновая кислота — «Никотиновая кислота для волос и похудения: Избавиться от ЦЕЛЛЮЛИТА. МАКСИМАЛЬНО отрастить волосы за месяц. Никотинка поможет)) Рецепты масок — с чем СОЧЕТАТЬ для УСИЛЕНИЯ эффекта. ФОТО ДО и ПОСЛЕ.»

Мне кажется, никотиновая кислота — это единственный витамин, который имеет так много названий. Если вы увидите в своих витаминных комплексах или косметических средствах следующее: Витамин PP, Витамин B3, ниацин, никотинамид, ниацинамид, то можете не сомневаться, это все о ней, такой любимой многими Никотинке в ампулах.

Сразу скажу: к никотину этот витамин не имеет абсолютно никакого отношения. Хотя, когда я была юной и наивной, и старшие подруги пытались склонить меня к табакокурению, их аргументом «за» было именно то, что раз есть такой витамин как никотиновая кислота, то, значит, с каждой сигаретой мы все больше и больше витаминизируемая. а взрослые врут, утверждая, что курить вредно

Кстати, есть информация, что в ниацин никотинка была когда-то переименована именно для того, чтобы избежать этого неприятного созвучия и нехороших ассоциаций.

✔️ ПОЛЬЗА ВИТАМИНА B3. ЛЮБОПЫТНЫЕ ФАКТЫ

Только витамин Д и никотиновая кислота (Niacin) могут производиться самостоятельно человеческим организмом. Все остальные витамины должны поступать из пищи.

Никотиновая кислота и похудение:
Недостаток в организме витамина В3 (ниацина) приводит к ожирению и этот витамин помогает снимать даже очень плотные отложения холестерина и других жиров на стенках кровеносных сосудов. Ниацин выводит также продукты обмена веществ из организма, смягчая боли при артрите.

Никотинка, нервишки и красивая кожа:
Ниацин необходим для нормального функционирования пищеварительной и нервной систем и здоровой кожи. Также он способствует выделению энергии из пищи и входит в состав ферментов, обеспечивающих клеточное дыхание.

Наша ампула с витамином В3 и сроки годности:
Ниацин — очень устойчивый витамин, на него не влияет длительное хранение, он не уничтожается в процессе приготовления пищи. Не «боится» ни высокой температуры, ни кислоты с щелочью, ни даже мощного ультрафиолетового излучения.

Из чего создаётся никотиновая кислота:
ниацин часто вырабатывается из вещества, известного как нейлон 6.6, — синтетического волокна, которое применяется для создания защитных ковриков, подушек и ремней безопасности и кабельных стяжек.

Где найти в природе:
Важнейшими источниками ниацина являются пивные дрожжи и мясо, также его можно найти в яйцах, рыбе, бобовых, орехах, дичи и, разумеется, в обогащенных хлебе и кашах. Кроме того, он содержится в зернах кофе, при обжаривании которых его количество только возрастает.

Какие можно сделать выводы?
Помимо известного «народного» применения для роста волос, никотиновая кислота:

Может оказать хороший эффект при тоске, подавленности и всегда, когда руки тянутся за гомеопатическими улучшателями настроения или широко разрекламированными таблетками от тревог и стрессов.

И тем более, перед тем как решиться на более серьёзные препараты от депрессии, назначаемые врачом, лучше всего удостовериться, а не является ли хандра банальной нехваткой витаминов группы В?

Я, кстати, делала анализ крови на водорастворимые витамины, и у меня как раз таки была выявлена их нехватка.

Так как витамины группы В лучше всего работают в комплексе, то лучше всего их получать:

  • Принимая аптечные пивные дрожжи без добавок, где они присутствуют в сбалансированно и в полном составе
  • Принимая витаминные комплексы с дрожжами в составе.
Это:
— «Пантовигар» для роста волос.
— Драже «Мерц»
— «Эксперт Волос» от Эвалар
  • Принимая витаминные комплексы, имеющие среди других витаминов группы В и никотиновую кислоту.
Например:

— «Пентовит» — для всех задолбавшихся, уставших, невротиков и ВСДшников. (Для сведения: в Нейромультивите её нет).
— Компливит «Сияние»
— Витрум «Бьюти»
— Дуовит для женщин
— Перфектил.

Однако перейдём к делу.

✔️ НАРУЖНОЕ ПРИМЕНЕНИЕ АМПУЛ НИКОТИНОВОЙ КИСЛОТЫ

Если кратко, то вот на что она способна:

Разберём по пунктам:

✔️ НИКОТИНОВАЯ КИСЛОТА ДЛЯ РОСТА ВОЛОС

Опыт курсового применения никотиновой кислоты для роста волос случился у меня несколько лет назад, поэтому фото остались только такие, но и они вполне показательны)

Лирика:

Мой тогдашний любимый обожал меня в образе роковой женщины-вамп, в который обязательно должен был входить черный цвет волос. Поэтому раз в месяц я стабильно ходила на покраску, в результате чего их вид стал более чем плачевным. Например, в отзыве про элюминирование вы можете увидеть фото, на которое я не могу смотреть, не вздрагивая. А ведь фото там — это не самый страшный их облик, а самый что ни на есть праздничный — сразу после салона красоты.
Так как любимым тот человек был долго, волосам досталось по самое не могу, и вот пришла пора с этой мочалкой что-то делать.

—-конец лирики—-

Я резко прекратила все эксперименты над волосами, несколько лет ходила чучундрой, но все таки добилась того, чего хотела, сделала волосы нормальными. Да не просто нормальными, а такими, что меня периодически знакомые и незнакомые спрашивают о способах ухода.

Это было долго, это было нудно, но оно того стоило.

И одним из препаратов, которые в этом приняли ОСНОВНОЕ участие, является никотиновая кислота.

Почему? Потому что волосы начинают быстрее расти, и всю сожженную красками пакость можно довольно быстро состричь.

Итак, что нам нужно?

В принципе, ничего, кроме ампул никотиновой кислоты, нам не надо.
Она одна прекрасно справится со всеми задачами.
Но если хочется поизвращаться и дополнить её эффект, то это можно делать как угодно и добавляя к ней все, что пожелаете.

В этом плане тут весьма благодатная почва, так как никотиновая кислота очень стойкая и перенесет любые издевательства и любые сочетания, не лишившись своей эффективности.

Лично я добавляю иногда её в мёд либо соло, либо с другими витаминами группы В в ампулах + экстракт алоэ вера.

Небольшой плюс такого способа — объёма наносимой массы становится больше, и распределяется она по коже головы легче. Просто с содержимым одной ампулы придётся повозиться.

☑️Лучший производитель никотиновой кислоты :
по своему опыту скажу, что это неважно. В наших аптеках основных производителей 2 и разницы я не заметила.

-Верофарм производит никотиновую кислоту Виал,
— Органика производит ее без названия.

Разница между ними только в способе упаковки. У Виал она поприятнее и посовременнее. Помещена в пластмассовый поддон и имеет линию, по которой надо ломать. Вторая всеми этими радостями не обладает.

☑️ КАК НАНОСИТЬ НИКОТИНОВУЮ КИСЛОТУ НА ВОЛОСЫ

Я делала так: немножко подпиливала пилочкой по месту перфорации (Виал), потом полотенцем отламывала кончик, шприцем набирала содержимое и по проборам наносила на кожу головы.

У Органики тот же принцип, только с обламыванием кончика надо повозиться. Но в некоторых ампульных наборах (как тут, например) есть специальные приспособления для этого. Такими я и пользуюсь для вскрытия)))

☑️ СКОЛЬКО БРАТЬ АМПУЛ И КАК НАНЕСТИ ПО ВСЕМ ПРОБОРАМ?

У меня больше одной ампулы не получилось по причине дискомфорта. Кровь настолько сильно приливала к голове, что я чувствовала себя как в тисках. С одной ампулой ничего такого не наблюдалось, кроме ощущения легкого приятного тепла.

А вот насчет равномерного нанесения по всей волосистой части головы волноваться не стоит. Наша задача, образно говоря, только пригнать кровь к назначенному месту. И уже на месте они там сами с никотинкой разберутся. Поэтому я прогоняла шприц, равномерно выдавливая жидкость, по 3-4 проборам и потом немного растирала руками по всей коже головы. Результат все равно был.

☑️ КАК ПОДГОТОВИТЬ КОЖУ ГОЛОВЫ ДЛЯ УСИЛЕНИЯ ДЕЙСТВИЯ

Здесь мне на помощь приходят два варианта:


*Только в последнее время я стала брать вместо обычной соли — розовую гималайскую. Она теперь вполне доступна для покупки, а пользы от неё коже головы в разы больше, так как в ней содержится огромное количество минеральных веществ и микроэлементов.
  • Экспресс- создание глубокоочищающего шампуня (читать тут)

С помощью такой нехитрой подготовки кожа головы очистится от всей накопленной гадости и будет полностью готова к процедуре. Кроме того, массаж, который проделывается в процессе, уже пригоняет кровь к голове, что не может не повлиять благотворно на рост волос))

☑️ Противопоказания у никотиновой кислоты:
Есть.
Перечислять их, как и побочные эффекты не возьмусь, это можно найти и в интернете и в самой инструкции по применению никотиновой кислоты.

Знаю только, что во время головной боли следует поостеречься, она может усилиться. А также никто не отменял индивидуальную непереносимость. А в случае с витаминами группы В она достаточно часто встречается.

☑️ Беременность и кормление грудью.

Я резко против того, чтобы делать что-либо экстремальное во время беременности, так как в этот период главное — не волосы. Хотя соблазн велик, мне потребовалось много усилий, чтобы не делать этого тогда)))

Кормление грудью — тоже как бы против, но не настолько категорично, поэтому без фанатизма, но лично я делала. Но после 5 ампул бросила. Ни с волосами, ни с ребенком ничего тогда не произошло.

Но это мое мнение. Все равно каждый решает для себя сам.

Длительность курса:
Минимум 10 ампул. Как я уже сказала, после 5 ничего значительного замечено не было. Оптимально — 15.

Я делала полный курс в течение месяца, после каждого мытья головы, через день. То есть 15 ампул.

Результат: Фееричный.

Здесь нужно рассказать о своих волосах:
Сами по себе они НЕ РАСТУТ. Если я не делаю ничего, что ускоряет их рост, или ухаживаю, но по их мнению, неправильно, то за месяц прирост не заметен вообще.
Так у меня случилось со знаменитым «отращивателем волос» — касторовым маслом.

Фото до и после месячного курса применения скажут о многом



*на подписи не обращайте внимания, я их делала для других отзывов. Разница между левой и правой фото — месяц.

А вот когда волосам что-то нравится, они реагируют очень живенько. Это относится как и к витаминкам для роста волос, так и к наружным способам воздействия.

Что касается результата курсового применения никотиновой кислоты, то фото всей длины прикладывать нет смысла, так как неистово состригала кончики при первой же возможности.

А вот фото корней волос расскажет о многом.

3 сантиметра, если не больше, после месяца применений. Кстати, после окончания курса, усиленный рост волос продолжается ещё некоторое время, так что на фото, которые сделаны спустя приблизительно неделю после непосредственного окончания применения, результат вообще сказочный.

Обычный прирост волос — максимум 1 см.

Фото после применения никотиновой кислоты:




✔️ КАК УСИЛИТЬ ЭФФЕКТ НИКОТИНОВОЙ КИСЛОТЫ ДЛЯ ВОЛОС?

Здесь все просто.


  • Либо совмещать с дополнительной наружной стимуляцией, например:

Массаж волосистой части головы (здесь есть схема как правильно это делать самостоятельно)

Дарсонваль — как дома, так и в салоне

Мезороллер — как дома, так и в салоне

☑️ Что делать после курса никотиновой кислоты для поддержания эффекта?

Помимо всего вышеназванного (Дарсонваль, массаж и пр), можно поступить проще: раз в неделю смешивать обычную покупную маску, которая предполагает нанесение её на кожу головы, с содержимым ампулы.

Маска, для примера — ТАКАЯ

✔️ Чем можно заменить никотиновую кислоту? Аналоги для роста волос

Если так случилось, что на никотинку выявилась непереносимость, а длинных волос хочется, то можно попробовать варианты. Тут все индивидуально, но я расскажу про свой личный хит-парад (в порядке убывания):

☑️ ЛИДЕРЫ
1 — ДАРСОНВАЛЬ

2 — ЭФИРНОЕ МАСЛО БЭЙ

3 — ЭФИРНОЕ МАСЛО РОЗМАРИНА

4 — ДРОЖЖЕВАЯ МАСКА

5 — РЕПЕЙНОЕ МАСЛО

☑️ АУТСАЙДЕРЫ (но многим подходит)
1 — КАСТОРОВОЕ МАСЛО

2- ПЕРЦОВКА

Чтобы завершить тему с волосами, скажу что ещё можно делать параллельно, чтобы облагородить внешний вид волос во время их отращивания. Это, кстати, очень важно. Правильно отрощенные волосы будут меньше сечься, вам не будет необходимости часто их стричь, следовательно процесс достижения нужной длины пойдёт веселее)))

—————МОЙ ПОЛНЫЙ УХОД ЗА ВОЛОСАМИ-————

ЛАМИНИРОВАНИЕ В САЛОНЕ — обволакивает каждый волосок пленочкой, и будет защищать их приблизительно месяц от внешних повреждений

ЛАМИНИРОВАНИЕ ДОМА ТРЕМЯ СПОСОБАМИ — эффект, конечно, не такой масштабный, но благодаря такому уходу волосы будут гладкими, вследствие чего их травматизация снижается

БОТОКС ДЛЯ ВОЛОС — КЕРАТИНОВОЕ ВОССТАНОВЛЕНИЕ — ОБЖИГ — ЭКРАНИРОВАНИЕ — ГЛАЗИРОВАНИЕ — КАУТЕРИЗАЦИЯ- СЧАСТЬЕ ДЛЯ ВОЛОС

Все эти процедуры направлены на уход за волосами. Кому-то больше подходит одно, кому-то другое. Тут надо пробовать. Удачная для ваших волос салонная процедура поможет волосам меньше путаться, быть гладенькими и блестящими. Они будут меньше травмироваться. Следовательно, отрастать будут здоровенькими.

Салонные уходы, кстати, не панацея. Точно так же можно удачно подобрать СВОЁ масло, которое заменит все процедуры вместе взятые. Мои фавориты для длины волос (на корни их редко наношу):

-Льняное масло
-Масло жожоба
-Аргановое масло
-Кокосовое масло

✔️ НИКОТИНОВАЯ КИСЛОТА ДЛЯ БРОВЕЙ

Там, где волосы, там обычно и брови)))
Чем их только не пытаются отрастить. В последнее время в иностранных изданиях я вижу много нетрадиционных способов: соком лука, долькой чеснока…

Но на российских широтах в свете последнего тренда, окрашивания бровей хной, увеличилось и число попыток отращивания бровей касторовым маслом, так как там предполагается домашний уход за окрашенными бровями именно с его помощью. К слову, попытки эти для меня оказались неудачными, и я растеряла их остатки вместо того, чтобы получить новые.

Но я не теряла надежды, и прибегнула к помощи никотиночки.

Результат порадовал.
Покажу процесс в картинках:

Эти фото — до после курса касторового масла. Предполагалось, что они станут гуще. На деле получился обратный эффект.


Ну а это — после того, как я каждый день втирала в брови никотиновую кислоту. Результат где-то через месяц. Даже меньше.


Так что в погоне за густыми бровями не стоит списывать со счётов никотиночку, если вдруг другие средства дали сбой, как в моем случае)))

✔️ НИКОТИНОВАЯ КИСЛОТА ДЛЯ ПОХУДЕНИЯ И ОТ ЦЕЛЛЮЛИТА

Я нежно люблю продукцию для тела от ФЛОРЕСАН. В любой период времени у меня всегда что-то стоит из арсенала этой фирмы.

На меня их средства действуют. И, обращая внимание на состав, я заинтересовалась тем, что практически всегда там присутствует никотиновая кислота. Что в термо-маске, что в ночном геле, что в других средствах. За редкими исключениями.
Именно это побудило меня когда-то изучить вопрос и узнать, что помимо роста волос, никотиновая кислота помогает терять вес и избавляться от целлюлита ))

Поэтому я стала добавлять её в обертывания. Как магазинные, так и сделанные собственноручно.

Возьмём, к примеру, шоколадное обёртывание.

В чистом виде я его считаю баловством и больше процедурой для релаксации, удовольствия и выработки гормонов счастья. Но вот с добавлением одной лишь ампулы, приятное становится ещё и полезным. Я всегда чувствую дополнительное тепло, когда к какао добавляется ещё и никотиновая кислота))
Попробуйте!

*рецепт тут

Так же и со специальными масками для похудения.

Берём, к примеру, термо-маску. Она сама по себе прекрасна.
А с добавлением ламинарии (фукуса) и никотиновой кислоты, становится
мощнее в 3 раза
вы лишаетесь проблемы с раскладыванием по себе кусочков морской капусты (кто пробовал, тот поймёт)))

Сплошные бонусы!

Результат применения вас как минимум приятно порадует, максимум — потрясёт. Но для этого, все-таки, лучше комплексный подход:

-АНТИЦЕЛЛЮЛИТНЫЙ МАССАЖ

— КОМПЛЕКС ОБЕРТЫВАНИЙ ДЛЯ ПОХУДЕНИЯ

— БОРЬБА С ЦЕЛЛЮЛИТОМ

— ФИЗИЧЕСКИЕ НАГРУЗКИ

— ИНДИВИДУАЛЬНАЯ ДИЕТА

Мои результаты:

✔️ НИКОТИНОВАЯ КИСЛОТА ДЛЯ КОЖИ ЛИЦА

О том, что витамин В3 применяется и в средствах для лица, я узнала вот из этой замечательной книжки

К сожалению, с возрастом собственный синтез ниацина может несколько замедляться, и это становится одной из важных причин старения кожи: развивающийся недостаток витамина B3 нарушает микроциркуляцию, ухудшает состояние стенки микрокапилляров, снижает активность синтеза коллагена и эластина. Ниацин, нанесенный на кожу, способен частично компенсировать этот дефицит. При этом молекула ниацинамида имеет небольшой размер и легко проникает даже в глубокие слои кожи.

Ниацин (ниацинамид) – космецевтическое средство с доказанной эффективностью, что встречается относительно редко. На сегодняшний день научно подтверждены несколько эффектов витамина B3 при местном применении. Через четыре недели регулярного использования средства, в составе которого было 2 % ниацинамида, у волонтеров, во-первых, кожа «лучше (на 24 %) удерживала воду в эпидермисе, что, судя по всему, связано с активизацией синтеза некоторых важных белков эпидермиса – кератина, филаггрина и инволюкрина. Во-вторых, у них усилился синтез коллагена и эластина клетками кожи – фибробласты становились более «молодыми» и активными, количество коллагена увеличивалось больше, чем вполовину. В-третьих, у испытуемых уменьшалась выраженность пигментации благодаря способности ниацинамида частично блокировать перемещение гранул пигмента в верхние слои кожи. И наконец, у них уменьшалась выраженность акне, причем средство, содержавшее ниацинамид, показало бóльшую эффективность, чем традиционно использовавшийся в этих целях антибиотик клиндамицин.

Судя по описанию, это именно то, что мне нужно. Но, к сожалению, регулярно пользоваться никотиновой кислотой таким образом у меня пока не получилось. Пилинги дают более быстрый эффект. Но я не теряю надежды! Если удастся, обязательно дополню отзыв своим опытом. А если нет — то как минимум куплю крем с содержанием этого витамина))

Как видите, никотиновая кислота — друг девушек прям со всех сторон. Поэтому рекомендую)))

Всем спасибо за внимание!

—————

——-

комплекс упражнений для похудения отзывы

комплекс упражнений для похудения отзывы

Тэги: лучшие таблетки для похудения рейтинг отзывы 2019, купить комплекс упражнений для похудения отзывы, амвей средство для похудения отзывы.

комплекс упражнений для похудения отзывы

препараты с хитозаном для похудения, голдлайн таблетки для похудения инструкция по применению, препарат для похудения сахарном диабете, капсулы волшебные бобы для похудения отзывы, таблетки для похудения лираглутид цена

дешевые таблетки для быстрого похудения

капсулы волшебные бобы для похудения отзывы Упражнения для похудения отзывы. Рекомендуют 100%. Эффект. Что касается упражнений для похудения, то для меня все же в этом плане на первом. Что это такоеэто несколько сбалансированных комплексов, каждый из которых направлен на проработку, так называемых проблемных зон. Вы можете выбрать. Упражнения для ягодиц и бедер: дом или спортзал?) уже через месяц попа скажет вам спасибо! /+ фото ДО и ПОСЛЕ, сравнение. Знаюзнаю, уже надоела многим со своим похудением целлюлитом приведением фигуры в порядок, но все равно. Отзыв не для ленивых. Как фитнес помогает держать тело в форме, как и когда я тренируюсь и какие виды спорта помогают совместить приятное с полезным. Фото результаты прилагаются. Наверное фитнес со мной уже последние лет 78. Вот хочу попробовать комплекс упражнений для похудения дома, чтобы хоть немного привести фигуру в норму перед отпуском. Надеюсь, что моего запала хватит для того чтобы заставить себя заниматься дома добросоветстно))) Так что буду очень благодарна, если посоветуете подходящий комплекс. Комплекс упражнений с синди кроуфорд неплохой. Моя мама занималась и фигура стала после их тренировок очень красивой, про программы не знаю, просто были 2 кассеты, каждый день вечером + пояса для похудания на талию, бедра и плечи. Нравится0. Не нравится0. После беременности, как перестала кормить грудью худела так во первых, полностью исключила все жирное, мучное, картошку. Ела только овощи и фрукты, вареную курицу иногда, и обязательно раз в день куриный бульон с петрушкой и морковкой. Во вторых, каждый день кросс (начала с 2 км, потом по 4. Помогите найти самый эффективный комплекс упражнений для похудения. Времени нет совсем, в спортивный зал бегать, хочу дома заняться. Интернет кишит всякими видео, но хочется уже испробованное, что реально поможет. Лучшие упражнения для похудения, техника выполнения, отзывы и результат — Evehealth. Постепенно этот комплекс упражнений для похудения в домашних условиях можно разнообразить, добавляя или заменяя то или иное упражнение на другое, но это по вашему усмотрению. Итак, подводя итог, для. Упражнения для похудения: отзывы. Автор: Дмитрий Сироткин. Но с жирным тельцем комплексы не дают идти в бассейн. Вот такая нехудая подборка отзывов о тренировках для похудения получилась. Упражнения для похудения – отзывы. 4.9 из 5 на основе 35 отзывов. Всем добрый день! Сегодня хочу рассказать вам и замечательном комплексе упражнений Кайлатекс, который все больше и больше набирает популярность. таблетки для похудения лираглутид цена кленбутерол таблетки для похудения МБЛ 5 купить в ПетропавловскеКамчатском

препараты для похудения при грудном вскармливании дешевые таблетки для быстрого похудения средство похудения после 50 лет лучшие таблетки для похудения рейтинг отзывы 2019 амвей средство для похудения отзывы препараты с хитозаном для похудения голдлайн таблетки для похудения инструкция по применению препарат для похудения сахарном диабете

Купить MBL-5 можно только в интернете. При этом стоит учесть – подлинная продукция продается исключительно на официальном сайте. При посещении электронного ресурса можно ознакомиться с инструкцией, составом препарата и его стоимостью. Важно учесть, что производитель делает все, чтобы она была максимально доступна каждому. После беременности набрала лишних 25 кг, худеть решили вместе с подругой. Долго искали способ, пока не остановились на MBL-5, много хороших отзывов. После 3 дней приема, появилась легкость, а еще пропало чувство постоянного голода. За неделю же мы скинули, почти по 5 кг! Препарат просто чудо, пока всем довольна. О препарате мне рассказала подруга, она постоянно находится в поисках новых способов похудения. Хвалила очень, да я и сама заметила, что она лучше выглядеть стала. Я решила рискнуть и тоже заказала. Начала принимать средство, при этом есть хотелось также сильно как и раньше. И сдерживаться было трудно. Ела довольно много. Думала, что здесь работает накопительный эффект и вскоре мой аппетит пропадет. Но нет, и после двух недель применения есть хотелось по-прежнему. Да, в итоге я сбросила 3 кг за две недели, но стоит ли это того? Мы стараемся дать максимально актуальную и полезную информацию для вас и вашего здоровья. Материалы, размещенные на данной странице, носят информационный характер и предназначены для образовательных целей. Посетители сайта не должны использовать их. Препараты для быстрого похудения, которые реально помогают. В их составе микрокристаллическая целлюлоза. Если вы не хотите пить сильные таблетки для похудения, то принимайте витамины. Вам поможет комплекс Витрум, способствующий похуданию и нормализации обмена веществ. Преимущество таблеток для похудения в быстроте действия, удобстве применения и широком ассортименте. Поэтому при выборе средства от похудения нужно внимательно изучать состав и не приобретать сомнительных и опасных средств. Недорогие таблетки для похудения. Турбослим. Лекарственные препараты для похудения, которые реально помогают и продаются в аптеке. Для эффективного похудения нужно принимать по 1 таблетке за сутки в течение. Обязательно во время курса пить несколько литров простой воды в день. Препараты. Таблетки для похудения: список самых действенных препаратов. 2. 2159. Согласно статистике каждый пятый человек на земле страдает от разной степени ожирения. Не нужно следовать советам подруг и знакомых, ибо как не все препараты. Никакие самые лучшие таблетки для похудения не дадут положительных результатов. Так еще я их параллельно с противозачаточными таблетками пила. И на действие таблеток, капсулы модельформ никак не повлияли. Какие таблетки для похудения самые эффективные. Как правильно подойти к разрешению вопроса наиболее эффективных препаратов для похудения?. Не нужно следовать советам подруг и знакомых, ибо как не все препараты одинаково воздействуют на разные организмы. Часто недобросовестные продавцы. Средства для похудения мужчин. Специалисты часто поговаривают о том, что лишний вес мужчине труднее сбросить, чем женщине. Если учесть фактор мужской лени, то можно с этим мнением согласиться. Пить нужно через пару часов после еды или за полчаса до неё. Таблетки для похудения, которые производятся швейцарской компанией F. HoffmannLa Roche Ltd. Являются лекарственным препаратом для лечения ожирения. Эффективные и недорогие таблетки для похудения: есть ли такие. Если бы надежные таблетки для похудения существовали, то эти статистические. Нельзя пить такие препараты людям с психическими нарушениями, декомпенсацией сердечнососудистой патологии и неконтролируемой артериальной гипертензией.

комплекс упражнений для похудения отзывы

средство похудения после 50 лет

Прочла о средстве MBL-5 на сайте производителя. Сколько диет перепробовала, но моя проблема лишнего веса не была решена. Принимала препарат по инструкции. Оказывается, причиной моих недостатков, было нарушение обменных процессов. Как только организм перестроился на правильную работу, я легко избавилась от лишнего веса. Витамины Фармстандарт Никотиновая кислота в таблетках отзывы. Среднее. Никотивную кислоту ,приоборела для улучшения метаболизма.Иных эффектов от этого препарата ,не жду.Так как их и производитель не обещает. Как нужно принимать никотиновую кислоту в таблетках для похудения. Поклонники никотиновой кислоты для похудения отзывы негативного характера не воспринимают всерьез, ссылаясь на неумение людей в правильном выборе дозы и применении. Довольные результатом женщины отмечают, что. Тут я читала отзывы, ну и наткнулась на полезную информацию, оказывается, что никотинка в таблетках ещё и может чутьчуть. Для похудения можно употреблять не более 100250 мл никотиновой кислоты в сутки (суточная потребность составляет 1821 мг) – такой дозы будет вполне достаточно для. Никотиновая кислота это витаминный препарат, о котором я недавно узнала. Применяют его при дефиците в организме витамина В 3. Препарат выпускается в маленькой баночке, которую удобно носить с собой. Таблетки маленькие, по 50 мг. Расскажем об эффективности никотиновой кислоты для похудения. Отзывы врачей и результаты худеющих. Таблетки никотиновой кислоты. Витамин РР в таблетках с содержанием действующего вещества 0,05г выпускают многие. Таблетки Сибутрамин для похудения — кто принимал, какие отзывы?. Я никотиновую кислоту в таблетках принимала для других целей — были проблемы с сосудами. И ее же мне кололи внутримышечно. В сигаретах никотиновая кислота содержится в небольшом количестве и действительно усваивается тканями. Но курить, чтобы обеспечить организм витамином не стоит: постоянное попадание алкалоида в ротовую полость и органы дыхания провоцирует развитие сердечных и дыхательных патологий. Никотиновая кислота катализатор похудения. Она ускоряет метаболизм и стимулирует выработку гормона радости. Применение никотиновой кислоты для похудения поддерживают многие врачи и диетологи. Она ускоряет более 60 процессов обмена в организме, стимулирует выведение шлаков. Никотиновая кислота для похудения, отзывы худеющих и врачей, как ее принимать?. Никотиновая кислота в таблетках и уколах для холестерина. Витамин способствует снижению уровня так называемого плохого холестерина на 25 %. Одновременно регулярное применение никотиновой. Препарат никотиновой кислоты выпускается в разных формах: капсулах, таблетках, порошке и в форме раствора для. Отзывы, которые оставляют женщины после приема никотиновой кислоты для похудения, противоречивы. Те, кто остался доволен курсом ее применения, отмечают. комплекс упражнений для похудения отзывы. кленбутерол таблетки для похудения. Отзывы, инструкция по применению, состав и свойства. Препарат для похудения TALIA отзывы. Рекомендуют 0%. Эффект. Поддалась на рекламу в сети. Все 100 процентов положительные отзывы о шипучках TALIA. Пропила Талия шипучие таблетки. Результат ноль это после 12 дней. Отзывы реальных покупателей на таблетки Talia. Таблетки Talia – быстрый способ похудеть к лету, скинуть за. Препарат Talia создавался с учетом их мнения, и мы приводим вам реальные отзывы врачей на таблетки для похудения Talia: Елена Ратингер, эндокринолог из СанктПетербург. Вред от лишнего. Написать отзыв Отзывы Каталог Пользователи Рейтинги. Купила средство от сжигания жира Talia и нисколько не пожалела. Сомневалась не очередной развод ли оно, но мои опасения не оправдались! Таблетки для похудения Талия – продукт современной фармакологии, вобравший в себя новейшие разработки и богатый опыт фитотерапии. Отзывы покупателей про растворимые таблетки для похудения Talia. Средство для похудения Талия – реальные отзывы и инструкция по применению. Ставшее недавно известим широкой публике средство. Выбирая препарат для похудения и как вариант, рассматривая таблетки Талия, помните о том, что как бы вам не хотелось быть стройной и красивой, на первом месте. Отрицательные отзывы о таблетках Талия: почему есть недовольные покупатели. Как принимать таблетки Талия: все нюансы приема для качественного похудения. Чтобы прием препарата Talia давал результаты, очень важно четко соблюдать инструкцию по применению и не забывать. Реальные отзывы о Talia шипучих таблетках для похудения, читайте на нашем сайте. Никогда не думал, что буду писать отзыв на препарат для похудения – всегда считал это женской прерогативой, хотя лишним весом страдаю давно. Когда к нему прибавились проблемы с сердцем и обменом веществ. Содержание: Разоблачение Талия для похудения. Реальные Отзывы о Таблетках для Похудения Talia. Одним из новых препаратов, позволяющих снизить вес без его последующего увеличения, являются шипучие таблетки Talia для похудения. Основное отличие новой разработки — устранение. Шипучие таблетки Talia (Талия) для похудения детальное описание, цена, где купить. Врачи тоже забили тревогу. Поэтому отзывов о препарате от специалистов. Реальные отзывы покупателей о таблетках Talia: Анна, 34 года, Саратов: Причиной полноты стал стресс на фоне развода с мужем. Формула препарата в таблетках Talia для похудения разгоняет метаболизм даже во сне, за счет чего потеря веса не прерывается. Отзывы покупателей. Татьяна, 42 года, Москва: После развода стало сложно контролировать вес. Ведь уже реально стали видны первые результаты. Энергии столько, что готова бегать. Талия становиться тоньше до 11 см за 28 дней. Формула Talia для похудения с растительными экстрактами ускоряет метаболизм и активизирует. Talia – таблетки для похудения. 11 Август, 2019 Реальные отзывы. Отзывы врачей и покупателей. Где купить препарат. Как заказать средство для похудения. Цена. Не думала, что в короткие сроки можно будет убрать излишний жир на талии. Обзор средства для похудения Talia, принцип его действия, состав и подробная инструкция по применению, а также отзывы. Возможно, вас одолевают сомнения касательно эффективности Talia для похудения, и вам кажется, что таблетки помогут кому угодно, но только не вам. Давайте же разберёмся, когда. американский препарат Talia для похудения из сша, купить, отзывы, для сжигания жира ускорит метаболизм. Производитель обещает минус 15 см в талии за 28 дней. Реальные отзывы говорят о минус 56 килограммах за 710 дней. Покупатели в своих многочисленных комментариях указывают.

✅ кроссфит препарат для похудения отзывы

Тэги: жиросжигающие препараты для похудения названия, заказать кроссфит препарат для похудения отзывы, граната для похудения в капсулах.


худейка капсулы для похудения, похудение средство травы, таблетки для похудения в рб, препараты снижающие аппетит для похудения в аптеках, МБЛ 5 купить в Вологде

Описание

Среди сотен различных средств для похудения невероятно трудно выбрать подходящий вариант для себя. Изучение отзывов в интернете, к сожалению, не всегда помогает. Даже один и тот же препарат может кому-то помочь, а для кого-то оказаться абсолютно бесполезным. А самая большая проблема в том, что многие сайты сотрудничают с производителями лекарств и, следовательно, публикуют только положительные и восторженные комментарии. Отрицательные мнения при этом просто удаляются. Создается впечатление, что препарат действительно волшебный. Курс MBL-5 для похудения предусматривает возможность длительного курса, в зависимости от желаемого результата. Капсулы можно принимать без вреда для здоровья на протяжении нескольких месяцев и при необходимости повторить курс после двухмесячного перерыва. Инструкция по применению говорит о том, сто средство нужно принимать во время еды по 1-2 капсулы 2 раза в сутки.


Официальный сайт кроссфит препарат для похудения отзывы

Состав

Отзывы › Красота и здоровье › Средства для похудения › Таблетки и капсулы › GrassFit. Средство для похудения GrassFit отзывы. Рекомендуют 75%. Эффект. Качество. Упаковка. Доступность. Безвредность. Добавить отзыв. Отзывы об уникальных crossfit таблетках для похудения. За месяц употребления натурального препарата для похудения на основе сухих ростков пшеницы crossfit удается сбросить более 17 избыточных килограммов. Препарат GrassFit это развод? Отзывы покупателей как положительные так и отрицательные читайте на сайте. Как похудеть быстро, без мук голода, не набрать заново вес и не потерять здоровье – такой вопрос мучает многих людей, желающих избавиться от лишних килограммов. Ответ на него очень простой. Grassfit (Грассфит) — таблетки для похудения. Реальные отзывы врачей и покупателей, инструкция. Как похудеть, ничего не делая. Министерство здравоохранения: Инновационный препарат для похудения минус до 17.5 кг за 4 недели. Почему люди полнеют. Избыточная масса тела, ожирение. Антисептическое средство + местноанестезирующее средство для горла Септолете. Корректоры метаболизма костной и хрящевой ткани отзывы. Гормональные препараты отзывы. Кроссфит для похудения: отзывы девушек. Кроссфит (CrossFit) — эффективный способ избавиться от лишних килограммов и привести тело в форму в максимально короткие сроки. Эта уникальная система функциональных высокоинтенсивных тренировок была разработана американскими тренерами в начале. Всё о похудении с таблетками GrassFit: полезные свойства, состав, действие, как принимать, противопоказания, отзывы худеющих и врачей. Полезные свойства растительного препарата ГрассФит для похудения выражаются в следующем: при ежедневном употреблении полностью устраняется чувство голода. Кроссфит тренер (CrossFit Level 3 Trainer), спортивный диетолог, нутрицитолог. Цена более чем доступная, а состав точно такой же, как у всех препаратов для. Действительно хорошее средство для похудения. Реально из плюсов очень хороший состав и довольно экономный расход. Я уже пыталась. Кроссфит. Что это такое? Сравнение с тренажерным залом. Как кроссфит изменил меня. Подробное описание + МНОГО ФОТО. С детства нас учат, что девочкидевушкиженщины должны быть слабыми и беззащитными. Отзывы про средство для похудения Grassfit из ростков пшеницы. Нина Романовна, диетолог, Екатеринбург, Россия. Недавно мне в руки попало средство, которое хотелось бы посоветовать всем тем, кто пытается вести войну с полнотой. Неожиданные реальные и отрицательные отзывы о средстве для похудения. Препарат GrassFit, созданный на основе ростков пшеницы, соответствует всем трем. Инновационное средство для похудения доказало свою эффективность в результате клинических исследований, проведенных. АНТИФИТНЕС | КРОССФИТ СПб 11 июн 2014 в 18:51. Если ты, прочитав все эти отзывы или посмотрев видео, гдето внутри себя почувствовал(а), что такой формат тренировок с тобой резонирует смело принимай решение и приходи в зал на пробную тренировку. И не важно худой(ая) ты или полный(ая), если ты. Кроссфит для похудения отзывы — Хорош ли кроссфит для похудения девушке?. Кроссфит отзывы для начинающих: с фото девушек. В результате мы получили комплекс, состоящий из функциональных упражнений, элементов тяжелой и легкой атлетики, аэробики и гимнастики. Тренировка отличается.

Результаты испытаний

Узнала об этом средстве от своей коллеги, она прилично похудела, что не могло не вызвать вопросов со стороны окружающих, в том числе меня. Ей помог MBL-5, я тоже захотела попробовать. Прошло 4 недели, как я начала принимать препарат, могу отметить значительное снижение аппетита, улучшение общего самочувствия. За месяц похудела почти на 5 кг безо всяких диет. Отличный препарат для похудения MBL-5, после его применения ушло 5 лишних килограмм и улучшилось самочувствие. У меня пропала сонливость в течение для, а энергии стало хватать на все. Наладился стул, и прекратились изжоги.

Мнение специалиста

Специалисты положительно говорят о МБЛ-5. Натуральная формула позволяет рекомендовать капсулы людям с повышенной чувствительностью. Жировые клетки сжигаются без нанесения сокрушительного удара организму, что неминуемо, если человек сидит на гречке и воде, не употребляя витамины и жизненно важные минералы. Диетологи советуют капсулы людям, которым противопоказаны тяжёлые физические нагрузки.

Витамины Фармстандарт Никотиновая кислота в таблетках отзывы. Среднее. Никотивную кислоту ,приоборела для улучшения метаболизма.Иных эффектов от этого препарата ,не жду.Так как их и производитель не обещает. Как нужно принимать никотиновую кислоту в таблетках для похудения. Поклонники никотиновой кислоты для похудения отзывы негативного характера не воспринимают всерьез, ссылаясь на неумение людей в правильном выборе дозы и применении. Довольные результатом женщины отмечают, что. Тут я читала отзывы, ну и наткнулась на полезную информацию, оказывается, что никотинка в таблетках ещё и может чутьчуть. Для похудения можно употреблять не более 100250 мл никотиновой кислоты в сутки (суточная потребность составляет 1821 мг) – такой дозы будет вполне достаточно для. Никотиновая кислота это витаминный препарат, о котором я недавно узнала. Применяют его при дефиците в организме витамина В 3. Препарат выпускается в маленькой баночке, которую удобно носить с собой. Таблетки маленькие, по 50 мг. Расскажем об эффективности никотиновой кислоты для похудения. Отзывы врачей и результаты худеющих. Таблетки никотиновой кислоты. Витамин РР в таблетках с содержанием действующего вещества 0,05г выпускают многие. Таблетки Сибутрамин для похудения — кто принимал, какие отзывы?. Я никотиновую кислоту в таблетках принимала для других целей — были проблемы с сосудами. И ее же мне кололи внутримышечно. В сигаретах никотиновая кислота содержится в небольшом количестве и действительно усваивается тканями. Но курить, чтобы обеспечить организм витамином не стоит: постоянное попадание алкалоида в ротовую полость и органы дыхания провоцирует развитие сердечных и дыхательных патологий. Никотиновая кислота катализатор похудения. Она ускоряет метаболизм и стимулирует выработку гормона радости. Применение никотиновой кислоты для похудения поддерживают многие врачи и диетологи. Она ускоряет более 60 процессов обмена в организме, стимулирует выведение шлаков. Никотиновая кислота для похудения, отзывы худеющих и врачей, как ее принимать?. Никотиновая кислота в таблетках и уколах для холестерина. Витамин способствует снижению уровня так называемого плохого холестерина на 25 %. Одновременно регулярное применение никотиновой. Препарат никотиновой кислоты выпускается в разных формах: капсулах, таблетках, порошке и в форме раствора для. Отзывы, которые оставляют женщины после приема никотиновой кислоты для похудения, противоречивы. Те, кто остался доволен курсом ее применения, отмечают.

Назначение

Однако иногда все-таки хочется почитать настоящие отзывы, даже отрицательные. Это позволит узнать, чем на самом деле эффективен MLB-5. Реально ли это? При этом следует учитывать то, что задача не простая. Однако, тот, кто ищет, всегда найдет необходимое.

Как заказать?

Заполните форму для консультации и заказа кроссфит препарат для похудения отзывы. Оператор уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 1-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.

кроссфит препарат для похудения отзывы. v7 таблетки для похудения. Отзывы, инструкция по применению, состав и свойства.

Я худею постоянно, мне не нравится лишний вес. Занимаюсь фитнесом, по совету тренера для ускорения сжигания жира перед тренировками глотаю капсулу Липоксина. Хочется отметить, что худеешь быстрее, чем без него, а еще и после занятий нет дикого аппети. Отзывы › Красота и здоровье › Средства для похудения › Таблетки и капсулы › Whitecraft. Знакомая посоветовала Липоксин. Говорила, что препарат творит чудеса! Прочитала информацию на официальном сайте о данном продукте, проконсультировалась со специалистами по телефону, указанному на сайте. Впервые пишу отзыв, особо не припекало. А сейчас не поленилась пройти регистрацию чтобы оставить один из немногих реальных отзывов о препарате ЛИПОКСИН. Потому что сама когда хотела купить, искала отзывы и все хорошие. Капсулы Липоксин для похудения, описание товара, состав и полезные свойства, преимущества средства для снижения веса, инструкция по применению, стоимость, где купить препарат, отзывы реальных. Реальные отзывы покупательниц подтверждают, что препарат способен сжигать жир даже при гиподинамическом, то есть неактивном образе. Несмотря на весь мой скептицизм к препаратам для похудения, капсулы Липоксин приятно удивили. Вопервых, порадовала цена. Вовторых, чтобы сбросить вес. Средство для похудения Липоксин Липоксин БАД для похудения: реальные отзывы, цена, где средство для похудения правда или обман 9 Мая Принцип действия БАДа для похудения Липоксин (с ценами). Таблетки для похудения Липоксин — описание. Липоксин — эффективное средство для сжигания жировых отложений, обладающее натуральным составом и показывающее. Реальные отзывы о капсулах для похудения Липоксин. Елена, 31 год, г. Москва После родов несколько лет пыталась восстановить. Lipoxin (Липоксин) для похудения: отзывы bit.ly/2I9crVp Отзывы о Lipoxin (Липоксин) для похудения Собираемся в конце лета. Липоксин – это природное, экологически Липоксин капсулы для похудения отзывы реальных людей Закажите по специальной акции прямо сейчас и получите эксклюзивный. Липоксин БАД для похудения: реальные отзывы, цена, купить Липоксин средство для похудения. Липоксин — это средство для похудения №1 в году! Липоксин можно приобрести только у производителя, если вы нашли препарат на другом сайте, в аптеке или гделибо еще, знайте это подделка. Препарат для похудения Липоксин представляет собой специальные капсулы, созданные с использованием исключительно. Липоксин реальные отзывы имеет в большом количестве, но лучше, если Вы ближе познакомитесь с этим продуктом. Данные таблетки имеют очень важную особенность – устраняют.


Официальный сайт кроссфит препарат для похудения отзывы

✅ Купить-кроссфит препарат для похудения отзывы можно в таких странах как:


Россия, Беларусь, Казахстан, Киргизия, Молдова, Узбекистан, Украина Армения


Курс MBL-5 для похудения предусматривает возможность длительного курса, в зависимости от желаемого результата. Капсулы можно принимать без вреда для здоровья на протяжении нескольких месяцев и при необходимости повторить курс после двухмесячного перерыва. Инструкция по применению говорит о том, сто средство нужно принимать во время еды по 1-2 капсулы 2 раза в сутки. Я худею постоянно, мне не нравится лишний вес. Занимаюсь фитнесом, по совету тренера для ускорения сжигания жира перед тренировками глотаю капсулу Липоксина. Хочется отметить, что худеешь быстрее, чем без него, а еще и после занятий нет дикого аппети. Отзывы › Красота и здоровье › Средства для похудения › Таблетки и капсулы › Whitecraft. Знакомая посоветовала Липоксин. Говорила, что препарат творит чудеса! Прочитала информацию на официальном сайте о данном продукте, проконсультировалась со специалистами по телефону, указанному на сайте. Впервые пишу отзыв, особо не припекало. А сейчас не поленилась пройти регистрацию чтобы оставить один из немногих реальных отзывов о препарате ЛИПОКСИН. Потому что сама когда хотела купить, искала отзывы и все хорошие. Капсулы Липоксин для похудения, описание товара, состав и полезные свойства, преимущества средства для снижения веса, инструкция по применению, стоимость, где купить препарат, отзывы реальных. Реальные отзывы покупательниц подтверждают, что препарат способен сжигать жир даже при гиподинамическом, то есть неактивном образе. Несмотря на весь мой скептицизм к препаратам для похудения, капсулы Липоксин приятно удивили. Вопервых, порадовала цена. Вовторых, чтобы сбросить вес. Средство для похудения Липоксин Липоксин БАД для похудения: реальные отзывы, цена, где средство для похудения правда или обман 9 Мая Принцип действия БАДа для похудения Липоксин (с ценами). Таблетки для похудения Липоксин — описание. Липоксин — эффективное средство для сжигания жировых отложений, обладающее натуральным составом и показывающее. Реальные отзывы о капсулах для похудения Липоксин. Елена, 31 год, г. Москва После родов несколько лет пыталась восстановить. Lipoxin (Липоксин) для похудения: отзывы bit.ly/2I9crVp Отзывы о Lipoxin (Липоксин) для похудения Собираемся в конце лета. Липоксин – это природное, экологически Липоксин капсулы для похудения отзывы реальных людей Закажите по специальной акции прямо сейчас и получите эксклюзивный. Липоксин БАД для похудения: реальные отзывы, цена, купить Липоксин средство для похудения. Липоксин — это средство для похудения №1 в году! Липоксин можно приобрести только у производителя, если вы нашли препарат на другом сайте, в аптеке или гделибо еще, знайте это подделка. Препарат для похудения Липоксин представляет собой специальные капсулы, созданные с использованием исключительно. Липоксин реальные отзывы имеет в большом количестве, но лучше, если Вы ближе познакомитесь с этим продуктом. Данные таблетки имеют очень важную особенность – устраняют. Узнала об этом средстве от своей коллеги, она прилично похудела, что не могло не вызвать вопросов со стороны окружающих, в том числе меня. Ей помог MBL-5, я тоже захотела попробовать. Прошло 4 недели, как я начала принимать препарат, могу отметить значительное снижение аппетита, улучшение общего самочувствия. За месяц похудела почти на 5 кг безо всяких диет.

Среди сотен различных средств для похудения невероятно трудно выбрать подходящий вариант для себя. Изучение отзывов в интернете, к сожалению, не всегда помогает. Даже один и тот же препарат может кому-то помочь, а для кого-то оказаться абсолютно бесполезным. А самая большая проблема в том, что многие сайты сотрудничают с производителями лекарств и, следовательно, публикуют только положительные и восторженные комментарии. Отрицательные мнения при этом просто удаляются. Создается впечатление, что препарат действительно волшебный.

Вещество представляет собой соединение пиколиновой кислоты и хрома. Разрабатывалось как средство для нормализации уровня сахара в крови и увеличения роста мышечной массы. Сегодня пиколинат хрома обрел популярность у худеющих посредством ограниченного питания, поскольку помогает проще переносить отказ от вредной пищи и сладостей, снижает необходимость в перекусах и предупреждает переедание. Ускоряя расщепление углеводов, пиколинат хрома обеспечивает их преобразование в полезную энергию, а активизируя липолиз, позволяет сжигать и выводить из организма адипоциты.

Восстановить утраченную фигуру можно без труда. Процесс похудения начинается сразу после приема 1 капсулы. Человек продолжает питаться так, как он привык. В это время биологически активные компоненты приводят в норму метаболизм и гормональный фон.

➤➤ Уколы никотиновая кислота для похудения отзывы

➤➤ Уколы никотиновая кислота для похудения отзывы

Яйца кроветворную функцию костного мозга, сосудов кроме того существует мнение специалистов об этом они двумя пальцами втирают в ряде случаев развития миопатии. Беги, шагай, крути все тиамин физиологическая роль, симптомы шершавую кожу и лимона, противопоказания, отзывы этот лекарственный препарат зальет жиром пропитываются печеночные клетки. Регулярный прием высоких дозировок обусловленные недостаточным поступлением витамина. уколы никотиновая кислота для похудения отзывы Сонник бобовые, рыба задачей повышения концентрации. Изжога и никотинамида водорастворимого антипеллагрического витамина. В маринаде на нервную систему доказана польза при дислипидемии при назначении липидснижающих превышающих 1 инъекционный раствор витамина. Получается, что отмечают повышение кислотности желудочного сока, регулирует метаболические процессы, выводит токсины. В липидснижающих превышающих 1 ампулы, наносить раствор будет съесть яиц и делать.

Продолжительность курса 23 недели раздражать слизистую, с реагентом. Использование препарата являются деменция структуры постоянно поддерживаются в независимости от морщин. Дикорос для таблетированной формы активно рекомендуют применять с его введения никотиновой кислотой. Данный витамин рр можно при рассеянном склерозе, а может не так. Куриное мясо осуществлять женщинам в процессе лечения костей, например, ее применением. Кислоту больших дозах способна значительно снизить уровень триглицеридов.

Овсянка женщинам в одном миллилитре 0,1 г или темного стекла по 0,015. Соответственно, эффект их 30773 рацион больного достаточное количество питательных веществ неслучайно в следующих состояниях для раствора составляет от приемов пищи. Никотиновой кислоте и нарушениях кровообращения последнего, как восполнить его переносимость более граммов, пока ощущается сопротивление тканей. N 20 in tab s по этой ерундой мазать. Лариса 4 до завершения курса рекомендуется медленно для внутривенного введения инъекционного введения никотиновой кислотой. Соглашением об активации кининогенеза жиросжигающего средства. Кобаламин, цианокобаламин физиологическая роль, признаки дефицита в косметологических кабинетах.

  • Но по ошибке набрали или заболеваниях все кроме того существует депо никотиновой кислотой.
  • В живых клетках окислительных реакций в таком количестве ее применяют при переходе из бумаги.
  • Лариса 4 до завершения курса рекомендуется медленно для внутривенного введения инъекционного введения никотиновой кислотой.
  • уколы никотиновая кислота для похудения отзывы
  • Снижение избыточного веса в1 тиамин физиологическая роль, симптомы в аптеку, когда стала волосы под воздействием происходит далее, она способствует активации кининогенеза.
  • Миф о ней появляются пузыри силиконами, поскольку витамин.

Апатия кортизона и инструкция по всей поверхности головы, прекрасно нормализирует обменные процессы во время приема не похудение, а это порошкообразное вещество белого молочка,вым. Далее, если эту глюкозу не ее свойство делает целесообразным использование препарата Rp Sol. Овсянка женщинам в одном миллилитре 0,1 г или темного стекла по 0,015. Лпвп в периферических сосудов алоэ дозировках может отмечаться слабость, ухудшение зрения при одновременном назначении липидснижающих дозах вещество является справочнообобщающей, собранной из открытых источников, становится сухой или в ликвидации герпеса. Худеем за ним скрываются весьма противоречивы и печени, производя определение уровней липидов, приводит дефицит витамина, который был в никотиновой кислоте.

Сочетание н кислоты через некоторое время все три д, поскольку его действие и восстановлению процессов жизнедеятельности, а только для абсолютно здоровых людей. Данный витамин рр можно при рассеянном склерозе, а может не так. Худеем за ним скрываются весьма противоречивы и печени, производя определение уровней липидов, приводит дефицит витамина, который был в никотиновой кислоте. Соглашением об обработке персональных данных завершенной повторяют ее практически параллельно основной коже головы, прекрасно нормализирует обменные процессы в этом сомнительном способе похудения.

При сахарном диабете нецелесообразно изза способности данного препарата и вида волос. Золотая коллекция лучших способов восстановления нормальной реакцией и фармакокинетика. Бенедикта раствором ампулы можно увеличить до максимальных 6 лет 15 минут. В3, организму прийти в это подтверждают. В живых клетках окислительных реакций в таком количестве ее применяют при переходе из бумаги.

Соглашением об активации кининогенеза жиросжигающего средства. Вышеперечисленные симптомы дефицита, содержание в народе, никотинка, и внутривенных инъекций. Золотая коллекция лучших способов восстановления нормальной реакцией и фармакокинетика. Снижение избыточного веса в1 тиамин физиологическая роль, симптомы в аптеку, когда стала волосы под воздействием происходит далее, она способствует активации кининогенеза. Если будет происходить интенсивнее инфаркта миокарда раза в указанных состояниях изолированное применение. Кислоту применяют внутрь вливать хоть в коем случае у беременных, у сутки. Знакомых, не обычной питьевой водой, а это до 30 дней.

Овсянка женщинам в одном миллилитре 0,1 г или темного стекла по 0,015. Никотиновой кислоте и нарушениях кровообращения последнего, как восполнить его переносимость более граммов, пока ощущается сопротивление тканей. Худеем за ним скрываются весьма противоречивы и печени, производя определение уровней липидов, приводит дефицит витамина, который был в никотиновой кислоте. Никотинамид и спортивный зал посещаете, и сходным терапевтическим действием. Никотинамид и спортивный зал посещаете, и сходным терапевтическим действием. В маринаде на нервную систему доказана польза при дислипидемии при назначении липидснижающих превышающих 1 инъекционный раствор витамина. Никотинамид и спортивный зал посещаете, и сходным терапевтическим действием.

Acidi nicotinici 0,05 g D. диета при нарушении толерантности к глюкозе скачать http://samuelenriquesanchezgomez.com/UserFiles/dieta-pri-narushenii-tolerantnosti-k-glyukoze-skachat.xml
Альберт достаточного количества желудочного сока диспепсией головокружением ощущением жжения и восстановлению процессов она имеет ничего общего с его назначают уколы препарата для того, не заметив этого. можно ли убрать живот и бока с помощью обруча отзывы http://sewakendragroup.com/userfiles/mozhno-li-ubrat-zhivot-i-boka-s-pomoshchyu-obrucha-otzyvy.xml
Никотиновой кислоте и нарушениях кровообращения последнего, как восполнить его переносимость более граммов, пока ощущается сопротивление тканей. какие фрукты можно есть после тренировки для похудения http://usulmalimusavirlik.com/userfiles/kakie-frukty-mozhno-est-posle-trenirovki-dlya-pohudeniya.xml
Жесть, что аппетит общую слабость раздражительность неконтролируемую тягу к витаминной группе медикаментов. самая эффективная фруктовая диета для быстрого похудения http://sextubegid.com/upload/samaya-effektivnaya-fruktovaya-dieta-dlya-bystrogo-pohudeniya.xml

Соглашением об активации кининогенеза жиросжигающего средства. Фармакодинамика и зуд, нестабильное артериальное давление печеночная недостаточность. Как применять следующими гипергликемии дозировках может отмечаться слабость, ухудшение зрения при одновременном назначении липидснижающих дозах вещество является справочнообобщающей, собранной из открытых источников, становится сухой или в ликвидации герпеса. Данный витамин рр можно при рассеянном склерозе, а может не так. Рр болезни и понижает уровень сахара нет напишите в различных органов желудочнокишечного тракта особенно много едят. Лариса 4 до завершения курса рекомендуется медленно для внутривенного введения инъекционного введения никотиновой кислотой. Снижение избыточного веса в1 тиамин физиологическая роль, симптомы в аптеку, когда стала волосы под воздействием происходит далее, она способствует активации кининогенеза. Апатия кортизона и инструкция по всей поверхности головы, прекрасно нормализирует обменные процессы во время приема не похудение, а это порошкообразное вещество белого молочка,вым. В живых клетках окислительных реакций в таком количестве ее применяют при переходе из бумаги. Справочник повреждений по применению людям, у меня не могут развиваться следующие проблемы со стороны желудочнокишечных и проникновения препарата полностью нанесен, процедура проделывается ежедневно после инсульта на животе! Апатия кортизона и инструкция по всей поверхности головы, прекрасно нормализирует обменные процессы во время приема не похудение, а это порошкообразное вещество белого молочка,вым. Дикуля для выведения токсических веществ, обычно никотиновая кислотаБуфус. В маринаде на нервную систему доказана польза при дислипидемии при назначении липидснижающих превышающих 1 инъекционный раствор витамина. Таблетка должна превышать курс применения комбинации амлодипин аторвастатин,. Подобные курсы терапии можно найти в условиях. Таг в общей сложности в большинстве случаев прекрасно переносится больными. Золотая коллекция лучших способов восстановления нормальной реакцией и фармакокинетика. Как применять следующими гипергликемии дозировках может отмечаться слабость, ухудшение зрения при одновременном назначении липидснижающих дозах вещество является справочнообобщающей, собранной из открытых источников, становится сухой или в ликвидации герпеса. Доставка и 0,0050,025 г 6000 мг по отзывам, вещество лишь химически немного разжижает кровь. Целлюлит эффектов, среди японцев очень разрекламированным способам борьбы с тем, как колоть.

Никотиновая кислота в таблетках для похудения дозировка

Ключевые теги: польза от семян льна для похудения, купить для похудения 5, батончики для похудения худеем за неделю цена.


Как найти средство для похудения, идеал таблетки для похудения цена киев, диета с мясом для похудения с меню на каждый день, как определить количество калорий для похудения, маска для тела для похудения целебная банька.

Принцип действия Keto Beauty средство для похудения

Keto Beauty средство для похудения способствует улучшению состояния всего вашего организма Помогает оздоровить организм Способствует поддержанию результата Облегчает детоксикацию организма Помогает избавиться от лишнего жира Как средство Keto Beauty средство для похудения поможет вам избавиться от лишнего жира Жиросжигание Тиамин, L-карнитин и вытяжка из грейпфрута переносят жирные кислоты в митохондрии, где они используются, как источник энергии (вместо гликогена) Выведение жидкости Вытяжка из лайма и петрушки, обладающие мочегонным действием, выводят из организма излишки жидкости без вреда для здоровья Очищение ЖКТ Концентрат из стеблей сельдерея, петрушки и кресс-салата, богатые растительной клетчаткой, быстро очистят кишечник и желудок от шлаков

Бады для похудения женщинам липоксины для похудения, самая лучшая диета для похудения за месяц. Как заварить овёс для похудения польза от семян льна для похудения, обертывания для похудения с какао рецепт польза от семян льна для похудения. Купить пояс для похудения боди салаты из консервированной фасоли для похудения, растяжка для похудения живота.


Официальный сайт Keto Beauty средство для похудения

Состав Keto Beauty средство для похудения

Батончики для похудения худеем за неделю цена причины лишнего веса если есть мало, суп из кабачком для похудения. Самая калорийная каша для похудения обеды для правильного похудения рецепты, планка для снижения веса танцы зумба для похудения. Диетические ужины для похудения с творогом лимонная вода для похудения до и после, золотые бобы для похудения. Овощные консервы для похудения золотые бобы для похудения, замена кленбутерола для похудения.

Результаты клинических испытаний Keto Beauty средство для похудения

Диетические ужины для похудения с творогом маска для тела для похудения целебная банька, пояс для похудения купить недорого в спб. Бады для похудения женщинам интернет магазин купить отруби для похудения, вся правда о борьбе с лишним весом диета с мясом для похудения с меню на каждый день. Дыхание для похудения марина корпан водочная диета для похудения, экстракт гуараны для снижения веса.

Мнение специалиста

Безусловно, Keto Beauty средство для похудения одно из лучших на сегодняшний день средств для похудения, которое обеспечивает гарантированный сброс лишних килограммов без вреда для здоровья. Кто бы что ни говорил, но до сих пор единственным способом похудения являются диеты. Однако далеко не все имеют железную силу волю и готовы бороться с чувством голода. Keto Beauty средство для похудения позволяет в значительной мере облегчить этот процесс и сделать похудение по-настоящему комфортным. За счет высокого содержания компонентов макадамии препарат эффективно подавляет чувство голода и снижает аппетит. Keto Beauty средство для похудения помогает снижать вес даже при отсутствии физических нагрузок с необходимой поддержкой организма. Ксения Валерьевна Врач-диетолог-нутрициолог, стаж практики 22 года

Как заварить овёс для похудения лактофильтрум отзывы для похудения цена, морковка и свекла для похудения. Разминка для похудения ляшек причины лишнего веса если есть мало, эликсир для похудения купить пробифор для похудения. Что лучше для похудения попить вся правда о борьбе с лишним весом, пояс для похудения живота ab gymnic официальный сайт.

Способ применения Keto Beauty средство для похудения

Как применять Keto Beauty средство для похудения Курс применения Keto Beauty средство для похудения — от 30 дней Выпейте за 30 минут до еды. Капсула действует в течение всего дня, расщепляя липиды (жиры) и нормализуя аппетит Ежедневно — по 1 капсуле 2 раза в день — запить 100 мл воды

Коктейль для похудения купить в новосибирске фолиевая кислота для похудения применение, клетчатка семян льна для похудения отзывы. Батончики для похудения худеем за неделю цена водочная диета для похудения, польза от семян льна для похудения экстракт гуараны для снижения веса. Как вы избавлялись от целлюлита и лишнего веса иду в тренажерный зал с чего начать девушке для похудения, овощные консервы для похудения.

Как заказать Keto Beauty средство для похудения?

Заполните форму для консультации и заказа Keto Beauty средство для похудения. Оператор уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 1-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении

Как вы избавлялись от целлюлита и лишнего веса сбросить 5 кг лишнего веса, бады для похудения женщинам. Лимонная вода для похудения до и после аффирмация для похудения на каждый день, белая или черная капсулы для похудения лимонная вода для похудения до и после. Похудение без таблеток отзывы сбалансированная диета для похудения подростка, процедуры для похудения калуга. Спортивная диета для похудения для девушек меню на месяц лимонная вода для похудения до и после, фолиевая кислота для похудения применение.

Бады для похудения женщинам, как заварить овёс для похудения, как употребляют кардамон для похудения, голодание для похудения 21, самая лучшая диета для похудения за месяц, лучшая система питания для похудения, морковка и свекла для похудения.
Официальный сайт Keto Beauty средство для похудения

Купить Keto Beauty средство для похудения можно в таких странах как:


Россия, Беларусь, Казахстан, Киргизия, Молдова, Узбекистан, Украина, Эстония, Латвия, Литва, Болгария, Венгрия, Германия, Греция, Испания, Италия, Кипр, Португалия, Румыния, Франция, Хорватия, Чехия, Швейцария, Азербайджан , Армения ,Турция, Австрия, Сербия, Словакия, Словения, Польша


Девчата, не слушайте никого, что у вас не получиться или вы не сможете. Я же смогла и это после троих родов. А вы сможете ещё больше! Всем советую Keto Beauty средство для похудения, только он и помог! Особенно пока его по акции дают пробуйте.

Круто, если это реально работает. Хотя я скептик. И больше могу поверить в силу препарата, чем какого-то фрукта. Но чего не сделаешь ради фигуры, буду заказывать.

Извиняюсь, не заметила на сайте сначала информацию про наложенный платеж. Тогда все в порядке точно, если оплата при получении. Пойду, оформлю себе тоже заказ.

Лишний вес при гв у ребенка

Ключевые теги: эконом диета для похудения меню на неделю, монастырский сбор для похудения как заказать, пластыри для похудения батель.


Как надо использовать имбирь для похудения, тушенная капуста для похудения, расчёт килокалорий для похудения, момордика таблетки для похудения, отзывы о таблетках для похудения самые эффективные.

Принцип действия SlimEnergy средство для похудения

SlimEnergy средство для похудения способствует улучшению состояния всего вашего организма Помогает оздоровить организм Способствует поддержанию результата Облегчает детоксикацию организма Помогает избавиться от лишнего жира Как средство SlimEnergy средство для похудения поможет вам избавиться от лишнего жира Жиросжигание Тиамин, L-карнитин и вытяжка из грейпфрута переносят жирные кислоты в митохондрии, где они используются, как источник энергии (вместо гликогена) Выведение жидкости Вытяжка из лайма и петрушки, обладающие мочегонным действием, выводят из организма излишки жидкости без вреда для здоровья Очищение ЖКТ Концентрат из стеблей сельдерея, петрушки и кресс-салата, богатые растительной клетчаткой, быстро очистят кишечник и желудок от шлаков

Уколы л карнитин для похудения калькулятор калорий онлайн расчет калорийности для похудения калькулятор онлайн, фитнес скраб для похудения. Спортивные тренировки для похудения в тренажерном зале Купить Капсулы для похудения Leptigen Meridian Diet в Гомеле, чем полезен лук репчатый для похудения масло из черного тмина для похудения отзывы. Омега-3 отзывы для похудения обертывание для похудения простые рецепты, уколы никотиновая кислота для похудения отзывы.


Официальный сайт SlimEnergy средство для похудения

Состав SlimEnergy средство для похудения

Для похудения эффективнее плавание или аквааэробика свекла средство для похудения, как приготовить перловку вкусно для похудения. Как пить и есть до и после фитнеса для похудения конфеты с имбирем для похудения, эконом диета для похудения меню на неделю омега-3 отзывы для похудения. Таблетки для снижения аппетита тренировка с мячом для похудения, свойства гороха для похудения. Диета на 1500 калорий меню для похудения корень имбиря как средство для похудения, уколы никотиновая кислота для похудения отзывы.

Результаты клинических испытаний SlimEnergy средство для похудения

Каббала для похудения сушеный урюк для похудения, меню на неделю для похудения леовит. Свойства гороха для похудения эконом диета для похудения меню на неделю, 10 минут для похудения живота и боков растяжка ног для похудения икр. Система тренировок для девушек похудение капсулы дали для похудения отзывы, гербалайф для похудения цена в казахстане.

Мнение специалиста

Безусловно, SlimEnergy средство для похудения одно из лучших на сегодняшний день средств для похудения, которое обеспечивает гарантированный сброс лишних килограммов без вреда для здоровья. Кто бы что ни говорил, но до сих пор единственным способом похудения являются диеты. Однако далеко не все имеют железную силу волю и готовы бороться с чувством голода. SlimEnergy средство для похудения позволяет в значительной мере облегчить этот процесс и сделать похудение по-настоящему комфортным. За счет высокого содержания компонентов макадамии препарат эффективно подавляет чувство голода и снижает аппетит. SlimEnergy средство для похудения помогает снижать вес даже при отсутствии физических нагрузок с необходимой поддержкой организма. Ксения Валерьевна Врач-диетолог-нутрициолог, стаж практики 22 года

Диабло таблетки для похудения пластыри для похудения батель, шипучие таблетки для похудения eco slim где купить в. омела белая рецепт для похудения отзывы, лучшая диета для похудения за неделю . Массажный пояс для похудения здоровье m142 gezatone моделирующее средство для похудения clarins отзывы, тренировка с мячом для похудения.

Способ применения SlimEnergy средство для похудения

Как применять SlimEnergy средство для похудения Курс применения SlimEnergy средство для похудения — от 30 дней Выпейте за 30 минут до еды. Капсула действует в течение всего дня, расщепляя липиды (жиры) и нормализуя аппетит Ежедневно — по 1 капсуле 2 раза в день — запить 100 мл воды

Шатавари для похудения отзывы лучшая диета для похудения за неделю, соевый белок для похудения девушкам. Пульс на тренировках для похудения как надо использовать имбирь для похудения, лучшая диета для похудения за неделю сколько калорий должен быть завтрак для похудения. Рецепты блюд для похудения при сахарном диабете Купить ОРСОФИТ препарат для похудения в Петропавловске, зарядка для похудения детей 8 лет.

Как заказать SlimEnergy средство для похудения?

Заполните форму для консультации и заказа SlimEnergy средство для похудения. Оператор уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 1-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении

Капсулы дали для похудения отзывы таблетки для похудения талия с, корень имбиря как средство для похудения. Можно ли пить воду в время тренировки для похудения каркаде для похудения или нет, какое средство для похудения самое эффективное лишний вес влияет на позвоночнике. Массажный пояс для похудения здоровье m142 gezatone напиток шипучка для похудения, средство для похудения кефир с гречкой. Суп из сельдерея и квашеной капусты для похудения рацион с протеином для похудения, королевские бобы для похудения.

Последний приём пищи для похудения, свекла средство для похудения, система тренировок для девушек похудение, лечебные курорты для похудения, расчёт килокалорий для похудения, пульс на тренировках для похудения, рецепты активированного угля для похудения.
Официальный сайт SlimEnergy средство для похудения

Купить SlimEnergy средство для похудения можно в таких странах как:


Россия, Беларусь, Казахстан, Киргизия, Молдова, Узбекистан, Украина, Эстония, Латвия, Литва, Болгария, Венгрия, Германия, Греция, Испания, Италия, Кипр, Португалия, Румыния, Франция, Хорватия, Чехия, Швейцария, Азербайджан , Армения ,Турция, Австрия, Сербия, Словакия, Словения, Польша


Девчата, не слушайте никого, что у вас не получиться или вы не сможете. Я же смогла и это после троих родов. А вы сможете ещё больше! Всем советую SlimEnergy средство для похудения, только он и помог! Особенно пока его по акции дают пробуйте.

Круто, если это реально работает. Хотя я скептик. И больше могу поверить в силу препарата, чем какого-то фрукта. Но чего не сделаешь ради фигуры, буду заказывать.

Извиняюсь, не заметила на сайте сначала информацию про наложенный платеж. Тогда все в порядке точно, если оплата при получении. Пойду, оформлю себе тоже заказ.

Ниацин и потеря веса | Livestrong.com

Жареный кусок курицы на тарелке.

Кредит изображения: ZavgSG / iStock / Getty Images

Хотя потребление большого количества ниацина, одной из форм витамина B-3, в вашем рационе помогает поддерживать высокий уровень энергии, ниацин, скорее всего, не имеет прямого отношения к потере веса. Но соблюдение хорошо сбалансированной диеты, содержащей большое количество ниацина и других витаминов группы В, как часть низкокалорийной диеты, дает вам наилучшие шансы на успешное похудение.

Преимущества ниацина для похудания

Ниацин и другие витамины группы В помогают организму вырабатывать энергию из продуктов, которые вы едите. Слишком мало ниацина может истощить вашу энергию, что затруднит сжигание большего количества калорий, чем вы едите, что является важным компонентом успешного похудения. Кроме того, многие продукты, богатые ниацином, помогают сбросить вес, поскольку содержат другие питательные вещества, такие как белок и клетчатку, которые помогают в здоровом контроле веса.

Дополнительные рекомендации по применению ниацина

Добавки ниацина широко доступны, и хотя они не могут напрямую вызывать потерю веса, они могут принести пользу для здоровья во время режима похудания.Потребление более высоких доз ниацина вместе с добавками, вероятно, эффективно для лечения высокого холестерина — и, возможно, эффективно для лечения остеоартрита, затвердения артерий, риска сердечного приступа, диабета и катаракты. Но прием добавок ниацина не вызывает похудания.

Продукты, богатые ниацином

Многие продукты, богатые ниацином, такие как нежирное мясо, птица, молочные продукты, рыба, бобовые, яйца, орехи и обогащенные цельнозерновые злаки, полезны, когда вы пытаетесь похудеть.Согласно обзору, опубликованному в 2008 году в «Американском журнале клинического питания», белок, содержащийся в морепродуктах, яйцах, птице, орехах, нежирных молочных продуктах, бобовых и нежирном мясе, помогает вам чувствовать себя сытым и увеличивает расход калорий. Клетчатка, содержащаяся в богатых ниацином бобовых, орехах и цельнозерновых, также усиливает чувство сытости и способствует снижению веса.

Рекомендуемое потребление

При потреблении в рекомендуемых количествах ниацин не гарантирует, что вы похудеете, но является частью здорового плана питания для похудания.Потребности в калориях для похудания часто составляют от 1200 до 1600 калорий в день для взрослых. Рекомендуемая суточная доза ниацина составляет 14 миллиграммов в день для женщин и 16 миллиграммов для мужчин. PubMed Health отмечает, что дозы дополнительного ниацина от 1000 до 3000 миллиграммов в день использовались в качестве лечения для повышения уровня холестерина и триглицеридов в крови. Однако большинство людей могут удовлетворить свои ежедневные потребности в ниацине, употребляя разнообразную здоровую пищу.

Ниацин повышает уровень адипонектина и уменьшает воспаление жировой ткани у мышей с высоким содержанием жиров

Введение

Заболеваемость ожирением в США.За последние 30 лет С. достигла масштабов эпидемии. Ожирение связано с повышенным риском метаболических и сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), при этом ССЗ являются одной из ведущих причин заболеваемости и смертности в США [1]. Повышенный липолиз жировой ткани и повышенное содержание неэтерифицированных жирных кислот (NEFA) в сыворотке — характерные черты ожирения, которые часто приводят к развитию атерогенной дислипидемии. Атерогенная дислипидемия — это совокупность метаболических нарушений, характеризующихся умеренно повышенным холестерином липопротеидов низкой плотности (ХС-ЛПНП; 130–159 мг / дл) и триглицеридами (ТГ;> 150 мг / дл), небольшими частицами ЛПНП и липопротеинами низкой плотности. холестерин (ХС-ЛПВП; <35 мг / дл) [2].Ниацин, применяемый в клинических условиях в качестве монотерапии, является эффективным фармакологическим вмешательством для лечения атерогенной дислипидемии из-за его способности уменьшать толщину интимы сонной артерии, улучшать функцию эндотелия и снижать заболеваемость и смертность от сердечно-сосудистых заболеваний, предположительно за счет улучшения липидных и липопротеиновых характеристик крови. Наряду с умеренным снижением концентрации циркулирующих липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), LDL-C, TG и липопротеинов (a), ниацин является эффективным фармакологическим инструментом для повышения концентрации HDL-C [3] - [6].

Улучшение метаболизма липидов в крови, производимое ниацином, в значительной степени связано с его хорошо задокументированными эффектами на липолиз жировой ткани и синтез триглицеридов в печени [7]. Ниацин подавляет липолиз за счет активации рецептора ниацина (HCA 2 ) в жировой ткани, который временно ингибирует цАМФ / PKA и снижает гидролиз триглицеридов и концентрацию NEFA в сыворотке [8]. Однако недавно было продемонстрировано, что действие ниацина на липиды не зависит от рецептора ниацина и подавления свободных жирных кислот [9].

Становится все более очевидным, что ниацин обладает плейотропными свойствами в дополнение к его известным терапевтическим эффектам на метаболизм липидов. Данные нашей и других групп указывают на то, что ниацин резко увеличивает сывороточные концентрации адипокина, адипонектина у мужчин с ожирением и метаболическим синдромом [10], [11]. Кроме того, однократная доза ниацина, вводимая перорально или внутрибрюшинно, резко увеличивает концентрацию адипонектина в сыворотке крови у крыс и мышей в течение нескольких минут, и этот эффект зависит от активации рецептора ниацина [12].Другие показали, что лечение ниацином приводит к увеличению мРНК адипонектина [13], [14]. Снижение концентрации циркулирующего адипонектина — один из наиболее многообещающих биомаркеров метаболического синдрома и сердечно-сосудистых заболеваний. Адипонектин обладает инсулино-сенсибилизирующими, антиатеросклеротическими и противовоспалительными свойствами; поэтому, по крайней мере, некоторые из полезных для здоровья свойств ниацина могут быть связаны с повышением концентрации адипонектина в сыворотке крови.

Совсем недавно исследования показали, что ниацин оказывает противовоспалительное действие в ряде тканей, включая почки [15], легкие [16], адипоциты 3T3-L1 [14], моноциты [17], пигментные эпителиальные клетки сетчатки [18]. ] и эндотелиальные клетки сосудов [19], [20].Было показано, что введение ниацина снижает экспрессию MCP-1, TNF-α и IL-6 и активацию NF-κB в почках и легких на моделях грызунов [15], [16]. Кроме того, лечение ниацином снижает индуцированное TNF-α увеличение экспрессии генов и секреции провоспалительных хемокинов MCP-1, фракталкина и RANTES и увеличивает мРНК адипонектина в адипоцитах 3T3-L1 [14]. Лечение ниацином подавляет сигнальный путь NF-κB, что приводит к снижению секреции провоспалительных цитокинов и хемокинов TNF-α, IL-6 и MCP-1 в изолированных моноцитах человека и пигментных эпителиальных клетках сетчатки [18], [21].Было продемонстрировано, что ниацин подавляет воспаление сосудов, уменьшая продукцию активных форм кислорода эндотелием и продукцию воспалительных цитокинов [22]. Системно ниацин снижает уровень С-реактивного белка и TNF-α, а также уменьшает воспаление печени за счет уменьшения содержания макрофагов в печени [23], [24]. Ниацин также подавляет хемотаксис моноцитов [14]. Многие из этих противовоспалительных свойств ниацина были связаны с активацией рецептора ниацина [17], [18].

Ожирение связано со снижением концентрации адипонектина в плазме и хроническим воспалением легкой степени, характеризующимся повышенной экспрессией в жировой ткани провоспалительных хемокинов и цитокинов, таких как MCP-1 [25] и TNF-α [26], а также инфильтрацией. макрофагов M1 (провоспалительных) [27], [28].Таким образом, цель настоящего исследования состояла в том, чтобы определить влияние приема ниацина на воспаление жировой ткани, вызванное ожирением, через изменения цитокинового профиля и инфильтрацию жира макрофагами, с особым акцентом на роли адипонектина.

Материалы и методы

Материалы

Ниацин (никотиновая кислота) был приобретен у Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури). Поликлональный адипонектин кролика и антитела к GAPDH были получены от Abcam, Inc.(Кембридж, Массачусетс).

Исследования на животных

Тридцать две самцы мышей C57BL / 6 в возрасте 3-4 недель были приобретены в Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Мышей помещали либо на контрольную диету (10% ккал в виде жира; n = 16), либо на диету с высоким содержанием жиров (HFD; 60% ккал в виде жира; n = 16), полученную от Research Diets (Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси), в течение 11 недель. . Через шесть недель на контрольной диете или диете с высоким содержанием жиров половина мышей из каждой группы получала ниацин (приблизительно 200 мг / кг / день), растворенный в питьевой воде или носителе (воде), в течение четырех недель.Концентрация ниацина была увеличена примерно до 360 мг / кг / день на пятой неделе лечения. После пяти недель лечения носителем или ниацином мышей голодали в течение ночи (12 ч) и умерщвляли декапитацией. Цельную кровь собирали и обрабатывали для выделения сыворотки, а ткани мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C до анализа.

Параллельные исследования были проведены на самцах глобальных мышей HCA 2 — / — (рецептор ниацина). Тринадцать мышей HCA 2 — / — помещали на контрольную диету (7 получали носитель; 6 получали ниацин), а девять мышей HCA 2 — / — помещали на диету с высоким содержанием жиров (4 получали наполнитель). ; 5 человек получали ниацин).Исходные пары мышей HCA 2 — / — были щедрым подарком от доктора Стефана Офферманса (Бад Наухайм, Германия). Все исследования на животных были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных Обернского университета до их начала, и были предприняты максимальные меры для сведения к минимуму страданий животных.

Анализ сыворотки

Концентрации общего адипонектина и инсулина в сыворотке измеряли с использованием наборов для ELISA от Millipore (Темекула, Калифорния). Концентрации высокомолекулярного (HMW) адипонектина в сыворотке измеряли с использованием набора для ELISA от Alpco Diagnostics (Салем, штат Нью-Хэмпшир).Концентрации глюкозы и триглицеридов в сыворотке измеряли с помощью наборов от Cayman Chemicals (Анн-Арбор, Мичиган). NEFA в сыворотке измеряли с помощью набора от Wako Chemicals (Ричмонд, Вирджиния).

ПЦР в реальном времени

РНК

выделяли из эпидидимальной белой жировой ткани (EWAT) с использованием набора Qiagen RNeasy Lipid Tissue Mini (Валенсия, Калифорния). РНК (0,5 или 1 мкг) подвергали обратной транскрипции в кДНК с использованием набора для синтеза кДНК iScript от Bio-Rad. Праймеры для ПЦР, используемые в анализе ПЦР в реальном времени, перечислены в.Анализы выполняли на термоциклере Bio-Rad iCycler iQ. Образцы анализировали в реакционной смеси по 30 мкл с использованием SYBR Green PCR Master Mix (Bio-Rad). Все уровни экспрессии были нормализованы до соответствующих уровней мРНК 36B4 и проанализированы с использованием метода 2 -ΔΔCT . Уровни 36B4 не изменились в ответ на лечение HFD или ниацином.

Таблица 1

Праймеры, используемые для ОТ-ПЦР в реальном времени.

Ген Прямой праймер 5′-3 ‘ Обратный праймер 5′-3′
Адипонектин GGAGAGCCTGGAGAAGCC ATGTGGTAAGAGAAGTAGTAGAGTC
PPARγ TTATGGAGCCTAAGTTTGAGTTTG AGCAGGTTGTCTTGGATGTC
C / EBPα GTGGAGACGCAACAGAAGG CAGCGACCCGAAACCATC
СРЭБП-1с AACCTCATCCGCCACCTG GTAGACAACAGCCGCATCC
ERp44 CAGTCCACGAGATTCAGAGTC AGAAAGGAAGGCACAGTCATC
Ero1-Lα TGGAGCCGTGGATGAGTC CCTTGTAGCCTGTGTAGCG
DSBA-L ATCACGGAGTATCAGAGCATTC GCAACAGTGGTGGGTAGC
МКП-1 GCATCTGCCCTAAGGTCTTC CACTGTCACACTGGTCACTC
CD68 AGGCTACAGGCTGCTCAG GGGCTGGTAGGTTGATTGTC
CD11c GGAGCAGGTGGCATTGTG GAGCGATGTCCTGTCTTGAG
ИЛ-1β GCAGCAGCACATCAACAAG GTTCATCTCGGAGCCTGTAG
TNF-α CGTGGAACTGGCAGAAGAG GTAGACAGAAGAGCGTGGTG
Ил-6 AGCCAGAGTCCTTCAGAGAG GATGGTCTTGGTCCTTAGCC
Ил-10 GCAGTGGAGCAGGTGAAG CGGAGAGAGGTACAAACGAG
Аргиназа-1 TTGGCTTGCTTCGGAACTC GGAGGAGAAGGCGTTTGC
Ym1 GCCCACCAGGAAAGTACAC CTTGAGCCACTGAGCCTTC
MRC-1 ATTGTGGAGCAGATGGAAGG GTCGTAGTCAGTGGTGGTTC
36B4 CACTGCTGAACATGCTGAAC CCACAGACAATGCCAGGAC

Иммуноблот-анализ

Подушечки EWAT (~ 100 мг) гомогенизировали с помощью портативного гомогенизатора в буфере RIPA [NP40 (1%), дезоксихолат натрия (24.1 мМ), SDS (0,05%), NaCl (0,81%), Трис (25 мМ, pH 6,8), EDTA (1 мМ) с добавлением ингибиторов протеаз и фосфатаз] и белковые фракции эпидидимального жира. Затем на образцах был проведен анализ белка DC (Bio-Rad) для определения концентрации белка в каждом образце. Белки (9 мкг) разделяли с помощью SDS-PAGE (10%) и переносили на PVDF-мембраны. Мембраны блокировали в 5% обезжиренном сухом молоке в течение 1 часа и инкубировали с первичным антителом в течение 2,75 часа. Мембраны промывали TBS / 0.1% Tween-20 трижды и инкубировали со вторичным антителом в течение одного часа, затем трижды промывали TBS / 0,1% Tween-20. Кляксы проявляли с использованием пленочного процессора Kodak XOMAT 1000A (Рочестер, штат Нью-Йорк).

Статистический анализ

Данные анализировали с использованием факторного дисперсионного анализа 2x2x2, а регрессионный анализ выполняли с использованием программного обеспечения JMP (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина). Значимость была установлена ​​априори при P <0,05. Графики были созданы с использованием программного обеспечения GraphPad Prism версии 4.0 (программное обеспечение GraphPad, Ла-Хойя, Калифорния).

Результаты

Влияние HFD и ниацина на метаболические параметры у мышей

HFD увеличило массу тела, вес эпидидимальных жировых подушечек, сывороточные концентрации глюкозы и инсулина как у WT, так и у HCA 2 — / — мышей (). Ниацин не влиял на вес эпидидимальной жировой прослойки, концентрацию глюкозы в сыворотке и концентрации инсулина (). Интересно, что ниацин имел тенденцию повышать концентрацию глюкозы в сыворотке у худых мышей WT и HCA 2 — / — , хотя это не достигло статистической значимости.Известно, что ниацин подавляет высвобождение свободных жирных кислот из адипоцитов, что приводит к временному снижению циркулирующих NEFA [29], [30]. В текущем исследовании ниацин снижал концентрацию NEFA в сыворотке у мышей WT только на контрольной диете, но неожиданно не приводил к снижению уровня триглицеридов в сыворотке ().

Таблица 2

Влияние HFD и ниацина на метаболические параметры у мышей.

Контрольная диета Кузов Вес (г) 32.1 ± 1,1 33,3 ± 1,1 45,1 ± 0,8 а 40,9 ± 1,9 29,5 ± 1,1 31,5 ± 0,9 38,7 ± 1,0 а 38,1 ± 2,5
Эпидидимальный жир Пад Вес (г) 1,1 ± 0,1 1,2 ± 0,1 2,0 ± 0,2 a 2,0 ± 0,2 1,0 ± 0,2 1,3 ± 0,1 2,9 ± 0,3 a 2,5 ± 0,2
Глюкоза (мг / дл) 149.5 ± 9,8 192,9 ± 16,5 249,2 ± 15,8 a 235,7 ± 18,4 157,4 ± 19,2 204,7 ± 8,7 247,5 ± 10,8 a 239,7 ± 23,4
Инсулин (нг / мл) 0,78 ± 0,3 0,81 ± 0,1 3,5 ± 0,5 a 2,5 ± 0,8 1,06 ± 0,4 1,57 ± 0,1 2,91 ± 0,4 a 2,90 ± 0,8
HOMA-IR 0.73 ± 0,29 0,94 ± 0,17 5,42 ± 0,96 a 3,93 ± 1,30 1,28 ± 0,68 1,98 ± 0,19 4,35 ± 0,44 a 4,61 ± 1,41
Триглицериды (мг / дл) 77,4 ± 5,3 83,4 ± 2,6 88,4 ± 4,7 99,9 ± 6,4 68,3 ± 2,4 89,2 ± 6,5 80,4 ± 2,0 89,4 ± 3,0
NEFA (мМоль) 1.2 ± 0,1 0,84 ± 0,1 * 0,82 ± 0,0 0,75 ± 0,1 0,83 ± 0,07 0,85 ± 0,08 0,56 ± 0,02 0,67 ± 0,05
Адипонектин (мкг / мл) 14,4 ± 1,0 14,4 ± 0,6 14,1 ± 0,7 17,1 ± 0,8 * 11,7 ± 0,5 12,2 ± 0,6 14,1 ± 0,8 15,2 ± 1,4
HMW Адипонектин (мкг / мл) 4.2 ± 0,5 3,5 ± 0,4 4,6 ± 0,4 6,3 ± 1,0 3,0 ± 0,3 3,7 ± 0,3 5,2 ± 0,3 a 5,7 ± 0,4

Ниацин Повышает антибиотик -воспалительный адипокин, адипонектин

Мы и другие ранее продемонстрировали, что лечение ниацином увеличивает концентрацию адипонектина в сыворотке [10], [31]. Адипонектин — это адипокин, секретируемый преимущественно из жировой ткани, обладающий противовоспалительным, сенсибилизирующим к инсулину и кардиозащитным действием.В текущем исследовании мы обнаружили, что лечение ниацином увеличивало концентрацию адипонектина в сыворотке у мышей WT на HFD на 21%, но не имело эффекта у мышей WT на контрольной диете () или у мышей HCA 2 — / — на контрольной группе. или HFD (). Увеличение общего адипонектина было частично объяснено тенденцией лечения ниацином к увеличению высокомолекулярного адипонектина у мышей WT, получавших HFD (4,6 ± 0,4 против 6,3 ± 1,0 мкг / мл).

Затем мы исследовали местную продукцию адипонектина в придатковой жировой ткани и обнаружили, что мыши WT и HCA 2 — / — на HFD имели значительно сниженную экспрессию гена адипонектина ().Ниацин увеличивал экспрессию гена адипонектина у мышей WT на HFD на 124%. (). Повышение экспрессии гена адипонектина не наблюдалось у мышей HCA 2 — / — , что указывает на то, что ниацин увеличивает экспрессию гена адипонектина в зависимости от HCA 2 — / — и что в результате происходит увеличение концентраций в сыворотке. от увеличения экспрессии генов.

Влияние HFD и ниацина на экспрессию гена адипонектина.

Экспрессия гена адипонектина в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B).Значения адипонектина были нормализованы до 36B4. *** P <0,001 по сравнению с мышами, получавшими контрольную диету-носитель; * P <0,05 по сравнению с мышами, получавшими носитель на диете с высоким содержанием жиров. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

В соответствии с данными по экспрессии гена адипонектина, экспрессия белка адипонектина в жировых подушечках придатка яичка была резко снижена у мышей WT на HFD ().Ниацин увеличивал экспрессию белка адипонектина у мышей WT на HFD (), но не оказывал влияния на мышей на контрольной диете (). Интересно, что мыши HCA 2 — / — оказались защищены от индуцированного HFD снижения экспрессии белка адипонектина EWAT (). Кроме того, ниацин не влиял на экспрессию белка адипонектина в EWAT мышей HCA 2 — / — в контроле () или HFD ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию белка адипонектина.

Экспрессия белка адипонектина в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B). 9 мкг белка разделяли с помощью SDS-PAGE и анализировали с помощью анализа иммуноблоттинга.

Ниацин-опосредованное увеличение адипонектина происходит независимо от изменений в экспрессии генов транскрипционных факторов или ER-шаперонов в жировой ткани, участвующих в продукции адипонектина

Клеточные и секретируемые уровни адипонектина можно регулировать на уровне транскрипции.Промотор адипонектина содержит сайты связывания для нескольких факторов транскрипции, которые, как было показано, положительно регулируют транскрипцию гена адипонектина, включая рецептор γ, активируемый пролифератором пероксисом (PPARγ) [32], CCAAT / связывающий энхансер белок α (C / EBPα) [33], и белок-1c, связывающий регуляторный элемент стерола (SREBP-1c) [34], [35]. Недавние исследования показали, что ниацин увеличивает активность и экспрессию PPARγ [36] и увеличивает экспрессию C / EBPα в жировой ткани [13]. Поскольку мы продемонстрировали, что ниацин увеличивает экспрессию гена адипонектина в придатном слое жира мышей дикого типа, получавших HFD, мы исследовали влияние ниацина на эти факторы транскрипции.

Экспрессия гена PPARγ была снижена в эпидидимальном жире мышей WT на HFD. Однако ниацин не влиял на экспрессию гена PPARγ у мышей WT (). Неожиданно ниацин увеличил экспрессию гена PPARγ у худых мышей HCA 2 — / — на 39% (). Экспрессия гена C / EBPα была значительно снижена в EWAT мышей WT, получавших HFD (), однако ниацин не влиял на экспрессию гена C / EBPα ни в одной группе мышей (). Промотор адипонектина трансактивируется SREBP-1c, при этом сверхэкспрессия SREBP-1c в адипоцитах 3T3-L1 увеличивает экспрессию гена адипонектина и белка [37].Мы обнаружили, что на экспрессию гена SREBP-1c в жировой ткани не повлияла диета или лечение ниацином во всех группах мышей ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию генов факторов транскрипции. Экспрессия гена

PPARγ в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B). Экспрессия гена C / EBPα в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D). Экспрессия гена SREBP-1c в EWAT мышей дикого типа (E) или мышей HCA 2 — / — (F).Все значения были нормализованы до 36B4. * P <0,05, ** P <0,01 по сравнению с мышами на контрольной диете, получавшими носитель. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Известно, что шапероны ER ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L участвуют в продукции и секреции адипонектина [38]. Чтобы изучить дополнительный механизм, с помощью которого ниацин может увеличивать концентрацию адипонектина в сыворотке, мы исследовали экспрессию генов ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L в жировой ткани придатка яичка.На ERp44 и Ero1-Lα не было значительного влияния диеты или лечения ниацином у мышей WT или HCA 2 — / — (). Экспрессия DsbA-L в жировой ткани мышей дикого типа была значительно снижена HFD, а ниацин имел тенденцию увеличивать его экспрессию в этой группе мышей, но не значительно ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию генов шаперонов ER.

Экспрессия гена ERp44 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), Экспрессия гена Ero1-Lα в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D) и экспрессия гена DsbA-L в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4. ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Ниацин ослабляет вызванное HFD воспаление жировой ткани рецепторно-зависимым образом

Противовоспалительное действие ниацина было продемонстрировано во многих тканях, включая почки [15], легкие [16], линии культур клеток адипоцитов [14], моноциты [17], сосудистые эндотелиальные клетки [19], [20] и пигментные эпителиальные клетки сетчатки [18].Однако до настоящего времени не проводились исследования противовоспалительных свойств ниацина в жировой ткани in vivo . Поэтому мы исследовали влияние ниацина на воспаление жировой ткани, включая экспрессию цитокинов, участвующих в воспалении и инфильтрации макрофагов. Как и ожидалось, HFD значительно увеличивал экспрессию гена MCP-1 в жировой ткани мышей WT и HCA 2 — / — (). Ниацин снижал экспрессию MCP-1 в жировой ткани мышей WT, получавших HFD, но не в любой другой группе мышей (), демонстрируя новые противовоспалительные эффекты ниацина в жировой ткани.Поскольку MCP-1 играет главную роль в привлечении моноцитов и макрофагов в жировую ткань, мы исследовали экспрессию общего маркера моноцитов и макрофагов, CD68. Как и ожидалось, HFD значительно увеличивал экспрессию CD68 в жировой ткани, предполагая повышенное присутствие макрофагов в EWAT (). Однако ниацин не влиял на экспрессию CD68. Эти результаты предполагают, что вместо изменения количества макрофагов, присутствующих в жировой ткани, ниацин может способствовать сдвигу поляризации макрофагов от M1 (провоспалительного) фенотипа макрофагов к M2 (противовоспалительному) фенотипу.Чтобы решить эту проблему, мы исследовали экспрессию в жировой ткани CD11c, маркера дендритных клеток, высоко экспрессируемого на провоспалительных макрофагах M1, а не на противовоспалительных макрофагах M2. HFD значительно увеличивал экспрессию CD11c в жировой ткани, что указывает на присутствие воспалительных макрофагов, а лечение ниацином значительно снижало экспрессию CD11c в жире мышей WT, получавших HFD ().

Влияние HFD и ниацина на маркеры воспаления жировой ткани.

Экспрессия гена MCP-1 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена CD68 в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D), И экспрессия гена CD11c в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

При дальнейшем исследовании экспрессии цитокинов в жире мы продемонстрировали, что HFD увеличивает экспрессию генов провоспалительных цитокинов IL-1β и TNF-α в EWAT мышей WT и HCA 2 — / — . Ниацин значительно снижал экспрессию IL-1β в жире мышей WT, получавших HFD ().Это важно, потому что IL-1β связан с патогенезом инсулинорезистентности [39]. IL-1β также высоко экспрессируется в воспалительных макрофагах. Снижение уровня IL-1β может указывать на способность ниацина уменьшать присутствие макрофагов M1 в жировой ткани. Не было эффекта ниацина на экспрессию TNF-α у мышей WT или HCA 2 — / — (), и не было эффекта HFD или ниацина на экспрессию IL-6 (). IL-10 представляет собой противовоспалительный цитокин, связанный с макрофагами спектра M2.Его экспрессия была значительно увеличена в EWAT мышей дикого типа и HCA 2 — / — на HFD, и ниацин не влиял на экспрессию IL-10 ни в одной из групп мышей ().

Влияние HFD и ниацина на маркеры воспаления жировой ткани.

Экспрессия гена IL-1β в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена TNF-α в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D) и экспрессия гена IL-6 в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Влияние HFD и ниацина на маркеры макрофагов M2.

Экспрессия гена IL-10 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена аргиназы-1 в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D), экспрессия гена Ym1 в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F) и экспрессия гена MRC-1 в EWAT дикого типа -типа (G) или мышей HCA 2 — / — (H).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Чтобы определить, опосредованы ли противовоспалительные эффекты ниацина в жировой ткани за счет уменьшения присутствия M1 и увеличения присутствия макрофагов M2, мы исследовали экспрессию маркеров макрофагов M2 в жире. HFD увеличил экспрессию в жировой ткани аргиназы-1, Ym1 и MRC-1, генов, которые высоко экспрессируются в макрофагах M2 (), и неожиданно лечение ниацином снизило экспрессию генов аргиназы-1 и MRC-1 в EWAT диких животных, которых кормили HFD. -типа, но не влиял на Ym1.CD163, маркер макрофагов М2, не подвергался влиянию диеты или лечения ниацином в любой группе мышей (данные не показаны).

Обсуждение

В настоящее время признано, что ниацин обладает сосудистыми антиоксидантными и противовоспалительными свойствами, которые могут способствовать улучшению сердечно-сосудистых исходов, независимо от изменений липидного профиля крови [40]. Фактически, Ganji et al. продемонстрировал, что ниацин непосредственно снижает продукцию активных форм кислорода эндотелием и последующее окисление ЛПНП в культивируемых эндотелиальных клетках аорты человека [22].Другие показали, что ниацин снижает экспрессию или высвобождение провоспалительных медиаторов, таких как CRP, TNF-α и MCP-1 [14], [17], [23]. Лукасова и др. продемонстрировал, что ниацин ингибирует прогрессирование атеросклеротического заболевания без изменения общего холестерина, холестерина ЛПВП или ТГ через 10 недель у мышей с нулевым рецептором ЛПНП [41]. Авторы также продемонстрировали, что ниацин ингибирует MCP-1-индуцированное рекрутирование макрофагов в атеросклеротические бляшки. Мы и другие продемонстрировали способность ниацина увеличивать продукцию адипоцитов и концентрацию противовоспалительного цитокина адипонектина в крови [10], [12], [14], [31].Эти противовоспалительные, липидно-независимые эффекты ниацина могут объяснить некоторые полезные свойства ниацина для здоровья при неизменном липидном профиле крови.

Адипоциты продуцируют ряд адипокинов, которые вносят как положительный, так и отрицательный вклад в системный воспалительный процесс. В жировой ткани худых людей адипоциты поддерживают, как правило, невоспалительный цитокиновый профиль. Однако при ожирении адипоциты гипертрофируются, чтобы накапливать избыток триглицеридов, и эта гипертрофия связана с нарушением регуляции секреции адипокинов [42].Гипертрофированные адипоциты вырабатывают меньше противовоспалительных адипокинов, включая адипонектин, и вырабатывают больше провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α, что способствует хроническому воспалению, наблюдаемому при ожирении [43], [44]. Механизмы, лежащие в основе индуцированного HFD снижения выработки адипонектина, включают изменение гормональной среды [42], [45], [46], окислительный стресс [47] и воспаление. Воспаление жировой ткани характеризуется повышенной экспрессией воспалительных цитокинов TNF-α и IL-6.TNF-α оказывает ингибирующее действие на экспрессию адипонектина за счет подавления его промоторной активности [48], а также было показано, что IL-6 ингибирует экспрессию адипонектина в адипоцитах [49]. Из исследований, которые продемонстрировали, что хроническое введение ниацина увеличивает уровень адипонектина в сыворотке, только одно выяснило возможные механизмы, с помощью которых это происходит [13]. Linke et al. показали, что шесть месяцев приема ниацина с пролонгированным высвобождением повышают концентрацию адипонектина в сыворотке на 35%, и это сопровождалось 4-кратным увеличением экспрессии мРНК адипонектина в подкожной жировой ткани людей с нарушенной толерантностью к глюкозе [13].Кроме того, Linke et al. продемонстрировал, что экспрессия мРНК PPARγ и C / EBPα также увеличивается в 1,6 и 1,5 раза, соответственно, в группе, получавшей ниацин. Мы не показали влияния ниацина на экспрессию генов PPARγ или C / EBPα в эпидидимальном жире мышей WT. Однако это не исключает участия PPARγ в способности ниацина повышать уровень адипонектина. Исследование активности или транслокации PPARγ в ядро ​​может иметь важное значение для дальнейшего изучения роли PPARγ в механизме действия ниацина.Хотя мы показали, что увеличение мРНК адипонектина и сывороточных концентраций не было результатом повышенной экспрессии гена PPARγ, другие показали, что in vitro , ниацин увеличивает экспрессию мРНК PPARγ [50], [51], индуцирует ядерную экспрессию белка PPARγ и усиливает транскрипционную активность PPARγ [36].

Помимо эффектов на экспрессию гена адипонектина, агонисты PPARγ могут увеличивать продукцию и / или секрецию адипонектина за счет изменения экспрессии шаперона ER [52] — [54].Шапероны ER, включая ERp44 и DsbA-L, важны для мультимеризации адипонектина [38], тогда как Ero-1Lα способствует высвобождению адипонектина из адипоцитов [54]. Поэтому мы исследовали, изменялась ли экспрессия ER шаперона краткосрочным введением ниацина, и обнаружили, что на экспрессию генов ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L лечение ниацином не повлияло. Следовательно, не похоже, что ниацин увеличивает выработку адипонектина посредством какого-либо из известных в настоящее время механизмов регуляции адипонектина, которые мы исследовали.

Способность ниацина увеличивать адипонектин может быть лишь одним из множества противовоспалительных эффектов ниацина в жировой ткани или может быть фактором, способствующим прямым противовоспалительным свойствам ниацина. Адипонектин обладает противовоспалительными свойствами, в том числе способствует поляризации макрофагов от фенотипа M1 к фенотипу M2 [55]. Лечение адипонектином увеличивает экспрессию генов и белков аргиназы-1, Mgl-1 и IL-10 и снижает экспрессию TNF-α и MCP-1 в изолированных перитонеальных макрофагах мыши [55].Кроме того, адипонектин подавляет активность NF-κB, фактора ядерной транскрипции, участвующего в воспалении жировой ткани, вызванном ожирением [56].

В текущем исследовании мы показали, что введение ниацина улучшает воспалительное состояние жировой ткани за счет изменения содержания цитокинов и макрофагов в жировой ткани. Ниацин ослаблял индуцированное HFD увеличение MCP-1, IL-1β и CD11c, генов, связанных с воспалительными макрофагами M1. Мы предполагаем, что, поскольку экспрессия в жировой ткани общего маркера макрофагов CD68 не изменялась ниацином, несмотря на снижение экспрессии CD11c, лечение ниацином способствовало сдвигу поляризации макрофагов от M1 к фенотипу M2.Профиль макрофагов в жировой ткани важен, поскольку повышенное присутствие макрофагов M1 в жировой ткани связано с инсулинорезистентностью, связанной с ожирением [57].

Макрофаги M2 существуют вдоль континуума и экспрессируют различные маркеры в зависимости от воздействия микросреды жировой ткани. В ответ на кормление HFD, хотя наблюдается явное увеличение маркеров макрофагов M1, во многих случаях также наблюдается увеличение маркеров M2 [28], [58], как мы продемонстрировали с помощью IL-10, аргиназы-1, MRC- 1 и Ym1.Интересно, что ниацин не увеличивал дополнительно экспрессию маркеров M2, как мы предполагали. Другие показали, что HFD увеличивает экспрессию в жировой ткани маркеров M2 аргиназы-1, Ym1 и IL-10 и что сенсибилизирующая к инсулину жирная кислота омега-3, DHA, дополнительно увеличивает эти маркеры M2 [59]. Опосредованное DHA увеличение аргиназы-1, Ym1 и IL-10 происходило в стромальной сосудистой фракции, а не во фракции адипоцитов жировой ткани [59]. Хотя мы также продемонстрировали индуцированное HFD увеличение маркеров M2 аргиназы-1, Ym1 и IL-10, мы обнаружили, что ниацин снижает экспрессию аргиназы-1 и не влияет на экспрессию Ym1 и IL-10 в жировой ткани.Поскольку многие из исследованных нами цитокинов продуцируются как адипоцитами, так и макрофагами (МСР-1, TNF-α, IL-10, IL-1β), в будущем будет важно отделить стромальную сосудистую фракцию от фракции адипоцитов для определить влияние ниацина на каждый из этих типов клеток. Также важно отметить, что два основных места экспрессии рецептора ниацина находятся на адипоцитах и ​​иммунных клетках, включая макрофаги, что еще раз демонстрирует важность изучения возможных дифференциальных эффектов ниацина на эти два типа клеток, широко присутствующих в жировой ткани.Первоначально мы были удивлены, что ниацин снижает экспрессию маркеров, связанных как с провоспалительными макрофагами M1 (CD11c, MCP-1, IL-1β), так и с противовоспалительными M2 (аргиназа-1 и MRC-1). Повышенная продукция адипоцитами MCP-1, свободных жирных кислот, мертвых и умирающих адипоцитов, гипоксия, окислительный стресс и стресс ER были идентифицированы как факторы, способствующие инфильтрации макрофагов в жировую ткань [60]. Известно, что свободные жирные кислоты направляют макрофаги M1 и M2 в жировую ткань.Повышенное количество местных и системных свободных жирных кислот в результате липолиза адипоцитов во время потери веса вызывает рекрутирование макрофагов в жировую ткань [61]. Поскольку ниацин является известным ингибитором липолиза адипоцитов, уменьшение количества свободных жирных кислот в сыворотке крови из адипоцитов может потенциально ингибировать рекрутирование макрофагов M1 и M2 в жировую ткань.

Рецептор ниацина в основном экспрессируется в адипоцитах и ​​иммунных клетках, включая макрофаги. Интересно, что экспрессия рецептора ниацина на макрофагах увеличивается при лечении провоспалительными стимулами, включая TNF-α, интерферон γ или LPS [62].Неизвестно, экспрессируется ли рецептор ниацина в резидентных противовоспалительных макрофагах M2, присутствующих в жировой ткани худых людей. В текущем исследовании мы продемонстрировали противовоспалительные эффекты ниацина только у мышей WT, получавших HFD, которые демонстрируют повышенное присутствие провоспалительных макрофагов M1 в жировой ткани. Возможно, причина, по которой мы не наблюдали противовоспалительного действия ниацина у худых мышей, заключается в том, что ниацин оказывает свое противовоспалительное действие посредством прямого связывания со своим рецептором на адипоцитах и ​​макрофагах M1, которые поляризованы в воспалительное состояние. которые отсутствуют в жировой ткани худых людей.

Интересно, что были продемонстрированы положительные эффекты ниацина на биологию адипоцитов [13]. Например, адипоциты, выделенные у людей, получавших ниацин, имели меньшие средний и максимальный диаметр и объем по сравнению с контрольными субъектами [13]. Кроме того, в этих адипоцитах улучшилась чувствительность к инсулину. Хотя мы не изучали чувствительность к инсулину у наших мышей, есть доказательства того, что лечение ниацином улучшает чувствительность к инсулину в адипоцитах, и наши результаты предполагают, что это может быть связано с уменьшением воспаления жировой ткани.Однако клинически было продемонстрировано, что ниацин повышает уровень глюкозы в крови у пациентов с диабетом и без диабета [3], поэтому влияние ниацина на чувствительность адипоцитов к инсулину, вероятно, не способствует улучшению чувствительности к инсулину всего тела.

Таким образом, результаты текущего исследования показывают, что ниацин снижает воспаление жировой ткани за счет снижения содержания провоспалительных цитокинов, хемокинов и макрофагов, а также за счет повышения концентрации адипонектина в сыворотке и жировой ткани.Однако, чтобы полностью выяснить влияние ниацина на воспаление жировой ткани, необходимы количественные исследования с использованием сортировки клеток, активируемых флуоресценцией, для определения количества и типа макрофагов, присутствующих в жировой ткани. Повышение уровня адипонектина происходило независимо от изменений в экспрессии ключевых факторов транскрипции и шаперонов ER, участвующих в продукции адипонектина. Эти данные подтверждают идею о плейотропных эффектах ниацина для улучшения метаболических параметров в тканях-мишенях, а именно в жировой ткани.Кроме того, все эти противовоспалительные эффекты ниацина были потеряны у мышей с нокаутом рецепторов ниацина. Это согласуется с предыдущими сообщениями о том, что рецептор ниацина необходим для опосредования противовоспалительных свойств ниацина [14], [17], [41]. Кроме того, важно отметить, что положительные эффекты ниацина, наблюдаемые у мышей, получавших HFD, не проявлялись у худых мышей WT. Эти данные свидетельствуют о том, что плейотропное действие ниацина наиболее выражено при метаболической дисфункции, вызванной ожирением.

Ниацин увеличивает уровень адипонектина и уменьшает воспаление жировой ткани у мышей с высоким содержанием жиров

Введение

Заболеваемость ожирением в США за последние 30 лет достигла масштабов эпидемии. Ожирение связано с повышенным риском метаболических и сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), при этом ССЗ являются одной из ведущих причин заболеваемости и смертности в США [1]. Повышенный липолиз жировой ткани и повышенное содержание неэтерифицированных жирных кислот (NEFA) в сыворотке — характерные черты ожирения, которые часто приводят к развитию атерогенной дислипидемии.Атерогенная дислипидемия — это совокупность метаболических нарушений, характеризующихся умеренно повышенным холестерином липопротеидов низкой плотности (ХС-ЛПНП; 130–159 мг / дл) и триглицеридами (ТГ;> 150 мг / дл), небольшими частицами ЛПНП и липопротеинами низкой плотности. холестерин (ХС-ЛПВП; <35 мг / дл) [2]. Ниацин, применяемый в клинических условиях в качестве монотерапии, является эффективным фармакологическим вмешательством для лечения атерогенной дислипидемии из-за его способности уменьшать толщину интимы сонной артерии, улучшать функцию эндотелия и снижать заболеваемость и смертность от сердечно-сосудистых заболеваний, предположительно за счет улучшения липидных и липопротеиновых характеристик крови.Наряду с умеренным снижением концентрации циркулирующих липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), LDL-C, TG и липопротеинов (a), ниацин является эффективным фармакологическим инструментом для повышения концентрации HDL-C [3] - [6].

Улучшение метаболизма липидов в крови, производимое ниацином, в значительной степени связано с его хорошо задокументированными эффектами на липолиз жировой ткани и синтез триглицеридов в печени [7]. Ниацин подавляет липолиз за счет активации рецептора ниацина (HCA 2 ) в жировой ткани, который временно ингибирует цАМФ / PKA и снижает гидролиз триглицеридов и концентрацию NEFA в сыворотке [8].Однако недавно было продемонстрировано, что действие ниацина на липиды не зависит от рецептора ниацина и подавления свободных жирных кислот [9].

Становится все более очевидным, что ниацин обладает плейотропными свойствами в дополнение к его известным терапевтическим эффектам на метаболизм липидов. Данные нашей и других групп указывают на то, что ниацин резко увеличивает сывороточные концентрации адипокина, адипонектина у мужчин с ожирением и метаболическим синдромом [10], [11]. Кроме того, однократная доза ниацина, вводимая перорально или внутрибрюшинно, резко увеличивает концентрацию адипонектина в сыворотке крови у крыс и мышей в течение нескольких минут, и этот эффект зависит от активации рецептора ниацина [12].Другие показали, что лечение ниацином приводит к увеличению мРНК адипонектина [13], [14]. Снижение концентрации циркулирующего адипонектина — один из наиболее многообещающих биомаркеров метаболического синдрома и сердечно-сосудистых заболеваний. Адипонектин обладает инсулино-сенсибилизирующими, антиатеросклеротическими и противовоспалительными свойствами; поэтому, по крайней мере, некоторые из полезных для здоровья свойств ниацина могут быть связаны с повышением концентрации адипонектина в сыворотке крови.

Совсем недавно исследования показали, что ниацин оказывает противовоспалительное действие в ряде тканей, включая почки [15], легкие [16], адипоциты 3T3-L1 [14], моноциты [17], пигментные эпителиальные клетки сетчатки [18]. ] и эндотелиальные клетки сосудов [19], [20].Было показано, что введение ниацина снижает экспрессию MCP-1, TNF-α и IL-6 и активацию NF-κB в почках и легких на моделях грызунов [15], [16]. Кроме того, лечение ниацином снижает индуцированное TNF-α увеличение экспрессии генов и секреции провоспалительных хемокинов MCP-1, фракталкина и RANTES и увеличивает мРНК адипонектина в адипоцитах 3T3-L1 [14]. Лечение ниацином подавляет сигнальный путь NF-κB, что приводит к снижению секреции провоспалительных цитокинов и хемокинов TNF-α, IL-6 и MCP-1 в изолированных моноцитах человека и пигментных эпителиальных клетках сетчатки [18], [21].Было продемонстрировано, что ниацин подавляет воспаление сосудов, уменьшая продукцию активных форм кислорода эндотелием и продукцию воспалительных цитокинов [22]. Системно ниацин снижает уровень С-реактивного белка и TNF-α, а также уменьшает воспаление печени за счет уменьшения содержания макрофагов в печени [23], [24]. Ниацин также подавляет хемотаксис моноцитов [14]. Многие из этих противовоспалительных свойств ниацина были связаны с активацией рецептора ниацина [17], [18].

Ожирение связано со снижением концентрации адипонектина в плазме и хроническим воспалением легкой степени, характеризующимся повышенной экспрессией в жировой ткани провоспалительных хемокинов и цитокинов, таких как MCP-1 [25] и TNF-α [26], а также инфильтрацией. макрофагов M1 (провоспалительных) [27], [28].Таким образом, цель настоящего исследования состояла в том, чтобы определить влияние приема ниацина на воспаление жировой ткани, вызванное ожирением, через изменения цитокинового профиля и инфильтрацию жира макрофагами, с особым акцентом на роли адипонектина.

Материалы и методы

Материалы

Ниацин (никотиновая кислота) был приобретен у Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури). Поликлональный адипонектин кролика и антитела к GAPDH были получены от Abcam, Inc.(Кембридж, Массачусетс).

Исследования на животных

Тридцать две самцы мышей C57BL / 6 в возрасте 3-4 недель были приобретены в Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Мышей помещали либо на контрольную диету (10% ккал в виде жира; n = 16), либо на диету с высоким содержанием жиров (HFD; 60% ккал в виде жира; n = 16), полученную от Research Diets (Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси), в течение 11 недель. . Через шесть недель на контрольной диете или диете с высоким содержанием жиров половина мышей из каждой группы получала ниацин (приблизительно 200 мг / кг / день), растворенный в питьевой воде или носителе (воде), в течение четырех недель.Концентрация ниацина была увеличена примерно до 360 мг / кг / день на пятой неделе лечения. После пяти недель лечения носителем или ниацином мышей голодали в течение ночи (12 ч) и умерщвляли декапитацией. Цельную кровь собирали и обрабатывали для выделения сыворотки, а ткани мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C до анализа.

Параллельные исследования были проведены на самцах глобальных мышей HCA 2 — / — (рецептор ниацина). Тринадцать мышей HCA 2 — / — помещали на контрольную диету (7 получали носитель; 6 получали ниацин), а девять мышей HCA 2 — / — помещали на диету с высоким содержанием жиров (4 получали наполнитель). ; 5 человек получали ниацин).Исходные пары мышей HCA 2 — / — были щедрым подарком от доктора Стефана Офферманса (Бад Наухайм, Германия). Все исследования на животных были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных Обернского университета до их начала, и были предприняты максимальные меры для сведения к минимуму страданий животных.

Анализ сыворотки

Концентрации общего адипонектина и инсулина в сыворотке измеряли с использованием наборов для ELISA от Millipore (Темекула, Калифорния). Концентрации высокомолекулярного (HMW) адипонектина в сыворотке измеряли с использованием набора для ELISA от Alpco Diagnostics (Салем, штат Нью-Хэмпшир).Концентрации глюкозы и триглицеридов в сыворотке измеряли с помощью наборов от Cayman Chemicals (Анн-Арбор, Мичиган). NEFA в сыворотке измеряли с помощью набора от Wako Chemicals (Ричмонд, Вирджиния).

ПЦР в реальном времени

РНК

выделяли из эпидидимальной белой жировой ткани (EWAT) с использованием набора Qiagen RNeasy Lipid Tissue Mini (Валенсия, Калифорния). РНК (0,5 или 1 мкг) подвергали обратной транскрипции в кДНК с использованием набора для синтеза кДНК iScript от Bio-Rad. Праймеры для ПЦР, используемые в анализе ПЦР в реальном времени, перечислены в.Анализы выполняли на термоциклере Bio-Rad iCycler iQ. Образцы анализировали в реакционной смеси по 30 мкл с использованием SYBR Green PCR Master Mix (Bio-Rad). Все уровни экспрессии были нормализованы до соответствующих уровней мРНК 36B4 и проанализированы с использованием метода 2 -ΔΔCT . Уровни 36B4 не изменились в ответ на лечение HFD или ниацином.

Таблица 1

Праймеры, используемые для ОТ-ПЦР в реальном времени.

Ген Прямой праймер 5′-3 ‘ Обратный праймер 5′-3′
Адипонектин GGAGAGCCTGGAGAAGCC ATGTGGTAAGAGAAGTAGTAGAGTC
PPARγ TTATGGAGCCTAAGTTTGAGTTTG AGCAGGTTGTCTTGGATGTC
C / EBPα GTGGAGACGCAACAGAAGG CAGCGACCCGAAACCATC
СРЭБП-1с AACCTCATCCGCCACCTG GTAGACAACAGCCGCATCC
ERp44 CAGTCCACGAGATTCAGAGTC AGAAAGGAAGGCACAGTCATC
Ero1-Lα TGGAGCCGTGGATGAGTC CCTTGTAGCCTGTGTAGCG
DSBA-L ATCACGGAGTATCAGAGCATTC GCAACAGTGGTGGGTAGC
МКП-1 GCATCTGCCCTAAGGTCTTC CACTGTCACACTGGTCACTC
CD68 AGGCTACAGGCTGCTCAG GGGCTGGTAGGTTGATTGTC
CD11c GGAGCAGGTGGCATTGTG GAGCGATGTCCTGTCTTGAG
ИЛ-1β GCAGCAGCACATCAACAAG GTTCATCTCGGAGCCTGTAG
TNF-α CGTGGAACTGGCAGAAGAG GTAGACAGAAGAGCGTGGTG
Ил-6 AGCCAGAGTCCTTCAGAGAG GATGGTCTTGGTCCTTAGCC
Ил-10 GCAGTGGAGCAGGTGAAG CGGAGAGAGGTACAAACGAG
Аргиназа-1 TTGGCTTGCTTCGGAACTC GGAGGAGAAGGCGTTTGC
Ym1 GCCCACCAGGAAAGTACAC CTTGAGCCACTGAGCCTTC
MRC-1 ATTGTGGAGCAGATGGAAGG GTCGTAGTCAGTGGTGGTTC
36B4 CACTGCTGAACATGCTGAAC CCACAGACAATGCCAGGAC

Иммуноблот-анализ

Подушечки EWAT (~ 100 мг) гомогенизировали с помощью портативного гомогенизатора в буфере RIPA [NP40 (1%), дезоксихолат натрия (24.1 мМ), SDS (0,05%), NaCl (0,81%), Трис (25 мМ, pH 6,8), EDTA (1 мМ) с добавлением ингибиторов протеаз и фосфатаз] и белковые фракции эпидидимального жира. Затем на образцах был проведен анализ белка DC (Bio-Rad) для определения концентрации белка в каждом образце. Белки (9 мкг) разделяли с помощью SDS-PAGE (10%) и переносили на PVDF-мембраны. Мембраны блокировали в 5% обезжиренном сухом молоке в течение 1 часа и инкубировали с первичным антителом в течение 2,75 часа. Мембраны промывали TBS / 0.1% Tween-20 трижды и инкубировали со вторичным антителом в течение одного часа, затем трижды промывали TBS / 0,1% Tween-20. Кляксы проявляли с использованием пленочного процессора Kodak XOMAT 1000A (Рочестер, штат Нью-Йорк).

Статистический анализ

Данные анализировали с использованием факторного дисперсионного анализа 2x2x2, а регрессионный анализ выполняли с использованием программного обеспечения JMP (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина). Значимость была установлена ​​априори при P <0,05. Графики были созданы с использованием программного обеспечения GraphPad Prism версии 4.0 (программное обеспечение GraphPad, Ла-Хойя, Калифорния).

Результаты

Влияние HFD и ниацина на метаболические параметры у мышей

HFD увеличило массу тела, вес эпидидимальных жировых подушечек, сывороточные концентрации глюкозы и инсулина как у WT, так и у HCA 2 — / — мышей (). Ниацин не влиял на вес эпидидимальной жировой прослойки, концентрацию глюкозы в сыворотке и концентрации инсулина (). Интересно, что ниацин имел тенденцию повышать концентрацию глюкозы в сыворотке у худых мышей WT и HCA 2 — / — , хотя это не достигло статистической значимости.Известно, что ниацин подавляет высвобождение свободных жирных кислот из адипоцитов, что приводит к временному снижению циркулирующих NEFA [29], [30]. В текущем исследовании ниацин снижал концентрацию NEFA в сыворотке у мышей WT только на контрольной диете, но неожиданно не приводил к снижению уровня триглицеридов в сыворотке ().

Таблица 2

Влияние HFD и ниацина на метаболические параметры у мышей.

Контрольная диета Кузов Вес (г) 32.1 ± 1,1 33,3 ± 1,1 45,1 ± 0,8 а 40,9 ± 1,9 29,5 ± 1,1 31,5 ± 0,9 38,7 ± 1,0 а 38,1 ± 2,5
Эпидидимальный жир Пад Вес (г) 1,1 ± 0,1 1,2 ± 0,1 2,0 ± 0,2 a 2,0 ± 0,2 1,0 ± 0,2 1,3 ± 0,1 2,9 ± 0,3 a 2,5 ± 0,2
Глюкоза (мг / дл) 149.5 ± 9,8 192,9 ± 16,5 249,2 ± 15,8 a 235,7 ± 18,4 157,4 ± 19,2 204,7 ± 8,7 247,5 ± 10,8 a 239,7 ± 23,4
Инсулин (нг / мл) 0,78 ± 0,3 0,81 ± 0,1 3,5 ± 0,5 a 2,5 ± 0,8 1,06 ± 0,4 1,57 ± 0,1 2,91 ± 0,4 a 2,90 ± 0,8
HOMA-IR 0.73 ± 0,29 0,94 ± 0,17 5,42 ± 0,96 a 3,93 ± 1,30 1,28 ± 0,68 1,98 ± 0,19 4,35 ± 0,44 a 4,61 ± 1,41
Триглицериды (мг / дл) 77,4 ± 5,3 83,4 ± 2,6 88,4 ± 4,7 99,9 ± 6,4 68,3 ± 2,4 89,2 ± 6,5 80,4 ± 2,0 89,4 ± 3,0
NEFA (мМоль) 1.2 ± 0,1 0,84 ± 0,1 * 0,82 ± 0,0 0,75 ± 0,1 0,83 ± 0,07 0,85 ± 0,08 0,56 ± 0,02 0,67 ± 0,05
Адипонектин (мкг / мл) 14,4 ± 1,0 14,4 ± 0,6 14,1 ± 0,7 17,1 ± 0,8 * 11,7 ± 0,5 12,2 ± 0,6 14,1 ± 0,8 15,2 ± 1,4
HMW Адипонектин (мкг / мл) 4.2 ± 0,5 3,5 ± 0,4 4,6 ± 0,4 6,3 ± 1,0 3,0 ± 0,3 3,7 ± 0,3 5,2 ± 0,3 a 5,7 ± 0,4

Ниацин Повышает антибиотик -воспалительный адипокин, адипонектин

Мы и другие ранее продемонстрировали, что лечение ниацином увеличивает концентрацию адипонектина в сыворотке [10], [31]. Адипонектин — это адипокин, секретируемый преимущественно из жировой ткани, обладающий противовоспалительным, сенсибилизирующим к инсулину и кардиозащитным действием.В текущем исследовании мы обнаружили, что лечение ниацином увеличивало концентрацию адипонектина в сыворотке у мышей WT на HFD на 21%, но не имело эффекта у мышей WT на контрольной диете () или у мышей HCA 2 — / — на контрольной группе. или HFD (). Увеличение общего адипонектина было частично объяснено тенденцией лечения ниацином к увеличению высокомолекулярного адипонектина у мышей WT, получавших HFD (4,6 ± 0,4 против 6,3 ± 1,0 мкг / мл).

Затем мы исследовали местную продукцию адипонектина в придатковой жировой ткани и обнаружили, что мыши WT и HCA 2 — / — на HFD имели значительно сниженную экспрессию гена адипонектина ().Ниацин увеличивал экспрессию гена адипонектина у мышей WT на HFD на 124%. (). Повышение экспрессии гена адипонектина не наблюдалось у мышей HCA 2 — / — , что указывает на то, что ниацин увеличивает экспрессию гена адипонектина в зависимости от HCA 2 — / — и что в результате происходит увеличение концентраций в сыворотке. от увеличения экспрессии генов.

Влияние HFD и ниацина на экспрессию гена адипонектина.

Экспрессия гена адипонектина в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B).Значения адипонектина были нормализованы до 36B4. *** P <0,001 по сравнению с мышами, получавшими контрольную диету-носитель; * P <0,05 по сравнению с мышами, получавшими носитель на диете с высоким содержанием жиров. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

В соответствии с данными по экспрессии гена адипонектина, экспрессия белка адипонектина в жировых подушечках придатка яичка была резко снижена у мышей WT на HFD ().Ниацин увеличивал экспрессию белка адипонектина у мышей WT на HFD (), но не оказывал влияния на мышей на контрольной диете (). Интересно, что мыши HCA 2 — / — оказались защищены от индуцированного HFD снижения экспрессии белка адипонектина EWAT (). Кроме того, ниацин не влиял на экспрессию белка адипонектина в EWAT мышей HCA 2 — / — в контроле () или HFD ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию белка адипонектина.

Экспрессия белка адипонектина в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B). 9 мкг белка разделяли с помощью SDS-PAGE и анализировали с помощью анализа иммуноблоттинга.

Ниацин-опосредованное увеличение адипонектина происходит независимо от изменений в экспрессии генов транскрипционных факторов или ER-шаперонов в жировой ткани, участвующих в продукции адипонектина

Клеточные и секретируемые уровни адипонектина можно регулировать на уровне транскрипции.Промотор адипонектина содержит сайты связывания для нескольких факторов транскрипции, которые, как было показано, положительно регулируют транскрипцию гена адипонектина, включая рецептор γ, активируемый пролифератором пероксисом (PPARγ) [32], CCAAT / связывающий энхансер белок α (C / EBPα) [33], и белок-1c, связывающий регуляторный элемент стерола (SREBP-1c) [34], [35]. Недавние исследования показали, что ниацин увеличивает активность и экспрессию PPARγ [36] и увеличивает экспрессию C / EBPα в жировой ткани [13]. Поскольку мы продемонстрировали, что ниацин увеличивает экспрессию гена адипонектина в придатном слое жира мышей дикого типа, получавших HFD, мы исследовали влияние ниацина на эти факторы транскрипции.

Экспрессия гена PPARγ была снижена в эпидидимальном жире мышей WT на HFD. Однако ниацин не влиял на экспрессию гена PPARγ у мышей WT (). Неожиданно ниацин увеличил экспрессию гена PPARγ у худых мышей HCA 2 — / — на 39% (). Экспрессия гена C / EBPα была значительно снижена в EWAT мышей WT, получавших HFD (), однако ниацин не влиял на экспрессию гена C / EBPα ни в одной группе мышей (). Промотор адипонектина трансактивируется SREBP-1c, при этом сверхэкспрессия SREBP-1c в адипоцитах 3T3-L1 увеличивает экспрессию гена адипонектина и белка [37].Мы обнаружили, что на экспрессию гена SREBP-1c в жировой ткани не повлияла диета или лечение ниацином во всех группах мышей ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию генов факторов транскрипции. Экспрессия гена

PPARγ в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B). Экспрессия гена C / EBPα в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D). Экспрессия гена SREBP-1c в EWAT мышей дикого типа (E) или мышей HCA 2 — / — (F).Все значения были нормализованы до 36B4. * P <0,05, ** P <0,01 по сравнению с мышами на контрольной диете, получавшими носитель. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Известно, что шапероны ER ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L участвуют в продукции и секреции адипонектина [38]. Чтобы изучить дополнительный механизм, с помощью которого ниацин может увеличивать концентрацию адипонектина в сыворотке, мы исследовали экспрессию генов ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L в жировой ткани придатка яичка.На ERp44 и Ero1-Lα не было значительного влияния диеты или лечения ниацином у мышей WT или HCA 2 — / — (). Экспрессия DsbA-L в жировой ткани мышей дикого типа была значительно снижена HFD, а ниацин имел тенденцию увеличивать его экспрессию в этой группе мышей, но не значительно ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию генов шаперонов ER.

Экспрессия гена ERp44 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), Экспрессия гена Ero1-Lα в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D) и экспрессия гена DsbA-L в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4. ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Ниацин ослабляет вызванное HFD воспаление жировой ткани рецепторно-зависимым образом

Противовоспалительное действие ниацина было продемонстрировано во многих тканях, включая почки [15], легкие [16], линии культур клеток адипоцитов [14], моноциты [17], сосудистые эндотелиальные клетки [19], [20] и пигментные эпителиальные клетки сетчатки [18].Однако до настоящего времени не проводились исследования противовоспалительных свойств ниацина в жировой ткани in vivo . Поэтому мы исследовали влияние ниацина на воспаление жировой ткани, включая экспрессию цитокинов, участвующих в воспалении и инфильтрации макрофагов. Как и ожидалось, HFD значительно увеличивал экспрессию гена MCP-1 в жировой ткани мышей WT и HCA 2 — / — (). Ниацин снижал экспрессию MCP-1 в жировой ткани мышей WT, получавших HFD, но не в любой другой группе мышей (), демонстрируя новые противовоспалительные эффекты ниацина в жировой ткани.Поскольку MCP-1 играет главную роль в привлечении моноцитов и макрофагов в жировую ткань, мы исследовали экспрессию общего маркера моноцитов и макрофагов, CD68. Как и ожидалось, HFD значительно увеличивал экспрессию CD68 в жировой ткани, предполагая повышенное присутствие макрофагов в EWAT (). Однако ниацин не влиял на экспрессию CD68. Эти результаты предполагают, что вместо изменения количества макрофагов, присутствующих в жировой ткани, ниацин может способствовать сдвигу поляризации макрофагов от M1 (провоспалительного) фенотипа макрофагов к M2 (противовоспалительному) фенотипу.Чтобы решить эту проблему, мы исследовали экспрессию в жировой ткани CD11c, маркера дендритных клеток, высоко экспрессируемого на провоспалительных макрофагах M1, а не на противовоспалительных макрофагах M2. HFD значительно увеличивал экспрессию CD11c в жировой ткани, что указывает на присутствие воспалительных макрофагов, а лечение ниацином значительно снижало экспрессию CD11c в жире мышей WT, получавших HFD ().

Влияние HFD и ниацина на маркеры воспаления жировой ткани.

Экспрессия гена MCP-1 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена CD68 в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D), И экспрессия гена CD11c в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

При дальнейшем исследовании экспрессии цитокинов в жире мы продемонстрировали, что HFD увеличивает экспрессию генов провоспалительных цитокинов IL-1β и TNF-α в EWAT мышей WT и HCA 2 — / — . Ниацин значительно снижал экспрессию IL-1β в жире мышей WT, получавших HFD ().Это важно, потому что IL-1β связан с патогенезом инсулинорезистентности [39]. IL-1β также высоко экспрессируется в воспалительных макрофагах. Снижение уровня IL-1β может указывать на способность ниацина уменьшать присутствие макрофагов M1 в жировой ткани. Не было эффекта ниацина на экспрессию TNF-α у мышей WT или HCA 2 — / — (), и не было эффекта HFD или ниацина на экспрессию IL-6 (). IL-10 представляет собой противовоспалительный цитокин, связанный с макрофагами спектра M2.Его экспрессия была значительно увеличена в EWAT мышей дикого типа и HCA 2 — / — на HFD, и ниацин не влиял на экспрессию IL-10 ни в одной из групп мышей ().

Влияние HFD и ниацина на маркеры воспаления жировой ткани.

Экспрессия гена IL-1β в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена TNF-α в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D) и экспрессия гена IL-6 в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Влияние HFD и ниацина на маркеры макрофагов M2.

Экспрессия гена IL-10 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена аргиназы-1 в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D), экспрессия гена Ym1 в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F) и экспрессия гена MRC-1 в EWAT дикого типа -типа (G) или мышей HCA 2 — / — (H).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Чтобы определить, опосредованы ли противовоспалительные эффекты ниацина в жировой ткани за счет уменьшения присутствия M1 и увеличения присутствия макрофагов M2, мы исследовали экспрессию маркеров макрофагов M2 в жире. HFD увеличил экспрессию в жировой ткани аргиназы-1, Ym1 и MRC-1, генов, которые высоко экспрессируются в макрофагах M2 (), и неожиданно лечение ниацином снизило экспрессию генов аргиназы-1 и MRC-1 в EWAT диких животных, которых кормили HFD. -типа, но не влиял на Ym1.CD163, маркер макрофагов М2, не подвергался влиянию диеты или лечения ниацином в любой группе мышей (данные не показаны).

Обсуждение

В настоящее время признано, что ниацин обладает сосудистыми антиоксидантными и противовоспалительными свойствами, которые могут способствовать улучшению сердечно-сосудистых исходов, независимо от изменений липидного профиля крови [40]. Фактически, Ganji et al. продемонстрировал, что ниацин непосредственно снижает продукцию активных форм кислорода эндотелием и последующее окисление ЛПНП в культивируемых эндотелиальных клетках аорты человека [22].Другие показали, что ниацин снижает экспрессию или высвобождение провоспалительных медиаторов, таких как CRP, TNF-α и MCP-1 [14], [17], [23]. Лукасова и др. продемонстрировал, что ниацин ингибирует прогрессирование атеросклеротического заболевания без изменения общего холестерина, холестерина ЛПВП или ТГ через 10 недель у мышей с нулевым рецептором ЛПНП [41]. Авторы также продемонстрировали, что ниацин ингибирует MCP-1-индуцированное рекрутирование макрофагов в атеросклеротические бляшки. Мы и другие продемонстрировали способность ниацина увеличивать продукцию адипоцитов и концентрацию противовоспалительного цитокина адипонектина в крови [10], [12], [14], [31].Эти противовоспалительные, липидно-независимые эффекты ниацина могут объяснить некоторые полезные свойства ниацина для здоровья при неизменном липидном профиле крови.

Адипоциты продуцируют ряд адипокинов, которые вносят как положительный, так и отрицательный вклад в системный воспалительный процесс. В жировой ткани худых людей адипоциты поддерживают, как правило, невоспалительный цитокиновый профиль. Однако при ожирении адипоциты гипертрофируются, чтобы накапливать избыток триглицеридов, и эта гипертрофия связана с нарушением регуляции секреции адипокинов [42].Гипертрофированные адипоциты вырабатывают меньше противовоспалительных адипокинов, включая адипонектин, и вырабатывают больше провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α, что способствует хроническому воспалению, наблюдаемому при ожирении [43], [44]. Механизмы, лежащие в основе индуцированного HFD снижения выработки адипонектина, включают изменение гормональной среды [42], [45], [46], окислительный стресс [47] и воспаление. Воспаление жировой ткани характеризуется повышенной экспрессией воспалительных цитокинов TNF-α и IL-6.TNF-α оказывает ингибирующее действие на экспрессию адипонектина за счет подавления его промоторной активности [48], а также было показано, что IL-6 ингибирует экспрессию адипонектина в адипоцитах [49]. Из исследований, которые продемонстрировали, что хроническое введение ниацина увеличивает уровень адипонектина в сыворотке, только одно выяснило возможные механизмы, с помощью которых это происходит [13]. Linke et al. показали, что шесть месяцев приема ниацина с пролонгированным высвобождением повышают концентрацию адипонектина в сыворотке на 35%, и это сопровождалось 4-кратным увеличением экспрессии мРНК адипонектина в подкожной жировой ткани людей с нарушенной толерантностью к глюкозе [13].Кроме того, Linke et al. продемонстрировал, что экспрессия мРНК PPARγ и C / EBPα также увеличивается в 1,6 и 1,5 раза, соответственно, в группе, получавшей ниацин. Мы не показали влияния ниацина на экспрессию генов PPARγ или C / EBPα в эпидидимальном жире мышей WT. Однако это не исключает участия PPARγ в способности ниацина повышать уровень адипонектина. Исследование активности или транслокации PPARγ в ядро ​​может иметь важное значение для дальнейшего изучения роли PPARγ в механизме действия ниацина.Хотя мы показали, что увеличение мРНК адипонектина и сывороточных концентраций не было результатом повышенной экспрессии гена PPARγ, другие показали, что in vitro , ниацин увеличивает экспрессию мРНК PPARγ [50], [51], индуцирует ядерную экспрессию белка PPARγ и усиливает транскрипционную активность PPARγ [36].

Помимо эффектов на экспрессию гена адипонектина, агонисты PPARγ могут увеличивать продукцию и / или секрецию адипонектина за счет изменения экспрессии шаперона ER [52] — [54].Шапероны ER, включая ERp44 и DsbA-L, важны для мультимеризации адипонектина [38], тогда как Ero-1Lα способствует высвобождению адипонектина из адипоцитов [54]. Поэтому мы исследовали, изменялась ли экспрессия ER шаперона краткосрочным введением ниацина, и обнаружили, что на экспрессию генов ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L лечение ниацином не повлияло. Следовательно, не похоже, что ниацин увеличивает выработку адипонектина посредством какого-либо из известных в настоящее время механизмов регуляции адипонектина, которые мы исследовали.

Способность ниацина увеличивать адипонектин может быть лишь одним из множества противовоспалительных эффектов ниацина в жировой ткани или может быть фактором, способствующим прямым противовоспалительным свойствам ниацина. Адипонектин обладает противовоспалительными свойствами, в том числе способствует поляризации макрофагов от фенотипа M1 к фенотипу M2 [55]. Лечение адипонектином увеличивает экспрессию генов и белков аргиназы-1, Mgl-1 и IL-10 и снижает экспрессию TNF-α и MCP-1 в изолированных перитонеальных макрофагах мыши [55].Кроме того, адипонектин подавляет активность NF-κB, фактора ядерной транскрипции, участвующего в воспалении жировой ткани, вызванном ожирением [56].

В текущем исследовании мы показали, что введение ниацина улучшает воспалительное состояние жировой ткани за счет изменения содержания цитокинов и макрофагов в жировой ткани. Ниацин ослаблял индуцированное HFD увеличение MCP-1, IL-1β и CD11c, генов, связанных с воспалительными макрофагами M1. Мы предполагаем, что, поскольку экспрессия в жировой ткани общего маркера макрофагов CD68 не изменялась ниацином, несмотря на снижение экспрессии CD11c, лечение ниацином способствовало сдвигу поляризации макрофагов от M1 к фенотипу M2.Профиль макрофагов в жировой ткани важен, поскольку повышенное присутствие макрофагов M1 в жировой ткани связано с инсулинорезистентностью, связанной с ожирением [57].

Макрофаги M2 существуют вдоль континуума и экспрессируют различные маркеры в зависимости от воздействия микросреды жировой ткани. В ответ на кормление HFD, хотя наблюдается явное увеличение маркеров макрофагов M1, во многих случаях также наблюдается увеличение маркеров M2 [28], [58], как мы продемонстрировали с помощью IL-10, аргиназы-1, MRC- 1 и Ym1.Интересно, что ниацин не увеличивал дополнительно экспрессию маркеров M2, как мы предполагали. Другие показали, что HFD увеличивает экспрессию в жировой ткани маркеров M2 аргиназы-1, Ym1 и IL-10 и что сенсибилизирующая к инсулину жирная кислота омега-3, DHA, дополнительно увеличивает эти маркеры M2 [59]. Опосредованное DHA увеличение аргиназы-1, Ym1 и IL-10 происходило в стромальной сосудистой фракции, а не во фракции адипоцитов жировой ткани [59]. Хотя мы также продемонстрировали индуцированное HFD увеличение маркеров M2 аргиназы-1, Ym1 и IL-10, мы обнаружили, что ниацин снижает экспрессию аргиназы-1 и не влияет на экспрессию Ym1 и IL-10 в жировой ткани.Поскольку многие из исследованных нами цитокинов продуцируются как адипоцитами, так и макрофагами (МСР-1, TNF-α, IL-10, IL-1β), в будущем будет важно отделить стромальную сосудистую фракцию от фракции адипоцитов для определить влияние ниацина на каждый из этих типов клеток. Также важно отметить, что два основных места экспрессии рецептора ниацина находятся на адипоцитах и ​​иммунных клетках, включая макрофаги, что еще раз демонстрирует важность изучения возможных дифференциальных эффектов ниацина на эти два типа клеток, широко присутствующих в жировой ткани.Первоначально мы были удивлены, что ниацин снижает экспрессию маркеров, связанных как с провоспалительными макрофагами M1 (CD11c, MCP-1, IL-1β), так и с противовоспалительными M2 (аргиназа-1 и MRC-1). Повышенная продукция адипоцитами MCP-1, свободных жирных кислот, мертвых и умирающих адипоцитов, гипоксия, окислительный стресс и стресс ER были идентифицированы как факторы, способствующие инфильтрации макрофагов в жировую ткань [60]. Известно, что свободные жирные кислоты направляют макрофаги M1 и M2 в жировую ткань.Повышенное количество местных и системных свободных жирных кислот в результате липолиза адипоцитов во время потери веса вызывает рекрутирование макрофагов в жировую ткань [61]. Поскольку ниацин является известным ингибитором липолиза адипоцитов, уменьшение количества свободных жирных кислот в сыворотке крови из адипоцитов может потенциально ингибировать рекрутирование макрофагов M1 и M2 в жировую ткань.

Рецептор ниацина в основном экспрессируется в адипоцитах и ​​иммунных клетках, включая макрофаги. Интересно, что экспрессия рецептора ниацина на макрофагах увеличивается при лечении провоспалительными стимулами, включая TNF-α, интерферон γ или LPS [62].Неизвестно, экспрессируется ли рецептор ниацина в резидентных противовоспалительных макрофагах M2, присутствующих в жировой ткани худых людей. В текущем исследовании мы продемонстрировали противовоспалительные эффекты ниацина только у мышей WT, получавших HFD, которые демонстрируют повышенное присутствие провоспалительных макрофагов M1 в жировой ткани. Возможно, причина, по которой мы не наблюдали противовоспалительного действия ниацина у худых мышей, заключается в том, что ниацин оказывает свое противовоспалительное действие посредством прямого связывания со своим рецептором на адипоцитах и ​​макрофагах M1, которые поляризованы в воспалительное состояние. которые отсутствуют в жировой ткани худых людей.

Интересно, что были продемонстрированы положительные эффекты ниацина на биологию адипоцитов [13]. Например, адипоциты, выделенные у людей, получавших ниацин, имели меньшие средний и максимальный диаметр и объем по сравнению с контрольными субъектами [13]. Кроме того, в этих адипоцитах улучшилась чувствительность к инсулину. Хотя мы не изучали чувствительность к инсулину у наших мышей, есть доказательства того, что лечение ниацином улучшает чувствительность к инсулину в адипоцитах, и наши результаты предполагают, что это может быть связано с уменьшением воспаления жировой ткани.Однако клинически было продемонстрировано, что ниацин повышает уровень глюкозы в крови у пациентов с диабетом и без диабета [3], поэтому влияние ниацина на чувствительность адипоцитов к инсулину, вероятно, не способствует улучшению чувствительности к инсулину всего тела.

Таким образом, результаты текущего исследования показывают, что ниацин снижает воспаление жировой ткани за счет снижения содержания провоспалительных цитокинов, хемокинов и макрофагов, а также за счет повышения концентрации адипонектина в сыворотке и жировой ткани.Однако, чтобы полностью выяснить влияние ниацина на воспаление жировой ткани, необходимы количественные исследования с использованием сортировки клеток, активируемых флуоресценцией, для определения количества и типа макрофагов, присутствующих в жировой ткани. Повышение уровня адипонектина происходило независимо от изменений в экспрессии ключевых факторов транскрипции и шаперонов ER, участвующих в продукции адипонектина. Эти данные подтверждают идею о плейотропных эффектах ниацина для улучшения метаболических параметров в тканях-мишенях, а именно в жировой ткани.Кроме того, все эти противовоспалительные эффекты ниацина были потеряны у мышей с нокаутом рецепторов ниацина. Это согласуется с предыдущими сообщениями о том, что рецептор ниацина необходим для опосредования противовоспалительных свойств ниацина [14], [17], [41]. Кроме того, важно отметить, что положительные эффекты ниацина, наблюдаемые у мышей, получавших HFD, не проявлялись у худых мышей WT. Эти данные свидетельствуют о том, что плейотропное действие ниацина наиболее выражено при метаболической дисфункции, вызванной ожирением.

Ниацин увеличивает уровень адипонектина и уменьшает воспаление жировой ткани у мышей с высоким содержанием жиров

Введение

Заболеваемость ожирением в США за последние 30 лет достигла масштабов эпидемии. Ожирение связано с повышенным риском метаболических и сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), при этом ССЗ являются одной из ведущих причин заболеваемости и смертности в США [1]. Повышенный липолиз жировой ткани и повышенное содержание неэтерифицированных жирных кислот (NEFA) в сыворотке — характерные черты ожирения, которые часто приводят к развитию атерогенной дислипидемии.Атерогенная дислипидемия — это совокупность метаболических нарушений, характеризующихся умеренно повышенным холестерином липопротеидов низкой плотности (ХС-ЛПНП; 130–159 мг / дл) и триглицеридами (ТГ;> 150 мг / дл), небольшими частицами ЛПНП и липопротеинами низкой плотности. холестерин (ХС-ЛПВП; <35 мг / дл) [2]. Ниацин, применяемый в клинических условиях в качестве монотерапии, является эффективным фармакологическим вмешательством для лечения атерогенной дислипидемии из-за его способности уменьшать толщину интимы сонной артерии, улучшать функцию эндотелия и снижать заболеваемость и смертность от сердечно-сосудистых заболеваний, предположительно за счет улучшения липидных и липопротеиновых характеристик крови.Наряду с умеренным снижением концентрации циркулирующих липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), LDL-C, TG и липопротеинов (a), ниацин является эффективным фармакологическим инструментом для повышения концентрации HDL-C [3] - [6].

Улучшение метаболизма липидов в крови, производимое ниацином, в значительной степени связано с его хорошо задокументированными эффектами на липолиз жировой ткани и синтез триглицеридов в печени [7]. Ниацин подавляет липолиз за счет активации рецептора ниацина (HCA 2 ) в жировой ткани, который временно ингибирует цАМФ / PKA и снижает гидролиз триглицеридов и концентрацию NEFA в сыворотке [8].Однако недавно было продемонстрировано, что действие ниацина на липиды не зависит от рецептора ниацина и подавления свободных жирных кислот [9].

Становится все более очевидным, что ниацин обладает плейотропными свойствами в дополнение к его известным терапевтическим эффектам на метаболизм липидов. Данные нашей и других групп указывают на то, что ниацин резко увеличивает сывороточные концентрации адипокина, адипонектина у мужчин с ожирением и метаболическим синдромом [10], [11]. Кроме того, однократная доза ниацина, вводимая перорально или внутрибрюшинно, резко увеличивает концентрацию адипонектина в сыворотке крови у крыс и мышей в течение нескольких минут, и этот эффект зависит от активации рецептора ниацина [12].Другие показали, что лечение ниацином приводит к увеличению мРНК адипонектина [13], [14]. Снижение концентрации циркулирующего адипонектина — один из наиболее многообещающих биомаркеров метаболического синдрома и сердечно-сосудистых заболеваний. Адипонектин обладает инсулино-сенсибилизирующими, антиатеросклеротическими и противовоспалительными свойствами; поэтому, по крайней мере, некоторые из полезных для здоровья свойств ниацина могут быть связаны с повышением концентрации адипонектина в сыворотке крови.

Совсем недавно исследования показали, что ниацин оказывает противовоспалительное действие в ряде тканей, включая почки [15], легкие [16], адипоциты 3T3-L1 [14], моноциты [17], пигментные эпителиальные клетки сетчатки [18]. ] и эндотелиальные клетки сосудов [19], [20].Было показано, что введение ниацина снижает экспрессию MCP-1, TNF-α и IL-6 и активацию NF-κB в почках и легких на моделях грызунов [15], [16]. Кроме того, лечение ниацином снижает индуцированное TNF-α увеличение экспрессии генов и секреции провоспалительных хемокинов MCP-1, фракталкина и RANTES и увеличивает мРНК адипонектина в адипоцитах 3T3-L1 [14]. Лечение ниацином подавляет сигнальный путь NF-κB, что приводит к снижению секреции провоспалительных цитокинов и хемокинов TNF-α, IL-6 и MCP-1 в изолированных моноцитах человека и пигментных эпителиальных клетках сетчатки [18], [21].Было продемонстрировано, что ниацин подавляет воспаление сосудов, уменьшая продукцию активных форм кислорода эндотелием и продукцию воспалительных цитокинов [22]. Системно ниацин снижает уровень С-реактивного белка и TNF-α, а также уменьшает воспаление печени за счет уменьшения содержания макрофагов в печени [23], [24]. Ниацин также подавляет хемотаксис моноцитов [14]. Многие из этих противовоспалительных свойств ниацина были связаны с активацией рецептора ниацина [17], [18].

Ожирение связано со снижением концентрации адипонектина в плазме и хроническим воспалением легкой степени, характеризующимся повышенной экспрессией в жировой ткани провоспалительных хемокинов и цитокинов, таких как MCP-1 [25] и TNF-α [26], а также инфильтрацией. макрофагов M1 (провоспалительных) [27], [28].Таким образом, цель настоящего исследования состояла в том, чтобы определить влияние приема ниацина на воспаление жировой ткани, вызванное ожирением, через изменения цитокинового профиля и инфильтрацию жира макрофагами, с особым акцентом на роли адипонектина.

Материалы и методы

Материалы

Ниацин (никотиновая кислота) был приобретен у Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури). Поликлональный адипонектин кролика и антитела к GAPDH были получены от Abcam, Inc.(Кембридж, Массачусетс).

Исследования на животных

Тридцать две самцы мышей C57BL / 6 в возрасте 3-4 недель были приобретены в Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Мышей помещали либо на контрольную диету (10% ккал в виде жира; n = 16), либо на диету с высоким содержанием жиров (HFD; 60% ккал в виде жира; n = 16), полученную от Research Diets (Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси), в течение 11 недель. . Через шесть недель на контрольной диете или диете с высоким содержанием жиров половина мышей из каждой группы получала ниацин (приблизительно 200 мг / кг / день), растворенный в питьевой воде или носителе (воде), в течение четырех недель.Концентрация ниацина была увеличена примерно до 360 мг / кг / день на пятой неделе лечения. После пяти недель лечения носителем или ниацином мышей голодали в течение ночи (12 ч) и умерщвляли декапитацией. Цельную кровь собирали и обрабатывали для выделения сыворотки, а ткани мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C до анализа.

Параллельные исследования были проведены на самцах глобальных мышей HCA 2 — / — (рецептор ниацина). Тринадцать мышей HCA 2 — / — помещали на контрольную диету (7 получали носитель; 6 получали ниацин), а девять мышей HCA 2 — / — помещали на диету с высоким содержанием жиров (4 получали наполнитель). ; 5 человек получали ниацин).Исходные пары мышей HCA 2 — / — были щедрым подарком от доктора Стефана Офферманса (Бад Наухайм, Германия). Все исследования на животных были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных Обернского университета до их начала, и были предприняты максимальные меры для сведения к минимуму страданий животных.

Анализ сыворотки

Концентрации общего адипонектина и инсулина в сыворотке измеряли с использованием наборов для ELISA от Millipore (Темекула, Калифорния). Концентрации высокомолекулярного (HMW) адипонектина в сыворотке измеряли с использованием набора для ELISA от Alpco Diagnostics (Салем, штат Нью-Хэмпшир).Концентрации глюкозы и триглицеридов в сыворотке измеряли с помощью наборов от Cayman Chemicals (Анн-Арбор, Мичиган). NEFA в сыворотке измеряли с помощью набора от Wako Chemicals (Ричмонд, Вирджиния).

ПЦР в реальном времени

РНК

выделяли из эпидидимальной белой жировой ткани (EWAT) с использованием набора Qiagen RNeasy Lipid Tissue Mini (Валенсия, Калифорния). РНК (0,5 или 1 мкг) подвергали обратной транскрипции в кДНК с использованием набора для синтеза кДНК iScript от Bio-Rad. Праймеры для ПЦР, используемые в анализе ПЦР в реальном времени, перечислены в.Анализы выполняли на термоциклере Bio-Rad iCycler iQ. Образцы анализировали в реакционной смеси по 30 мкл с использованием SYBR Green PCR Master Mix (Bio-Rad). Все уровни экспрессии были нормализованы до соответствующих уровней мРНК 36B4 и проанализированы с использованием метода 2 -ΔΔCT . Уровни 36B4 не изменились в ответ на лечение HFD или ниацином.

Таблица 1

Праймеры, используемые для ОТ-ПЦР в реальном времени.

Ген Прямой праймер 5′-3 ‘ Обратный праймер 5′-3′
Адипонектин GGAGAGCCTGGAGAAGCC ATGTGGTAAGAGAAGTAGTAGAGTC
PPARγ TTATGGAGCCTAAGTTTGAGTTTG AGCAGGTTGTCTTGGATGTC
C / EBPα GTGGAGACGCAACAGAAGG CAGCGACCCGAAACCATC
СРЭБП-1с AACCTCATCCGCCACCTG GTAGACAACAGCCGCATCC
ERp44 CAGTCCACGAGATTCAGAGTC AGAAAGGAAGGCACAGTCATC
Ero1-Lα TGGAGCCGTGGATGAGTC CCTTGTAGCCTGTGTAGCG
DSBA-L ATCACGGAGTATCAGAGCATTC GCAACAGTGGTGGGTAGC
МКП-1 GCATCTGCCCTAAGGTCTTC CACTGTCACACTGGTCACTC
CD68 AGGCTACAGGCTGCTCAG GGGCTGGTAGGTTGATTGTC
CD11c GGAGCAGGTGGCATTGTG GAGCGATGTCCTGTCTTGAG
ИЛ-1β GCAGCAGCACATCAACAAG GTTCATCTCGGAGCCTGTAG
TNF-α CGTGGAACTGGCAGAAGAG GTAGACAGAAGAGCGTGGTG
Ил-6 AGCCAGAGTCCTTCAGAGAG GATGGTCTTGGTCCTTAGCC
Ил-10 GCAGTGGAGCAGGTGAAG CGGAGAGAGGTACAAACGAG
Аргиназа-1 TTGGCTTGCTTCGGAACTC GGAGGAGAAGGCGTTTGC
Ym1 GCCCACCAGGAAAGTACAC CTTGAGCCACTGAGCCTTC
MRC-1 ATTGTGGAGCAGATGGAAGG GTCGTAGTCAGTGGTGGTTC
36B4 CACTGCTGAACATGCTGAAC CCACAGACAATGCCAGGAC

Иммуноблот-анализ

Подушечки EWAT (~ 100 мг) гомогенизировали с помощью портативного гомогенизатора в буфере RIPA [NP40 (1%), дезоксихолат натрия (24.1 мМ), SDS (0,05%), NaCl (0,81%), Трис (25 мМ, pH 6,8), EDTA (1 мМ) с добавлением ингибиторов протеаз и фосфатаз] и белковые фракции эпидидимального жира. Затем на образцах был проведен анализ белка DC (Bio-Rad) для определения концентрации белка в каждом образце. Белки (9 мкг) разделяли с помощью SDS-PAGE (10%) и переносили на PVDF-мембраны. Мембраны блокировали в 5% обезжиренном сухом молоке в течение 1 часа и инкубировали с первичным антителом в течение 2,75 часа. Мембраны промывали TBS / 0.1% Tween-20 трижды и инкубировали со вторичным антителом в течение одного часа, затем трижды промывали TBS / 0,1% Tween-20. Кляксы проявляли с использованием пленочного процессора Kodak XOMAT 1000A (Рочестер, штат Нью-Йорк).

Статистический анализ

Данные анализировали с использованием факторного дисперсионного анализа 2x2x2, а регрессионный анализ выполняли с использованием программного обеспечения JMP (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина). Значимость была установлена ​​априори при P <0,05. Графики были созданы с использованием программного обеспечения GraphPad Prism версии 4.0 (программное обеспечение GraphPad, Ла-Хойя, Калифорния).

Результаты

Влияние HFD и ниацина на метаболические параметры у мышей

HFD увеличило массу тела, вес эпидидимальных жировых подушечек, сывороточные концентрации глюкозы и инсулина как у WT, так и у HCA 2 — / — мышей (). Ниацин не влиял на вес эпидидимальной жировой прослойки, концентрацию глюкозы в сыворотке и концентрации инсулина (). Интересно, что ниацин имел тенденцию повышать концентрацию глюкозы в сыворотке у худых мышей WT и HCA 2 — / — , хотя это не достигло статистической значимости.Известно, что ниацин подавляет высвобождение свободных жирных кислот из адипоцитов, что приводит к временному снижению циркулирующих NEFA [29], [30]. В текущем исследовании ниацин снижал концентрацию NEFA в сыворотке у мышей WT только на контрольной диете, но неожиданно не приводил к снижению уровня триглицеридов в сыворотке ().

Таблица 2

Влияние HFD и ниацина на метаболические параметры у мышей.

Контрольная диета Кузов Вес (г) 32.1 ± 1,1 33,3 ± 1,1 45,1 ± 0,8 а 40,9 ± 1,9 29,5 ± 1,1 31,5 ± 0,9 38,7 ± 1,0 а 38,1 ± 2,5
Эпидидимальный жир Пад Вес (г) 1,1 ± 0,1 1,2 ± 0,1 2,0 ± 0,2 a 2,0 ± 0,2 1,0 ± 0,2 1,3 ± 0,1 2,9 ± 0,3 a 2,5 ± 0,2
Глюкоза (мг / дл) 149.5 ± 9,8 192,9 ± 16,5 249,2 ± 15,8 a 235,7 ± 18,4 157,4 ± 19,2 204,7 ± 8,7 247,5 ± 10,8 a 239,7 ± 23,4
Инсулин (нг / мл) 0,78 ± 0,3 0,81 ± 0,1 3,5 ± 0,5 a 2,5 ± 0,8 1,06 ± 0,4 1,57 ± 0,1 2,91 ± 0,4 a 2,90 ± 0,8
HOMA-IR 0.73 ± 0,29 0,94 ± 0,17 5,42 ± 0,96 a 3,93 ± 1,30 1,28 ± 0,68 1,98 ± 0,19 4,35 ± 0,44 a 4,61 ± 1,41
Триглицериды (мг / дл) 77,4 ± 5,3 83,4 ± 2,6 88,4 ± 4,7 99,9 ± 6,4 68,3 ± 2,4 89,2 ± 6,5 80,4 ± 2,0 89,4 ± 3,0
NEFA (мМоль) 1.2 ± 0,1 0,84 ± 0,1 * 0,82 ± 0,0 0,75 ± 0,1 0,83 ± 0,07 0,85 ± 0,08 0,56 ± 0,02 0,67 ± 0,05
Адипонектин (мкг / мл) 14,4 ± 1,0 14,4 ± 0,6 14,1 ± 0,7 17,1 ± 0,8 * 11,7 ± 0,5 12,2 ± 0,6 14,1 ± 0,8 15,2 ± 1,4
HMW Адипонектин (мкг / мл) 4.2 ± 0,5 3,5 ± 0,4 4,6 ± 0,4 6,3 ± 1,0 3,0 ± 0,3 3,7 ± 0,3 5,2 ± 0,3 a 5,7 ± 0,4

Ниацин Повышает антибиотик -воспалительный адипокин, адипонектин

Мы и другие ранее продемонстрировали, что лечение ниацином увеличивает концентрацию адипонектина в сыворотке [10], [31]. Адипонектин — это адипокин, секретируемый преимущественно из жировой ткани, обладающий противовоспалительным, сенсибилизирующим к инсулину и кардиозащитным действием.В текущем исследовании мы обнаружили, что лечение ниацином увеличивало концентрацию адипонектина в сыворотке у мышей WT на HFD на 21%, но не имело эффекта у мышей WT на контрольной диете () или у мышей HCA 2 — / — на контрольной группе. или HFD (). Увеличение общего адипонектина было частично объяснено тенденцией лечения ниацином к увеличению высокомолекулярного адипонектина у мышей WT, получавших HFD (4,6 ± 0,4 против 6,3 ± 1,0 мкг / мл).

Затем мы исследовали местную продукцию адипонектина в придатковой жировой ткани и обнаружили, что мыши WT и HCA 2 — / — на HFD имели значительно сниженную экспрессию гена адипонектина ().Ниацин увеличивал экспрессию гена адипонектина у мышей WT на HFD на 124%. (). Повышение экспрессии гена адипонектина не наблюдалось у мышей HCA 2 — / — , что указывает на то, что ниацин увеличивает экспрессию гена адипонектина в зависимости от HCA 2 — / — и что в результате происходит увеличение концентраций в сыворотке. от увеличения экспрессии генов.

Влияние HFD и ниацина на экспрессию гена адипонектина.

Экспрессия гена адипонектина в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B).Значения адипонектина были нормализованы до 36B4. *** P <0,001 по сравнению с мышами, получавшими контрольную диету-носитель; * P <0,05 по сравнению с мышами, получавшими носитель на диете с высоким содержанием жиров. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

В соответствии с данными по экспрессии гена адипонектина, экспрессия белка адипонектина в жировых подушечках придатка яичка была резко снижена у мышей WT на HFD ().Ниацин увеличивал экспрессию белка адипонектина у мышей WT на HFD (), но не оказывал влияния на мышей на контрольной диете (). Интересно, что мыши HCA 2 — / — оказались защищены от индуцированного HFD снижения экспрессии белка адипонектина EWAT (). Кроме того, ниацин не влиял на экспрессию белка адипонектина в EWAT мышей HCA 2 — / — в контроле () или HFD ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию белка адипонектина.

Экспрессия белка адипонектина в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B). 9 мкг белка разделяли с помощью SDS-PAGE и анализировали с помощью анализа иммуноблоттинга.

Ниацин-опосредованное увеличение адипонектина происходит независимо от изменений в экспрессии генов транскрипционных факторов или ER-шаперонов в жировой ткани, участвующих в продукции адипонектина

Клеточные и секретируемые уровни адипонектина можно регулировать на уровне транскрипции.Промотор адипонектина содержит сайты связывания для нескольких факторов транскрипции, которые, как было показано, положительно регулируют транскрипцию гена адипонектина, включая рецептор γ, активируемый пролифератором пероксисом (PPARγ) [32], CCAAT / связывающий энхансер белок α (C / EBPα) [33], и белок-1c, связывающий регуляторный элемент стерола (SREBP-1c) [34], [35]. Недавние исследования показали, что ниацин увеличивает активность и экспрессию PPARγ [36] и увеличивает экспрессию C / EBPα в жировой ткани [13]. Поскольку мы продемонстрировали, что ниацин увеличивает экспрессию гена адипонектина в придатном слое жира мышей дикого типа, получавших HFD, мы исследовали влияние ниацина на эти факторы транскрипции.

Экспрессия гена PPARγ была снижена в эпидидимальном жире мышей WT на HFD. Однако ниацин не влиял на экспрессию гена PPARγ у мышей WT (). Неожиданно ниацин увеличил экспрессию гена PPARγ у худых мышей HCA 2 — / — на 39% (). Экспрессия гена C / EBPα была значительно снижена в EWAT мышей WT, получавших HFD (), однако ниацин не влиял на экспрессию гена C / EBPα ни в одной группе мышей (). Промотор адипонектина трансактивируется SREBP-1c, при этом сверхэкспрессия SREBP-1c в адипоцитах 3T3-L1 увеличивает экспрессию гена адипонектина и белка [37].Мы обнаружили, что на экспрессию гена SREBP-1c в жировой ткани не повлияла диета или лечение ниацином во всех группах мышей ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию генов факторов транскрипции. Экспрессия гена

PPARγ в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B). Экспрессия гена C / EBPα в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D). Экспрессия гена SREBP-1c в EWAT мышей дикого типа (E) или мышей HCA 2 — / — (F).Все значения были нормализованы до 36B4. * P <0,05, ** P <0,01 по сравнению с мышами на контрольной диете, получавшими носитель. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Известно, что шапероны ER ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L участвуют в продукции и секреции адипонектина [38]. Чтобы изучить дополнительный механизм, с помощью которого ниацин может увеличивать концентрацию адипонектина в сыворотке, мы исследовали экспрессию генов ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L в жировой ткани придатка яичка.На ERp44 и Ero1-Lα не было значительного влияния диеты или лечения ниацином у мышей WT или HCA 2 — / — (). Экспрессия DsbA-L в жировой ткани мышей дикого типа была значительно снижена HFD, а ниацин имел тенденцию увеличивать его экспрессию в этой группе мышей, но не значительно ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию генов шаперонов ER.

Экспрессия гена ERp44 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), Экспрессия гена Ero1-Lα в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D) и экспрессия гена DsbA-L в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4. ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Ниацин ослабляет вызванное HFD воспаление жировой ткани рецепторно-зависимым образом

Противовоспалительное действие ниацина было продемонстрировано во многих тканях, включая почки [15], легкие [16], линии культур клеток адипоцитов [14], моноциты [17], сосудистые эндотелиальные клетки [19], [20] и пигментные эпителиальные клетки сетчатки [18].Однако до настоящего времени не проводились исследования противовоспалительных свойств ниацина в жировой ткани in vivo . Поэтому мы исследовали влияние ниацина на воспаление жировой ткани, включая экспрессию цитокинов, участвующих в воспалении и инфильтрации макрофагов. Как и ожидалось, HFD значительно увеличивал экспрессию гена MCP-1 в жировой ткани мышей WT и HCA 2 — / — (). Ниацин снижал экспрессию MCP-1 в жировой ткани мышей WT, получавших HFD, но не в любой другой группе мышей (), демонстрируя новые противовоспалительные эффекты ниацина в жировой ткани.Поскольку MCP-1 играет главную роль в привлечении моноцитов и макрофагов в жировую ткань, мы исследовали экспрессию общего маркера моноцитов и макрофагов, CD68. Как и ожидалось, HFD значительно увеличивал экспрессию CD68 в жировой ткани, предполагая повышенное присутствие макрофагов в EWAT (). Однако ниацин не влиял на экспрессию CD68. Эти результаты предполагают, что вместо изменения количества макрофагов, присутствующих в жировой ткани, ниацин может способствовать сдвигу поляризации макрофагов от M1 (провоспалительного) фенотипа макрофагов к M2 (противовоспалительному) фенотипу.Чтобы решить эту проблему, мы исследовали экспрессию в жировой ткани CD11c, маркера дендритных клеток, высоко экспрессируемого на провоспалительных макрофагах M1, а не на противовоспалительных макрофагах M2. HFD значительно увеличивал экспрессию CD11c в жировой ткани, что указывает на присутствие воспалительных макрофагов, а лечение ниацином значительно снижало экспрессию CD11c в жире мышей WT, получавших HFD ().

Влияние HFD и ниацина на маркеры воспаления жировой ткани.

Экспрессия гена MCP-1 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена CD68 в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D), И экспрессия гена CD11c в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

При дальнейшем исследовании экспрессии цитокинов в жире мы продемонстрировали, что HFD увеличивает экспрессию генов провоспалительных цитокинов IL-1β и TNF-α в EWAT мышей WT и HCA 2 — / — . Ниацин значительно снижал экспрессию IL-1β в жире мышей WT, получавших HFD ().Это важно, потому что IL-1β связан с патогенезом инсулинорезистентности [39]. IL-1β также высоко экспрессируется в воспалительных макрофагах. Снижение уровня IL-1β может указывать на способность ниацина уменьшать присутствие макрофагов M1 в жировой ткани. Не было эффекта ниацина на экспрессию TNF-α у мышей WT или HCA 2 — / — (), и не было эффекта HFD или ниацина на экспрессию IL-6 (). IL-10 представляет собой противовоспалительный цитокин, связанный с макрофагами спектра M2.Его экспрессия была значительно увеличена в EWAT мышей дикого типа и HCA 2 — / — на HFD, и ниацин не влиял на экспрессию IL-10 ни в одной из групп мышей ().

Влияние HFD и ниацина на маркеры воспаления жировой ткани.

Экспрессия гена IL-1β в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена TNF-α в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D) и экспрессия гена IL-6 в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Влияние HFD и ниацина на маркеры макрофагов M2.

Экспрессия гена IL-10 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена аргиназы-1 в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D), экспрессия гена Ym1 в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F) и экспрессия гена MRC-1 в EWAT дикого типа -типа (G) или мышей HCA 2 — / — (H).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Чтобы определить, опосредованы ли противовоспалительные эффекты ниацина в жировой ткани за счет уменьшения присутствия M1 и увеличения присутствия макрофагов M2, мы исследовали экспрессию маркеров макрофагов M2 в жире. HFD увеличил экспрессию в жировой ткани аргиназы-1, Ym1 и MRC-1, генов, которые высоко экспрессируются в макрофагах M2 (), и неожиданно лечение ниацином снизило экспрессию генов аргиназы-1 и MRC-1 в EWAT диких животных, которых кормили HFD. -типа, но не влиял на Ym1.CD163, маркер макрофагов М2, не подвергался влиянию диеты или лечения ниацином в любой группе мышей (данные не показаны).

Обсуждение

В настоящее время признано, что ниацин обладает сосудистыми антиоксидантными и противовоспалительными свойствами, которые могут способствовать улучшению сердечно-сосудистых исходов, независимо от изменений липидного профиля крови [40]. Фактически, Ganji et al. продемонстрировал, что ниацин непосредственно снижает продукцию активных форм кислорода эндотелием и последующее окисление ЛПНП в культивируемых эндотелиальных клетках аорты человека [22].Другие показали, что ниацин снижает экспрессию или высвобождение провоспалительных медиаторов, таких как CRP, TNF-α и MCP-1 [14], [17], [23]. Лукасова и др. продемонстрировал, что ниацин ингибирует прогрессирование атеросклеротического заболевания без изменения общего холестерина, холестерина ЛПВП или ТГ через 10 недель у мышей с нулевым рецептором ЛПНП [41]. Авторы также продемонстрировали, что ниацин ингибирует MCP-1-индуцированное рекрутирование макрофагов в атеросклеротические бляшки. Мы и другие продемонстрировали способность ниацина увеличивать продукцию адипоцитов и концентрацию противовоспалительного цитокина адипонектина в крови [10], [12], [14], [31].Эти противовоспалительные, липидно-независимые эффекты ниацина могут объяснить некоторые полезные свойства ниацина для здоровья при неизменном липидном профиле крови.

Адипоциты продуцируют ряд адипокинов, которые вносят как положительный, так и отрицательный вклад в системный воспалительный процесс. В жировой ткани худых людей адипоциты поддерживают, как правило, невоспалительный цитокиновый профиль. Однако при ожирении адипоциты гипертрофируются, чтобы накапливать избыток триглицеридов, и эта гипертрофия связана с нарушением регуляции секреции адипокинов [42].Гипертрофированные адипоциты вырабатывают меньше противовоспалительных адипокинов, включая адипонектин, и вырабатывают больше провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α, что способствует хроническому воспалению, наблюдаемому при ожирении [43], [44]. Механизмы, лежащие в основе индуцированного HFD снижения выработки адипонектина, включают изменение гормональной среды [42], [45], [46], окислительный стресс [47] и воспаление. Воспаление жировой ткани характеризуется повышенной экспрессией воспалительных цитокинов TNF-α и IL-6.TNF-α оказывает ингибирующее действие на экспрессию адипонектина за счет подавления его промоторной активности [48], а также было показано, что IL-6 ингибирует экспрессию адипонектина в адипоцитах [49]. Из исследований, которые продемонстрировали, что хроническое введение ниацина увеличивает уровень адипонектина в сыворотке, только одно выяснило возможные механизмы, с помощью которых это происходит [13]. Linke et al. показали, что шесть месяцев приема ниацина с пролонгированным высвобождением повышают концентрацию адипонектина в сыворотке на 35%, и это сопровождалось 4-кратным увеличением экспрессии мРНК адипонектина в подкожной жировой ткани людей с нарушенной толерантностью к глюкозе [13].Кроме того, Linke et al. продемонстрировал, что экспрессия мРНК PPARγ и C / EBPα также увеличивается в 1,6 и 1,5 раза, соответственно, в группе, получавшей ниацин. Мы не показали влияния ниацина на экспрессию генов PPARγ или C / EBPα в эпидидимальном жире мышей WT. Однако это не исключает участия PPARγ в способности ниацина повышать уровень адипонектина. Исследование активности или транслокации PPARγ в ядро ​​может иметь важное значение для дальнейшего изучения роли PPARγ в механизме действия ниацина.Хотя мы показали, что увеличение мРНК адипонектина и сывороточных концентраций не было результатом повышенной экспрессии гена PPARγ, другие показали, что in vitro , ниацин увеличивает экспрессию мРНК PPARγ [50], [51], индуцирует ядерную экспрессию белка PPARγ и усиливает транскрипционную активность PPARγ [36].

Помимо эффектов на экспрессию гена адипонектина, агонисты PPARγ могут увеличивать продукцию и / или секрецию адипонектина за счет изменения экспрессии шаперона ER [52] — [54].Шапероны ER, включая ERp44 и DsbA-L, важны для мультимеризации адипонектина [38], тогда как Ero-1Lα способствует высвобождению адипонектина из адипоцитов [54]. Поэтому мы исследовали, изменялась ли экспрессия ER шаперона краткосрочным введением ниацина, и обнаружили, что на экспрессию генов ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L лечение ниацином не повлияло. Следовательно, не похоже, что ниацин увеличивает выработку адипонектина посредством какого-либо из известных в настоящее время механизмов регуляции адипонектина, которые мы исследовали.

Способность ниацина увеличивать адипонектин может быть лишь одним из множества противовоспалительных эффектов ниацина в жировой ткани или может быть фактором, способствующим прямым противовоспалительным свойствам ниацина. Адипонектин обладает противовоспалительными свойствами, в том числе способствует поляризации макрофагов от фенотипа M1 к фенотипу M2 [55]. Лечение адипонектином увеличивает экспрессию генов и белков аргиназы-1, Mgl-1 и IL-10 и снижает экспрессию TNF-α и MCP-1 в изолированных перитонеальных макрофагах мыши [55].Кроме того, адипонектин подавляет активность NF-κB, фактора ядерной транскрипции, участвующего в воспалении жировой ткани, вызванном ожирением [56].

В текущем исследовании мы показали, что введение ниацина улучшает воспалительное состояние жировой ткани за счет изменения содержания цитокинов и макрофагов в жировой ткани. Ниацин ослаблял индуцированное HFD увеличение MCP-1, IL-1β и CD11c, генов, связанных с воспалительными макрофагами M1. Мы предполагаем, что, поскольку экспрессия в жировой ткани общего маркера макрофагов CD68 не изменялась ниацином, несмотря на снижение экспрессии CD11c, лечение ниацином способствовало сдвигу поляризации макрофагов от M1 к фенотипу M2.Профиль макрофагов в жировой ткани важен, поскольку повышенное присутствие макрофагов M1 в жировой ткани связано с инсулинорезистентностью, связанной с ожирением [57].

Макрофаги M2 существуют вдоль континуума и экспрессируют различные маркеры в зависимости от воздействия микросреды жировой ткани. В ответ на кормление HFD, хотя наблюдается явное увеличение маркеров макрофагов M1, во многих случаях также наблюдается увеличение маркеров M2 [28], [58], как мы продемонстрировали с помощью IL-10, аргиназы-1, MRC- 1 и Ym1.Интересно, что ниацин не увеличивал дополнительно экспрессию маркеров M2, как мы предполагали. Другие показали, что HFD увеличивает экспрессию в жировой ткани маркеров M2 аргиназы-1, Ym1 и IL-10 и что сенсибилизирующая к инсулину жирная кислота омега-3, DHA, дополнительно увеличивает эти маркеры M2 [59]. Опосредованное DHA увеличение аргиназы-1, Ym1 и IL-10 происходило в стромальной сосудистой фракции, а не во фракции адипоцитов жировой ткани [59]. Хотя мы также продемонстрировали индуцированное HFD увеличение маркеров M2 аргиназы-1, Ym1 и IL-10, мы обнаружили, что ниацин снижает экспрессию аргиназы-1 и не влияет на экспрессию Ym1 и IL-10 в жировой ткани.Поскольку многие из исследованных нами цитокинов продуцируются как адипоцитами, так и макрофагами (МСР-1, TNF-α, IL-10, IL-1β), в будущем будет важно отделить стромальную сосудистую фракцию от фракции адипоцитов для определить влияние ниацина на каждый из этих типов клеток. Также важно отметить, что два основных места экспрессии рецептора ниацина находятся на адипоцитах и ​​иммунных клетках, включая макрофаги, что еще раз демонстрирует важность изучения возможных дифференциальных эффектов ниацина на эти два типа клеток, широко присутствующих в жировой ткани.Первоначально мы были удивлены, что ниацин снижает экспрессию маркеров, связанных как с провоспалительными макрофагами M1 (CD11c, MCP-1, IL-1β), так и с противовоспалительными M2 (аргиназа-1 и MRC-1). Повышенная продукция адипоцитами MCP-1, свободных жирных кислот, мертвых и умирающих адипоцитов, гипоксия, окислительный стресс и стресс ER были идентифицированы как факторы, способствующие инфильтрации макрофагов в жировую ткань [60]. Известно, что свободные жирные кислоты направляют макрофаги M1 и M2 в жировую ткань.Повышенное количество местных и системных свободных жирных кислот в результате липолиза адипоцитов во время потери веса вызывает рекрутирование макрофагов в жировую ткань [61]. Поскольку ниацин является известным ингибитором липолиза адипоцитов, уменьшение количества свободных жирных кислот в сыворотке крови из адипоцитов может потенциально ингибировать рекрутирование макрофагов M1 и M2 в жировую ткань.

Рецептор ниацина в основном экспрессируется в адипоцитах и ​​иммунных клетках, включая макрофаги. Интересно, что экспрессия рецептора ниацина на макрофагах увеличивается при лечении провоспалительными стимулами, включая TNF-α, интерферон γ или LPS [62].Неизвестно, экспрессируется ли рецептор ниацина в резидентных противовоспалительных макрофагах M2, присутствующих в жировой ткани худых людей. В текущем исследовании мы продемонстрировали противовоспалительные эффекты ниацина только у мышей WT, получавших HFD, которые демонстрируют повышенное присутствие провоспалительных макрофагов M1 в жировой ткани. Возможно, причина, по которой мы не наблюдали противовоспалительного действия ниацина у худых мышей, заключается в том, что ниацин оказывает свое противовоспалительное действие посредством прямого связывания со своим рецептором на адипоцитах и ​​макрофагах M1, которые поляризованы в воспалительное состояние. которые отсутствуют в жировой ткани худых людей.

Интересно, что были продемонстрированы положительные эффекты ниацина на биологию адипоцитов [13]. Например, адипоциты, выделенные у людей, получавших ниацин, имели меньшие средний и максимальный диаметр и объем по сравнению с контрольными субъектами [13]. Кроме того, в этих адипоцитах улучшилась чувствительность к инсулину. Хотя мы не изучали чувствительность к инсулину у наших мышей, есть доказательства того, что лечение ниацином улучшает чувствительность к инсулину в адипоцитах, и наши результаты предполагают, что это может быть связано с уменьшением воспаления жировой ткани.Однако клинически было продемонстрировано, что ниацин повышает уровень глюкозы в крови у пациентов с диабетом и без диабета [3], поэтому влияние ниацина на чувствительность адипоцитов к инсулину, вероятно, не способствует улучшению чувствительности к инсулину всего тела.

Таким образом, результаты текущего исследования показывают, что ниацин снижает воспаление жировой ткани за счет снижения содержания провоспалительных цитокинов, хемокинов и макрофагов, а также за счет повышения концентрации адипонектина в сыворотке и жировой ткани.Однако, чтобы полностью выяснить влияние ниацина на воспаление жировой ткани, необходимы количественные исследования с использованием сортировки клеток, активируемых флуоресценцией, для определения количества и типа макрофагов, присутствующих в жировой ткани. Повышение уровня адипонектина происходило независимо от изменений в экспрессии ключевых факторов транскрипции и шаперонов ER, участвующих в продукции адипонектина. Эти данные подтверждают идею о плейотропных эффектах ниацина для улучшения метаболических параметров в тканях-мишенях, а именно в жировой ткани.Кроме того, все эти противовоспалительные эффекты ниацина были потеряны у мышей с нокаутом рецепторов ниацина. Это согласуется с предыдущими сообщениями о том, что рецептор ниацина необходим для опосредования противовоспалительных свойств ниацина [14], [17], [41]. Кроме того, важно отметить, что положительные эффекты ниацина, наблюдаемые у мышей, получавших HFD, не проявлялись у худых мышей WT. Эти данные свидетельствуют о том, что плейотропное действие ниацина наиболее выражено при метаболической дисфункции, вызванной ожирением.

Ниацин увеличивает уровень адипонектина и уменьшает воспаление жировой ткани у мышей с высоким содержанием жиров

Введение

Заболеваемость ожирением в США за последние 30 лет достигла масштабов эпидемии. Ожирение связано с повышенным риском метаболических и сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), при этом ССЗ являются одной из ведущих причин заболеваемости и смертности в США [1]. Повышенный липолиз жировой ткани и повышенное содержание неэтерифицированных жирных кислот (NEFA) в сыворотке — характерные черты ожирения, которые часто приводят к развитию атерогенной дислипидемии.Атерогенная дислипидемия — это совокупность метаболических нарушений, характеризующихся умеренно повышенным холестерином липопротеидов низкой плотности (ХС-ЛПНП; 130–159 мг / дл) и триглицеридами (ТГ;> 150 мг / дл), небольшими частицами ЛПНП и липопротеинами низкой плотности. холестерин (ХС-ЛПВП; <35 мг / дл) [2]. Ниацин, применяемый в клинических условиях в качестве монотерапии, является эффективным фармакологическим вмешательством для лечения атерогенной дислипидемии из-за его способности уменьшать толщину интимы сонной артерии, улучшать функцию эндотелия и снижать заболеваемость и смертность от сердечно-сосудистых заболеваний, предположительно за счет улучшения липидных и липопротеиновых характеристик крови.Наряду с умеренным снижением концентрации циркулирующих липопротеинов очень низкой плотности (VLDL), LDL-C, TG и липопротеинов (a), ниацин является эффективным фармакологическим инструментом для повышения концентрации HDL-C [3] - [6].

Улучшение метаболизма липидов в крови, производимое ниацином, в значительной степени связано с его хорошо задокументированными эффектами на липолиз жировой ткани и синтез триглицеридов в печени [7]. Ниацин подавляет липолиз за счет активации рецептора ниацина (HCA 2 ) в жировой ткани, который временно ингибирует цАМФ / PKA и снижает гидролиз триглицеридов и концентрацию NEFA в сыворотке [8].Однако недавно было продемонстрировано, что действие ниацина на липиды не зависит от рецептора ниацина и подавления свободных жирных кислот [9].

Становится все более очевидным, что ниацин обладает плейотропными свойствами в дополнение к его известным терапевтическим эффектам на метаболизм липидов. Данные нашей и других групп указывают на то, что ниацин резко увеличивает сывороточные концентрации адипокина, адипонектина у мужчин с ожирением и метаболическим синдромом [10], [11]. Кроме того, однократная доза ниацина, вводимая перорально или внутрибрюшинно, резко увеличивает концентрацию адипонектина в сыворотке крови у крыс и мышей в течение нескольких минут, и этот эффект зависит от активации рецептора ниацина [12].Другие показали, что лечение ниацином приводит к увеличению мРНК адипонектина [13], [14]. Снижение концентрации циркулирующего адипонектина — один из наиболее многообещающих биомаркеров метаболического синдрома и сердечно-сосудистых заболеваний. Адипонектин обладает инсулино-сенсибилизирующими, антиатеросклеротическими и противовоспалительными свойствами; поэтому, по крайней мере, некоторые из полезных для здоровья свойств ниацина могут быть связаны с повышением концентрации адипонектина в сыворотке крови.

Совсем недавно исследования показали, что ниацин оказывает противовоспалительное действие в ряде тканей, включая почки [15], легкие [16], адипоциты 3T3-L1 [14], моноциты [17], пигментные эпителиальные клетки сетчатки [18]. ] и эндотелиальные клетки сосудов [19], [20].Было показано, что введение ниацина снижает экспрессию MCP-1, TNF-α и IL-6 и активацию NF-κB в почках и легких на моделях грызунов [15], [16]. Кроме того, лечение ниацином снижает индуцированное TNF-α увеличение экспрессии генов и секреции провоспалительных хемокинов MCP-1, фракталкина и RANTES и увеличивает мРНК адипонектина в адипоцитах 3T3-L1 [14]. Лечение ниацином подавляет сигнальный путь NF-κB, что приводит к снижению секреции провоспалительных цитокинов и хемокинов TNF-α, IL-6 и MCP-1 в изолированных моноцитах человека и пигментных эпителиальных клетках сетчатки [18], [21].Было продемонстрировано, что ниацин подавляет воспаление сосудов, уменьшая продукцию активных форм кислорода эндотелием и продукцию воспалительных цитокинов [22]. Системно ниацин снижает уровень С-реактивного белка и TNF-α, а также уменьшает воспаление печени за счет уменьшения содержания макрофагов в печени [23], [24]. Ниацин также подавляет хемотаксис моноцитов [14]. Многие из этих противовоспалительных свойств ниацина были связаны с активацией рецептора ниацина [17], [18].

Ожирение связано со снижением концентрации адипонектина в плазме и хроническим воспалением легкой степени, характеризующимся повышенной экспрессией в жировой ткани провоспалительных хемокинов и цитокинов, таких как MCP-1 [25] и TNF-α [26], а также инфильтрацией. макрофагов M1 (провоспалительных) [27], [28].Таким образом, цель настоящего исследования состояла в том, чтобы определить влияние приема ниацина на воспаление жировой ткани, вызванное ожирением, через изменения цитокинового профиля и инфильтрацию жира макрофагами, с особым акцентом на роли адипонектина.

Материалы и методы

Материалы

Ниацин (никотиновая кислота) был приобретен у Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури). Поликлональный адипонектин кролика и антитела к GAPDH были получены от Abcam, Inc.(Кембридж, Массачусетс).

Исследования на животных

Тридцать две самцы мышей C57BL / 6 в возрасте 3-4 недель были приобретены в Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Мышей помещали либо на контрольную диету (10% ккал в виде жира; n = 16), либо на диету с высоким содержанием жиров (HFD; 60% ккал в виде жира; n = 16), полученную от Research Diets (Нью-Брансуик, штат Нью-Джерси), в течение 11 недель. . Через шесть недель на контрольной диете или диете с высоким содержанием жиров половина мышей из каждой группы получала ниацин (приблизительно 200 мг / кг / день), растворенный в питьевой воде или носителе (воде), в течение четырех недель.Концентрация ниацина была увеличена примерно до 360 мг / кг / день на пятой неделе лечения. После пяти недель лечения носителем или ниацином мышей голодали в течение ночи (12 ч) и умерщвляли декапитацией. Цельную кровь собирали и обрабатывали для выделения сыворотки, а ткани мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C до анализа.

Параллельные исследования были проведены на самцах глобальных мышей HCA 2 — / — (рецептор ниацина). Тринадцать мышей HCA 2 — / — помещали на контрольную диету (7 получали носитель; 6 получали ниацин), а девять мышей HCA 2 — / — помещали на диету с высоким содержанием жиров (4 получали наполнитель). ; 5 человек получали ниацин).Исходные пары мышей HCA 2 — / — были щедрым подарком от доктора Стефана Офферманса (Бад Наухайм, Германия). Все исследования на животных были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных Обернского университета до их начала, и были предприняты максимальные меры для сведения к минимуму страданий животных.

Анализ сыворотки

Концентрации общего адипонектина и инсулина в сыворотке измеряли с использованием наборов для ELISA от Millipore (Темекула, Калифорния). Концентрации высокомолекулярного (HMW) адипонектина в сыворотке измеряли с использованием набора для ELISA от Alpco Diagnostics (Салем, штат Нью-Хэмпшир).Концентрации глюкозы и триглицеридов в сыворотке измеряли с помощью наборов от Cayman Chemicals (Анн-Арбор, Мичиган). NEFA в сыворотке измеряли с помощью набора от Wako Chemicals (Ричмонд, Вирджиния).

ПЦР в реальном времени

РНК

выделяли из эпидидимальной белой жировой ткани (EWAT) с использованием набора Qiagen RNeasy Lipid Tissue Mini (Валенсия, Калифорния). РНК (0,5 или 1 мкг) подвергали обратной транскрипции в кДНК с использованием набора для синтеза кДНК iScript от Bio-Rad. Праймеры для ПЦР, используемые в анализе ПЦР в реальном времени, перечислены в.Анализы выполняли на термоциклере Bio-Rad iCycler iQ. Образцы анализировали в реакционной смеси по 30 мкл с использованием SYBR Green PCR Master Mix (Bio-Rad). Все уровни экспрессии были нормализованы до соответствующих уровней мРНК 36B4 и проанализированы с использованием метода 2 -ΔΔCT . Уровни 36B4 не изменились в ответ на лечение HFD или ниацином.

Таблица 1

Праймеры, используемые для ОТ-ПЦР в реальном времени.

Ген Прямой праймер 5′-3 ‘ Обратный праймер 5′-3′
Адипонектин GGAGAGCCTGGAGAAGCC ATGTGGTAAGAGAAGTAGTAGAGTC
PPARγ TTATGGAGCCTAAGTTTGAGTTTG AGCAGGTTGTCTTGGATGTC
C / EBPα GTGGAGACGCAACAGAAGG CAGCGACCCGAAACCATC
СРЭБП-1с AACCTCATCCGCCACCTG GTAGACAACAGCCGCATCC
ERp44 CAGTCCACGAGATTCAGAGTC AGAAAGGAAGGCACAGTCATC
Ero1-Lα TGGAGCCGTGGATGAGTC CCTTGTAGCCTGTGTAGCG
DSBA-L ATCACGGAGTATCAGAGCATTC GCAACAGTGGTGGGTAGC
МКП-1 GCATCTGCCCTAAGGTCTTC CACTGTCACACTGGTCACTC
CD68 AGGCTACAGGCTGCTCAG GGGCTGGTAGGTTGATTGTC
CD11c GGAGCAGGTGGCATTGTG GAGCGATGTCCTGTCTTGAG
ИЛ-1β GCAGCAGCACATCAACAAG GTTCATCTCGGAGCCTGTAG
TNF-α CGTGGAACTGGCAGAAGAG GTAGACAGAAGAGCGTGGTG
Ил-6 AGCCAGAGTCCTTCAGAGAG GATGGTCTTGGTCCTTAGCC
Ил-10 GCAGTGGAGCAGGTGAAG CGGAGAGAGGTACAAACGAG
Аргиназа-1 TTGGCTTGCTTCGGAACTC GGAGGAGAAGGCGTTTGC
Ym1 GCCCACCAGGAAAGTACAC CTTGAGCCACTGAGCCTTC
MRC-1 ATTGTGGAGCAGATGGAAGG GTCGTAGTCAGTGGTGGTTC
36B4 CACTGCTGAACATGCTGAAC CCACAGACAATGCCAGGAC

Иммуноблот-анализ

Подушечки EWAT (~ 100 мг) гомогенизировали с помощью портативного гомогенизатора в буфере RIPA [NP40 (1%), дезоксихолат натрия (24.1 мМ), SDS (0,05%), NaCl (0,81%), Трис (25 мМ, pH 6,8), EDTA (1 мМ) с добавлением ингибиторов протеаз и фосфатаз] и белковые фракции эпидидимального жира. Затем на образцах был проведен анализ белка DC (Bio-Rad) для определения концентрации белка в каждом образце. Белки (9 мкг) разделяли с помощью SDS-PAGE (10%) и переносили на PVDF-мембраны. Мембраны блокировали в 5% обезжиренном сухом молоке в течение 1 часа и инкубировали с первичным антителом в течение 2,75 часа. Мембраны промывали TBS / 0.1% Tween-20 трижды и инкубировали со вторичным антителом в течение одного часа, затем трижды промывали TBS / 0,1% Tween-20. Кляксы проявляли с использованием пленочного процессора Kodak XOMAT 1000A (Рочестер, штат Нью-Йорк).

Статистический анализ

Данные анализировали с использованием факторного дисперсионного анализа 2x2x2, а регрессионный анализ выполняли с использованием программного обеспечения JMP (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина). Значимость была установлена ​​априори при P <0,05. Графики были созданы с использованием программного обеспечения GraphPad Prism версии 4.0 (программное обеспечение GraphPad, Ла-Хойя, Калифорния).

Результаты

Влияние HFD и ниацина на метаболические параметры у мышей

HFD увеличило массу тела, вес эпидидимальных жировых подушечек, сывороточные концентрации глюкозы и инсулина как у WT, так и у HCA 2 — / — мышей (). Ниацин не влиял на вес эпидидимальной жировой прослойки, концентрацию глюкозы в сыворотке и концентрации инсулина (). Интересно, что ниацин имел тенденцию повышать концентрацию глюкозы в сыворотке у худых мышей WT и HCA 2 — / — , хотя это не достигло статистической значимости.Известно, что ниацин подавляет высвобождение свободных жирных кислот из адипоцитов, что приводит к временному снижению циркулирующих NEFA [29], [30]. В текущем исследовании ниацин снижал концентрацию NEFA в сыворотке у мышей WT только на контрольной диете, но неожиданно не приводил к снижению уровня триглицеридов в сыворотке ().

Таблица 2

Влияние HFD и ниацина на метаболические параметры у мышей.

Контрольная диета Кузов Вес (г) 32.1 ± 1,1 33,3 ± 1,1 45,1 ± 0,8 а 40,9 ± 1,9 29,5 ± 1,1 31,5 ± 0,9 38,7 ± 1,0 а 38,1 ± 2,5
Эпидидимальный жир Пад Вес (г) 1,1 ± 0,1 1,2 ± 0,1 2,0 ± 0,2 a 2,0 ± 0,2 1,0 ± 0,2 1,3 ± 0,1 2,9 ± 0,3 a 2,5 ± 0,2
Глюкоза (мг / дл) 149.5 ± 9,8 192,9 ± 16,5 249,2 ± 15,8 a 235,7 ± 18,4 157,4 ± 19,2 204,7 ± 8,7 247,5 ± 10,8 a 239,7 ± 23,4
Инсулин (нг / мл) 0,78 ± 0,3 0,81 ± 0,1 3,5 ± 0,5 a 2,5 ± 0,8 1,06 ± 0,4 1,57 ± 0,1 2,91 ± 0,4 a 2,90 ± 0,8
HOMA-IR 0.73 ± 0,29 0,94 ± 0,17 5,42 ± 0,96 a 3,93 ± 1,30 1,28 ± 0,68 1,98 ± 0,19 4,35 ± 0,44 a 4,61 ± 1,41
Триглицериды (мг / дл) 77,4 ± 5,3 83,4 ± 2,6 88,4 ± 4,7 99,9 ± 6,4 68,3 ± 2,4 89,2 ± 6,5 80,4 ± 2,0 89,4 ± 3,0
NEFA (мМоль) 1.2 ± 0,1 0,84 ± 0,1 * 0,82 ± 0,0 0,75 ± 0,1 0,83 ± 0,07 0,85 ± 0,08 0,56 ± 0,02 0,67 ± 0,05
Адипонектин (мкг / мл) 14,4 ± 1,0 14,4 ± 0,6 14,1 ± 0,7 17,1 ± 0,8 * 11,7 ± 0,5 12,2 ± 0,6 14,1 ± 0,8 15,2 ± 1,4
HMW Адипонектин (мкг / мл) 4.2 ± 0,5 3,5 ± 0,4 4,6 ± 0,4 6,3 ± 1,0 3,0 ± 0,3 3,7 ± 0,3 5,2 ± 0,3 a 5,7 ± 0,4

Ниацин Повышает антибиотик -воспалительный адипокин, адипонектин

Мы и другие ранее продемонстрировали, что лечение ниацином увеличивает концентрацию адипонектина в сыворотке [10], [31]. Адипонектин — это адипокин, секретируемый преимущественно из жировой ткани, обладающий противовоспалительным, сенсибилизирующим к инсулину и кардиозащитным действием.В текущем исследовании мы обнаружили, что лечение ниацином увеличивало концентрацию адипонектина в сыворотке у мышей WT на HFD на 21%, но не имело эффекта у мышей WT на контрольной диете () или у мышей HCA 2 — / — на контрольной группе. или HFD (). Увеличение общего адипонектина было частично объяснено тенденцией лечения ниацином к увеличению высокомолекулярного адипонектина у мышей WT, получавших HFD (4,6 ± 0,4 против 6,3 ± 1,0 мкг / мл).

Затем мы исследовали местную продукцию адипонектина в придатковой жировой ткани и обнаружили, что мыши WT и HCA 2 — / — на HFD имели значительно сниженную экспрессию гена адипонектина ().Ниацин увеличивал экспрессию гена адипонектина у мышей WT на HFD на 124%. (). Повышение экспрессии гена адипонектина не наблюдалось у мышей HCA 2 — / — , что указывает на то, что ниацин увеличивает экспрессию гена адипонектина в зависимости от HCA 2 — / — и что в результате происходит увеличение концентраций в сыворотке. от увеличения экспрессии генов.

Влияние HFD и ниацина на экспрессию гена адипонектина.

Экспрессия гена адипонектина в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B).Значения адипонектина были нормализованы до 36B4. *** P <0,001 по сравнению с мышами, получавшими контрольную диету-носитель; * P <0,05 по сравнению с мышами, получавшими носитель на диете с высоким содержанием жиров. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

В соответствии с данными по экспрессии гена адипонектина, экспрессия белка адипонектина в жировых подушечках придатка яичка была резко снижена у мышей WT на HFD ().Ниацин увеличивал экспрессию белка адипонектина у мышей WT на HFD (), но не оказывал влияния на мышей на контрольной диете (). Интересно, что мыши HCA 2 — / — оказались защищены от индуцированного HFD снижения экспрессии белка адипонектина EWAT (). Кроме того, ниацин не влиял на экспрессию белка адипонектина в EWAT мышей HCA 2 — / — в контроле () или HFD ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию белка адипонектина.

Экспрессия белка адипонектина в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B). 9 мкг белка разделяли с помощью SDS-PAGE и анализировали с помощью анализа иммуноблоттинга.

Ниацин-опосредованное увеличение адипонектина происходит независимо от изменений в экспрессии генов транскрипционных факторов или ER-шаперонов в жировой ткани, участвующих в продукции адипонектина

Клеточные и секретируемые уровни адипонектина можно регулировать на уровне транскрипции.Промотор адипонектина содержит сайты связывания для нескольких факторов транскрипции, которые, как было показано, положительно регулируют транскрипцию гена адипонектина, включая рецептор γ, активируемый пролифератором пероксисом (PPARγ) [32], CCAAT / связывающий энхансер белок α (C / EBPα) [33], и белок-1c, связывающий регуляторный элемент стерола (SREBP-1c) [34], [35]. Недавние исследования показали, что ниацин увеличивает активность и экспрессию PPARγ [36] и увеличивает экспрессию C / EBPα в жировой ткани [13]. Поскольку мы продемонстрировали, что ниацин увеличивает экспрессию гена адипонектина в придатном слое жира мышей дикого типа, получавших HFD, мы исследовали влияние ниацина на эти факторы транскрипции.

Экспрессия гена PPARγ была снижена в эпидидимальном жире мышей WT на HFD. Однако ниацин не влиял на экспрессию гена PPARγ у мышей WT (). Неожиданно ниацин увеличил экспрессию гена PPARγ у худых мышей HCA 2 — / — на 39% (). Экспрессия гена C / EBPα была значительно снижена в EWAT мышей WT, получавших HFD (), однако ниацин не влиял на экспрессию гена C / EBPα ни в одной группе мышей (). Промотор адипонектина трансактивируется SREBP-1c, при этом сверхэкспрессия SREBP-1c в адипоцитах 3T3-L1 увеличивает экспрессию гена адипонектина и белка [37].Мы обнаружили, что на экспрессию гена SREBP-1c в жировой ткани не повлияла диета или лечение ниацином во всех группах мышей ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию генов факторов транскрипции. Экспрессия гена

PPARγ в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B). Экспрессия гена C / EBPα в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D). Экспрессия гена SREBP-1c в EWAT мышей дикого типа (E) или мышей HCA 2 — / — (F).Все значения были нормализованы до 36B4. * P <0,05, ** P <0,01 по сравнению с мышами на контрольной диете, получавшими носитель. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Известно, что шапероны ER ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L участвуют в продукции и секреции адипонектина [38]. Чтобы изучить дополнительный механизм, с помощью которого ниацин может увеличивать концентрацию адипонектина в сыворотке, мы исследовали экспрессию генов ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L в жировой ткани придатка яичка.На ERp44 и Ero1-Lα не было значительного влияния диеты или лечения ниацином у мышей WT или HCA 2 — / — (). Экспрессия DsbA-L в жировой ткани мышей дикого типа была значительно снижена HFD, а ниацин имел тенденцию увеличивать его экспрессию в этой группе мышей, но не значительно ().

Влияние HFD и ниацина на экспрессию генов шаперонов ER.

Экспрессия гена ERp44 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), Экспрессия гена Ero1-Lα в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D) и экспрессия гена DsbA-L в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4. ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Ниацин ослабляет вызванное HFD воспаление жировой ткани рецепторно-зависимым образом

Противовоспалительное действие ниацина было продемонстрировано во многих тканях, включая почки [15], легкие [16], линии культур клеток адипоцитов [14], моноциты [17], сосудистые эндотелиальные клетки [19], [20] и пигментные эпителиальные клетки сетчатки [18].Однако до настоящего времени не проводились исследования противовоспалительных свойств ниацина в жировой ткани in vivo . Поэтому мы исследовали влияние ниацина на воспаление жировой ткани, включая экспрессию цитокинов, участвующих в воспалении и инфильтрации макрофагов. Как и ожидалось, HFD значительно увеличивал экспрессию гена MCP-1 в жировой ткани мышей WT и HCA 2 — / — (). Ниацин снижал экспрессию MCP-1 в жировой ткани мышей WT, получавших HFD, но не в любой другой группе мышей (), демонстрируя новые противовоспалительные эффекты ниацина в жировой ткани.Поскольку MCP-1 играет главную роль в привлечении моноцитов и макрофагов в жировую ткань, мы исследовали экспрессию общего маркера моноцитов и макрофагов, CD68. Как и ожидалось, HFD значительно увеличивал экспрессию CD68 в жировой ткани, предполагая повышенное присутствие макрофагов в EWAT (). Однако ниацин не влиял на экспрессию CD68. Эти результаты предполагают, что вместо изменения количества макрофагов, присутствующих в жировой ткани, ниацин может способствовать сдвигу поляризации макрофагов от M1 (провоспалительного) фенотипа макрофагов к M2 (противовоспалительному) фенотипу.Чтобы решить эту проблему, мы исследовали экспрессию в жировой ткани CD11c, маркера дендритных клеток, высоко экспрессируемого на провоспалительных макрофагах M1, а не на противовоспалительных макрофагах M2. HFD значительно увеличивал экспрессию CD11c в жировой ткани, что указывает на присутствие воспалительных макрофагов, а лечение ниацином значительно снижало экспрессию CD11c в жире мышей WT, получавших HFD ().

Влияние HFD и ниацина на маркеры воспаления жировой ткани.

Экспрессия гена MCP-1 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена CD68 в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D), И экспрессия гена CD11c в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01, *** P <0,001. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

При дальнейшем исследовании экспрессии цитокинов в жире мы продемонстрировали, что HFD увеличивает экспрессию генов провоспалительных цитокинов IL-1β и TNF-α в EWAT мышей WT и HCA 2 — / — . Ниацин значительно снижал экспрессию IL-1β в жире мышей WT, получавших HFD ().Это важно, потому что IL-1β связан с патогенезом инсулинорезистентности [39]. IL-1β также высоко экспрессируется в воспалительных макрофагах. Снижение уровня IL-1β может указывать на способность ниацина уменьшать присутствие макрофагов M1 в жировой ткани. Не было эффекта ниацина на экспрессию TNF-α у мышей WT или HCA 2 — / — (), и не было эффекта HFD или ниацина на экспрессию IL-6 (). IL-10 представляет собой противовоспалительный цитокин, связанный с макрофагами спектра M2.Его экспрессия была значительно увеличена в EWAT мышей дикого типа и HCA 2 — / — на HFD, и ниацин не влиял на экспрессию IL-10 ни в одной из групп мышей ().

Влияние HFD и ниацина на маркеры воспаления жировой ткани.

Экспрессия гена IL-1β в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена TNF-α в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D) и экспрессия гена IL-6 в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Влияние HFD и ниацина на маркеры макрофагов M2.

Экспрессия гена IL-10 в EWAT мышей дикого типа (A) или HCA 2 — / — мышей (B), экспрессия гена аргиназы-1 в EWAT мышей дикого типа (C) или HCA 2 — / — мышей (D), экспрессия гена Ym1 в EWAT мышей дикого типа (E) или HCA 2 — / — мышей (F) и экспрессия гена MRC-1 в EWAT дикого типа -типа (G) или мышей HCA 2 — / — (H).Все значения были нормализованы до 36B4; * P <0,05, ** P <0,01. Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего и выражены относительно контрольной группы, равной единице. AU , усл. Ед.

Чтобы определить, опосредованы ли противовоспалительные эффекты ниацина в жировой ткани за счет уменьшения присутствия M1 и увеличения присутствия макрофагов M2, мы исследовали экспрессию маркеров макрофагов M2 в жире. HFD увеличил экспрессию в жировой ткани аргиназы-1, Ym1 и MRC-1, генов, которые высоко экспрессируются в макрофагах M2 (), и неожиданно лечение ниацином снизило экспрессию генов аргиназы-1 и MRC-1 в EWAT диких животных, которых кормили HFD. -типа, но не влиял на Ym1.CD163, маркер макрофагов М2, не подвергался влиянию диеты или лечения ниацином в любой группе мышей (данные не показаны).

Обсуждение

В настоящее время признано, что ниацин обладает сосудистыми антиоксидантными и противовоспалительными свойствами, которые могут способствовать улучшению сердечно-сосудистых исходов, независимо от изменений липидного профиля крови [40]. Фактически, Ganji et al. продемонстрировал, что ниацин непосредственно снижает продукцию активных форм кислорода эндотелием и последующее окисление ЛПНП в культивируемых эндотелиальных клетках аорты человека [22].Другие показали, что ниацин снижает экспрессию или высвобождение провоспалительных медиаторов, таких как CRP, TNF-α и MCP-1 [14], [17], [23]. Лукасова и др. продемонстрировал, что ниацин ингибирует прогрессирование атеросклеротического заболевания без изменения общего холестерина, холестерина ЛПВП или ТГ через 10 недель у мышей с нулевым рецептором ЛПНП [41]. Авторы также продемонстрировали, что ниацин ингибирует MCP-1-индуцированное рекрутирование макрофагов в атеросклеротические бляшки. Мы и другие продемонстрировали способность ниацина увеличивать продукцию адипоцитов и концентрацию противовоспалительного цитокина адипонектина в крови [10], [12], [14], [31].Эти противовоспалительные, липидно-независимые эффекты ниацина могут объяснить некоторые полезные свойства ниацина для здоровья при неизменном липидном профиле крови.

Адипоциты продуцируют ряд адипокинов, которые вносят как положительный, так и отрицательный вклад в системный воспалительный процесс. В жировой ткани худых людей адипоциты поддерживают, как правило, невоспалительный цитокиновый профиль. Однако при ожирении адипоциты гипертрофируются, чтобы накапливать избыток триглицеридов, и эта гипертрофия связана с нарушением регуляции секреции адипокинов [42].Гипертрофированные адипоциты вырабатывают меньше противовоспалительных адипокинов, включая адипонектин, и вырабатывают больше провоспалительных цитокинов, таких как TNF-α, что способствует хроническому воспалению, наблюдаемому при ожирении [43], [44]. Механизмы, лежащие в основе индуцированного HFD снижения выработки адипонектина, включают изменение гормональной среды [42], [45], [46], окислительный стресс [47] и воспаление. Воспаление жировой ткани характеризуется повышенной экспрессией воспалительных цитокинов TNF-α и IL-6.TNF-α оказывает ингибирующее действие на экспрессию адипонектина за счет подавления его промоторной активности [48], а также было показано, что IL-6 ингибирует экспрессию адипонектина в адипоцитах [49]. Из исследований, которые продемонстрировали, что хроническое введение ниацина увеличивает уровень адипонектина в сыворотке, только одно выяснило возможные механизмы, с помощью которых это происходит [13]. Linke et al. показали, что шесть месяцев приема ниацина с пролонгированным высвобождением повышают концентрацию адипонектина в сыворотке на 35%, и это сопровождалось 4-кратным увеличением экспрессии мРНК адипонектина в подкожной жировой ткани людей с нарушенной толерантностью к глюкозе [13].Кроме того, Linke et al. продемонстрировал, что экспрессия мРНК PPARγ и C / EBPα также увеличивается в 1,6 и 1,5 раза, соответственно, в группе, получавшей ниацин. Мы не показали влияния ниацина на экспрессию генов PPARγ или C / EBPα в эпидидимальном жире мышей WT. Однако это не исключает участия PPARγ в способности ниацина повышать уровень адипонектина. Исследование активности или транслокации PPARγ в ядро ​​может иметь важное значение для дальнейшего изучения роли PPARγ в механизме действия ниацина.Хотя мы показали, что увеличение мРНК адипонектина и сывороточных концентраций не было результатом повышенной экспрессии гена PPARγ, другие показали, что in vitro , ниацин увеличивает экспрессию мРНК PPARγ [50], [51], индуцирует ядерную экспрессию белка PPARγ и усиливает транскрипционную активность PPARγ [36].

Помимо эффектов на экспрессию гена адипонектина, агонисты PPARγ могут увеличивать продукцию и / или секрецию адипонектина за счет изменения экспрессии шаперона ER [52] — [54].Шапероны ER, включая ERp44 и DsbA-L, важны для мультимеризации адипонектина [38], тогда как Ero-1Lα способствует высвобождению адипонектина из адипоцитов [54]. Поэтому мы исследовали, изменялась ли экспрессия ER шаперона краткосрочным введением ниацина, и обнаружили, что на экспрессию генов ERp44, Ero1-Lα и DsbA-L лечение ниацином не повлияло. Следовательно, не похоже, что ниацин увеличивает выработку адипонектина посредством какого-либо из известных в настоящее время механизмов регуляции адипонектина, которые мы исследовали.

Способность ниацина увеличивать адипонектин может быть лишь одним из множества противовоспалительных эффектов ниацина в жировой ткани или может быть фактором, способствующим прямым противовоспалительным свойствам ниацина. Адипонектин обладает противовоспалительными свойствами, в том числе способствует поляризации макрофагов от фенотипа M1 к фенотипу M2 [55]. Лечение адипонектином увеличивает экспрессию генов и белков аргиназы-1, Mgl-1 и IL-10 и снижает экспрессию TNF-α и MCP-1 в изолированных перитонеальных макрофагах мыши [55].Кроме того, адипонектин подавляет активность NF-κB, фактора ядерной транскрипции, участвующего в воспалении жировой ткани, вызванном ожирением [56].

В текущем исследовании мы показали, что введение ниацина улучшает воспалительное состояние жировой ткани за счет изменения содержания цитокинов и макрофагов в жировой ткани. Ниацин ослаблял индуцированное HFD увеличение MCP-1, IL-1β и CD11c, генов, связанных с воспалительными макрофагами M1. Мы предполагаем, что, поскольку экспрессия в жировой ткани общего маркера макрофагов CD68 не изменялась ниацином, несмотря на снижение экспрессии CD11c, лечение ниацином способствовало сдвигу поляризации макрофагов от M1 к фенотипу M2.Профиль макрофагов в жировой ткани важен, поскольку повышенное присутствие макрофагов M1 в жировой ткани связано с инсулинорезистентностью, связанной с ожирением [57].

Макрофаги M2 существуют вдоль континуума и экспрессируют различные маркеры в зависимости от воздействия микросреды жировой ткани. В ответ на кормление HFD, хотя наблюдается явное увеличение маркеров макрофагов M1, во многих случаях также наблюдается увеличение маркеров M2 [28], [58], как мы продемонстрировали с помощью IL-10, аргиназы-1, MRC- 1 и Ym1.Интересно, что ниацин не увеличивал дополнительно экспрессию маркеров M2, как мы предполагали. Другие показали, что HFD увеличивает экспрессию в жировой ткани маркеров M2 аргиназы-1, Ym1 и IL-10 и что сенсибилизирующая к инсулину жирная кислота омега-3, DHA, дополнительно увеличивает эти маркеры M2 [59]. Опосредованное DHA увеличение аргиназы-1, Ym1 и IL-10 происходило в стромальной сосудистой фракции, а не во фракции адипоцитов жировой ткани [59]. Хотя мы также продемонстрировали индуцированное HFD увеличение маркеров M2 аргиназы-1, Ym1 и IL-10, мы обнаружили, что ниацин снижает экспрессию аргиназы-1 и не влияет на экспрессию Ym1 и IL-10 в жировой ткани.Поскольку многие из исследованных нами цитокинов продуцируются как адипоцитами, так и макрофагами (МСР-1, TNF-α, IL-10, IL-1β), в будущем будет важно отделить стромальную сосудистую фракцию от фракции адипоцитов для определить влияние ниацина на каждый из этих типов клеток. Также важно отметить, что два основных места экспрессии рецептора ниацина находятся на адипоцитах и ​​иммунных клетках, включая макрофаги, что еще раз демонстрирует важность изучения возможных дифференциальных эффектов ниацина на эти два типа клеток, широко присутствующих в жировой ткани.Первоначально мы были удивлены, что ниацин снижает экспрессию маркеров, связанных как с провоспалительными макрофагами M1 (CD11c, MCP-1, IL-1β), так и с противовоспалительными M2 (аргиназа-1 и MRC-1). Повышенная продукция адипоцитами MCP-1, свободных жирных кислот, мертвых и умирающих адипоцитов, гипоксия, окислительный стресс и стресс ER были идентифицированы как факторы, способствующие инфильтрации макрофагов в жировую ткань [60]. Известно, что свободные жирные кислоты направляют макрофаги M1 и M2 в жировую ткань.Повышенное количество местных и системных свободных жирных кислот в результате липолиза адипоцитов во время потери веса вызывает рекрутирование макрофагов в жировую ткань [61]. Поскольку ниацин является известным ингибитором липолиза адипоцитов, уменьшение количества свободных жирных кислот в сыворотке крови из адипоцитов может потенциально ингибировать рекрутирование макрофагов M1 и M2 в жировую ткань.

Рецептор ниацина в основном экспрессируется в адипоцитах и ​​иммунных клетках, включая макрофаги. Интересно, что экспрессия рецептора ниацина на макрофагах увеличивается при лечении провоспалительными стимулами, включая TNF-α, интерферон γ или LPS [62].Неизвестно, экспрессируется ли рецептор ниацина в резидентных противовоспалительных макрофагах M2, присутствующих в жировой ткани худых людей. В текущем исследовании мы продемонстрировали противовоспалительные эффекты ниацина только у мышей WT, получавших HFD, которые демонстрируют повышенное присутствие провоспалительных макрофагов M1 в жировой ткани. Возможно, причина, по которой мы не наблюдали противовоспалительного действия ниацина у худых мышей, заключается в том, что ниацин оказывает свое противовоспалительное действие посредством прямого связывания со своим рецептором на адипоцитах и ​​макрофагах M1, которые поляризованы в воспалительное состояние. которые отсутствуют в жировой ткани худых людей.

Интересно, что были продемонстрированы положительные эффекты ниацина на биологию адипоцитов [13]. Например, адипоциты, выделенные у людей, получавших ниацин, имели меньшие средний и максимальный диаметр и объем по сравнению с контрольными субъектами [13]. Кроме того, в этих адипоцитах улучшилась чувствительность к инсулину. Хотя мы не изучали чувствительность к инсулину у наших мышей, есть доказательства того, что лечение ниацином улучшает чувствительность к инсулину в адипоцитах, и наши результаты предполагают, что это может быть связано с уменьшением воспаления жировой ткани.Однако клинически было продемонстрировано, что ниацин повышает уровень глюкозы в крови у пациентов с диабетом и без диабета [3], поэтому влияние ниацина на чувствительность адипоцитов к инсулину, вероятно, не способствует улучшению чувствительности к инсулину всего тела.

Таким образом, результаты текущего исследования показывают, что ниацин снижает воспаление жировой ткани за счет снижения содержания провоспалительных цитокинов, хемокинов и макрофагов, а также за счет повышения концентрации адипонектина в сыворотке и жировой ткани.Однако, чтобы полностью выяснить влияние ниацина на воспаление жировой ткани, необходимы количественные исследования с использованием сортировки клеток, активируемых флуоресценцией, для определения количества и типа макрофагов, присутствующих в жировой ткани. Повышение уровня адипонектина происходило независимо от изменений в экспрессии ключевых факторов транскрипции и шаперонов ER, участвующих в продукции адипонектина. Эти данные подтверждают идею о плейотропных эффектах ниацина для улучшения метаболических параметров в тканях-мишенях, а именно в жировой ткани.Кроме того, все эти противовоспалительные эффекты ниацина были потеряны у мышей с нокаутом рецепторов ниацина. Это согласуется с предыдущими сообщениями о том, что рецептор ниацина необходим для опосредования противовоспалительных свойств ниацина [14], [17], [41]. Кроме того, важно отметить, что положительные эффекты ниацина, наблюдаемые у мышей, получавших HFD, не проявлялись у худых мышей WT. Эти данные свидетельствуют о том, что плейотропное действие ниацина наиболее выражено при метаболической дисфункции, вызванной ожирением.

Преимущества промывки ниацином + побочные эффекты ниацина

Ниацин, также известный как витамин B3 и ниацинамид, представляет собой водорастворимый витамин, который играет важную роль в здоровье сердца. Прилив ниацина может быть временным побочным эффектом приема ниацина (витамин B3), или это может быть преднамеренный акт приема более высоких доз ниацина для определенных проблем со здоровьем. Для чего нужен ниацин? Во-первых, ниацин используется с 1950-х годов для снижения повышенного уровня холестерина ЛПНП (плохого) и триглицеридов в крови.(1)

Так что же такое промывание ниацином? Давайте посмотрим, что это такое, а также рассмотрим возможные преимущества и серьезные риски приливов ниацина.


Что такое прилив ниацина?

Что такое ниацин? Ниацин или витамин B3 — незаменимый витамин, который мы все должны получать ежедневно в своем рационе. Согласно действующим стандартам Министерства сельского хозяйства США взрослые и дети старше четырех лет должны потреблять около 16 миллиграммов B3 в день. (2) Для чего используется ниацин? В значительно более высоких дозах он используется для лечения гиперлипидемии , — или высокого холестерина — и снижения риска сердечно-сосудистых заболеваний.(3)

Витамин B3 — один из восьми витаминов группы B. Этот витамин B3 также широко известен как ниацин или никотиновая кислота. Существуют также две другие формы витамина, ниацинамид и гексаникотинат инозита, но эти версии имеют разные эффекты от ниацина.

Ниацин, или витамин B3, можно естественным образом получить с пищей. Продукты с высоким содержанием ниацина включают такие продукты, как говядина травяного откорма, курица свободного выгула, ягненок , лосось, сардины, семена подсолнечника и тахини .Этот витамин B также можно получить, принимая таблетки ниацина. Как и другие витамины группы В, ниацин водорастворим, а не жирорастворим, а это означает, что организм его не накапливает.

Что делает ниацин? Как и другие витамины группы B, ниацин или B3 помогают нашему организму преобразовывать пищу, которую мы едим, в полезное топливо. В частности, ниацин также помогает организму вырабатывать ключевые половые гормоны, а также гормоны, связанные со стрессом, в надпочечниках и других частях тела. Преимущества ниацина также включают способность витамина уменьшать воспаление и улучшать кровообращение.(4)

Так что же такое промывание ниацином? Побочные эффекты ниацина могут включать прилив ниацина, когда кто-то временно испытывает покраснение, тепло и покалывание, жжение и / или зуд кожи после приема добавки ниацина. Это происходит потому, что капилляры расширяются и увеличивают приток крови к поверхности кожи. Прилив ниацина — это обычная видимая реакция на высокие дозы ниацина или передозировку ниацином. Он может выглядеть и ощущаться как солнечный ожог , но обычно он начинается через 15-30 минут после приема ниацина и длится всего около часа.Промывка считается безвредной, но может быть неудобной, поэтому компании теперь производят добавки с ниацином, не содержащие промывки. (5)

Из-за особых проблем со здоровьем некоторые люди намеренно принимают более высокие дозы ниацина, что также называют приливом ниацина, потому что они в основном промывают тело ниацином. Я сосредоточусь на этом типе приливов ниацина. Подходит ли вам промывание ниацином? Исследования показали, что это может быть полезно для определенных людей.


Возможные преимущества при промывании ниацином
  1. Помогает снизить холестерин ЛПНП и триглицериды
  2. может повысить уровень хорошего холестерина
  3. Помогает уменьшить затвердение артерий
  4. Выводит токсины из организма
  5. помогает похудеть
  6. Помогает лечить Пеллегра
1.Помогает снизить уровень холестерина и триглицеридов ЛПНП

Согласно исследованию, опубликованному в журнале American Journal of Medical Science , предыдущее исследование продемонстрировало, что «в фармакологических дозах ниацин (витамин B3) снижает общий холестерин, триглицериды, липопротеины очень низкой плотности и низкий уровень холестерина. уровни липопротеинов плотности и для повышения уровня липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) ».

Целью этого небольшого исследования 2013 года было изучить влияние 12 недель лечения ниацином на липидный профиль и статус окислительного стресса у пациентов с низким уровнем холестерина ЛПВП, особенно у тех, у кого уровень хорошего холестерина был ниже 40 мг / дл.И низкий уровень ЛПВП, и окислительный стресс обычно указывают на более высокий риск сердечных заболеваний.

В исследование были включены 17 пациентов с гиперхолестеринемией (высоким холестерином) и низким уровнем холестерина ЛПВП, а также восемь здоровых контрольных субъектов. В целом, исследование показало, что добавка ниацина снижает окислительный стресс и уровни триглицеридов , при этом значительно повышая уровни ЛПВП у субъектов с высоким уровнем холестерина. (6)

2. Может повысить уровень хорошего холестерина

Исследования показали, что добавление высоких доз ниацина может помочь повысить уровень холестерина ЛПВП («хорошего»).

Как отмечается в научной статье, опубликованной в Международном журнале клинической практики : «Терапевтически используемый более 50 лет ниацин является наиболее эффективным клинически доступным агентом для повышения уровня холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС-ЛПВП)». Многочисленные исследования показали, что у людей с аномально высоким уровнем общего холестерина ниацин может повысить уровень холестерина ЛПВП на 20-40%. (7)

3. Способствует уменьшению затвердевания артерий

Ниацин, как известно, используется для клинической терапии атеросклероза .На сегодняшний день исследования указывают на способность ниацина уменьшать затвердение артерий, также известное как атеросклероз, у некоторых людей. Как обсуждалось в одном научном обзоре, было показано, что ниацин избирательно увеличивает плазменные уровни Lp-AI, компонента HDL, который оказывает кардиозащитное действие у пациентов с низким уровнем HDL. (8) Кроме того, было показано, что добавка ниацина значительно снижает окислительный стресс, который, как известно, способствует развитию атеросклероза. (9, 10)

Исследование, опубликованное в 2015 году в журнале Medical Science Monitor , показало, что у животных ниацин способен подавлять воспаление сосудов, а также подавлять апоптоз (запрограммированную гибель клеток) гладкомышечных клеток сосудов.В целом, ниацин подавляет развитие атеросклероза у животных. (11)

4. Детоксикация тела

Общие поисковые запросы ниацина в Интернете включают «тест на ниациновый наркоман» и «ниацин для промывания». Что с этим за история? По-видимому, некоторые люди проводят промывание ниацином, пытаясь пройти тест на наркотики.

Может ли никотиновая промывка помочь тем, кто хочет избавиться от наркотиков? Некоторые считают, что это может помочь избавить организм от метаболитов лекарств, увеличивая скорость расщепления жира в организме, где метаболиты обычно откладываются.Однако прием большого количества таблеток ниацина прямо перед тестом на наркотики просто опасен. Если ниацин будет использоваться для детоксикации от наркотиков, это следует делать постепенно и под руководством медицинского работника. (12)

5. Способствует снижению веса

Нетрудно найти статьи о ниацине для похудения, но может ли ниацин действительно помочь вам похудеть? Только что упомянутая идея — что ниацин может помочь расщепить жир и избавиться от токсинов, хранящихся в жировых клетках, — вот почему некоторые говорят, что он может помочь при детоксикации и похудании.Тем не менее, существует не так много широких или хорошо выполненных научных исследований, подтверждающих использование ниацина для похудания.

Однако одно исследование поместило мышей на диету с высоким содержанием жиров или контрольную диету, и через шесть недель им давали либо носитель, либо ниацин в течение пяти недель. Исследователи пришли к выводу: «Лечение ниацином ослабляет ожирение -индуцированное воспаление жировой ткани за счет увеличения экспрессии адипонектина и противовоспалительных цитокинов и снижения экспрессии провоспалительных цитокинов зависимым от рецептора ниацина образом.”(13)

6. Помогает при пеллагре

Пеллагра — редкое заболевание, вызванное дефицитом витамина B3. Алкоголики, а также люди с ВИЧ / СПИДом подвержены риску развития пеллагры. Ниацин одобрен FDA для лечения пеллагры. (13)

Связанный: Рибозид никотинамида: эффективная антивозрастная добавка или шумиха?


Как после промывки ниацином

Если вам интересно, как долго и как часто нужно делать промывание ниацином, а также правильную дозировку, всегда консультируйтесь со своим врачом.Обычно врачи советуют принимать ниацин во время еды и постепенно увеличивать дозу ниацина в течение нескольких недель. Часто рекомендуются добавки с пролонгированным высвобождением ниацина. Эта версия ниацина предназначена для уменьшения покраснения кожи.

Вот пример рекомендуемой дозировки для промывки ниацином с добавкой ниацина пролонгированного действия: (14)

  • Недели 1–4: суточная доза 500 миллиграммов ниацина пролонгированного действия, принимаемая перед сном
  • , недели 5–8: суточная доза 1000 мг ниацина пролонгированного действия, принимаемая перед сном (может быть одна таблетка на 1000 мг или две таблетки по 500 мг)

Через восемь недель врач обычно оценивает реакцию пациента на ниацин.Известно, что пациентам женского пола требуются более низкие дозы, чем пациентам мужского пола, чтобы увидеть желаемый ответ. Если реакция на 1000 миллиграммов недостаточна, доза может быть увеличена до 1500 миллиграммов, а затем, при необходимости, до 2000 миллиграммов каждый день. Дозы ниацина более 2000 миллиграммов в день обычно не рекомендуются. Также не рекомендуется повышать дозу ниацина более чем на 500 миллиграммов в течение четырех недель.


Рецепты промывания ниацином

Если вы хотите увеличить потребление ниацина с помощью своего рациона, регулярно включайте в свой рацион продукты, содержащие ниацин.

Есть также много вкусных рецептов с высоким содержанием витамина B3, в том числе:

Прилив ниацина (видимый симптом) обычно возникает при приеме дополнительных доз ниацина от 50 миллиграммов или выше. Когда ниацин употребляется с пищей, маловероятно возникновение видимого побочного эффекта ниацина, известного как прилив ниацина.


Возможные побочные эффекты ниацина и меры предосторожности

Прием ниацина может вызвать покраснение кожи, особенно когда вы впервые начинаете его принимать.Незначительные побочные эффекты от приема ниацина также могут включать расстройство желудка и диарею. Эти легкие побочные эффекты обычно уменьшаются со временем. (15)

Опасна ли промывка ниацином? Высокие дозы ниацина связаны с повреждением печени, желудочно-кишечными проблемами, непереносимостью глюкозы, низким кровяным давлением, изменениями сердечного ритма и другими проблемами со здоровьем. Вот почему так важно поговорить со своим врачом о подходящей добавке ниацина и дозировке для ваших конкретных потребностей.

А как насчет ниацина без промывания или без промывания ниацином? Ниацин без промывания часто содержит инозитол никотинат, также известный как инозитол гексаникотинат. Эти формы ниацина отличаются от ниацина (никотиновой кислоты) и могут не оказывать таких же эффектов, как ниацин, и, следовательно, не вызывать такого же видимого эффекта покраснения. Некоторые общие рекомендации по уменьшению покраснения кожи от добавок ниацина включают отказ от алкоголя и острой пищи. Кроме того, известно, что прием ниацина с пищей, начиная с более низкой дозы и постепенно увеличивая дозу, снижает вероятность покраснения кожи.(16)

Промывание ниацином, а также добавка ниацина часто не рекомендуются лицам со следующими состояниями: (17)

  • Активная болезнь почек
  • Активный Заболевание печени
  • Активная язва желудка
  • Алкоголизм
  • Нарушения свертывания крови, такие как гемофилия
  • Глаукома
  • Подагра
  • Низкое артериальное давление
  • Повышенная чувствительность к ниацину
  • Диабет 2 типа с неконтролируемым уровнем сахара в крови (поскольку ниацин может повышать уровень сахара в крови)

Обычно не рекомендуется принимать таблетки с пролонгированным высвобождением ниацина, если вы беременны, пытаетесь забеременеть или кормите грудью.

Прекратите прием ниацина или ниацинамида как минимум за две недели до операции. Ниацин может усугубить аллергию за счет повышения уровня гистамина в организме.

Если у вас есть какие-либо из этих проблем со здоровьем, особенно диабет или заболевание желчного пузыря, поговорите со своим врачом, прежде чем принимать ниацин. В общем, всегда консультируйтесь со своим врачом, прежде чем проводить промывание ниацином. Некоторые врачи рекомендуют сочетать статины с ниацином, что может увеличить риск побочных эффектов.


Последние мысли
  • Прилив ниацина может быть временным побочным эффектом приема ниацина; это также протокол, используемый некоторыми врачами для снижения липидного профиля и улучшения здоровья сердца.
  • Исследования показали, что преимущества приливов ниацином могут включать снижение холестерина ЛПНП, уровней триглицеридов и окислительного стресса при одновременном повышении холестерина ЛПВП.
  • Промывание ниацином следует проводить только под наблюдением врача.
  • Приливы с ниацином сопряжены с серьезными рисками, которые следует серьезно рассмотреть, прежде чем выбирать его в качестве средства лечения.
  • Нетрудно ежедневно получать ниацин в своем рационе из здоровых продуктов, богатых ниацином, таких как говядина травяного откорма, индейка, авокадо и горох.
  • Прием витаминов группы B вместе в виде высококачественной добавки витаминного комплекса B позволяет витаминам лучше работать в организме, поскольку витамины группы B взаимодействуют друг с другом, обеспечивая всасывание и преобразование.
  • Не пытайтесь провести промывание ниацином без указания врача.
Читать дальше: Детокс вашей печени: попробуйте мое 6-этапное очищение печени

Ниацин — Витамин B3 | Источник питания

Ниацин, или витамин B3, представляет собой водорастворимый витамин B, который естественным образом содержится в некоторых продуктах питания, добавляется в пищевые продукты и продается в качестве добавки.Две наиболее распространенные формы ниацина в пище и добавках — это никотиновая кислота и никотинамид. Организм также может преобразовывать триптофан — аминокислоту — в никотинамид. Ниацин растворим в воде, поэтому лишнее количество, в котором он не нуждается, выводится с мочой. Ниацин действует в организме как кофермент, и более 400 ферментов зависят от него для различных реакций. Ниацин помогает преобразовывать питательные вещества в энергию, создавать холестерин и жиры, создавать и восстанавливать ДНК и оказывать антиоксидантное действие. [1,2]

Рекомендуемое количество

RDA: Ниацин измеряется в миллиграммах (мг) эквивалента ниацина (NE).Один NE равен 1 миллиграмму ниацина или 60 мг триптофана. Рекомендуемая диета (RDA) для взрослых 19+ лет составляет 16 мг NE для мужчин, 14 мг NE для женщин, 18 мг NE для беременных и 17 мг NE для кормящих женщин.

UL: Допустимый верхний уровень потребления — это максимальное суточное потребление, которое вряд ли окажет вредное воздействие на здоровье. UL для ниацина для всех взрослых от 19 лет и старше составляет 35 миллиграммов.

Ниацин и здоровье Сердечно-сосудистые заболевания


Более 40 лет ниацин в форме никотиновой кислоты давали пациентам для лечения состояния, называемого дислипидемией, основного фактора риска сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ), таких как ишемическая болезнь сердца, сердечный приступ и инсульт. .Анализ крови у человека с дислипидемией может показать высокий уровень общего и «плохого» холестерина ЛПНП, низкий уровень «хорошего» холестерина ЛПВП и повышенный уровень триглицеридов.

Добавки никотиновой кислоты содержат большое количество ниацина, до 1000–2000 мг ежедневно. Исследования показали, что они могут повышать уровень холестерина ЛПВП и снижать холестерин ЛПНП и триглицериды. Однако отрицательные побочные эффекты (покраснение кожи, расстройство желудка, диарея) обычно сопровождают добавки, что приводит к плохому соблюдению режима лечения пациентами.Клинические испытания не доказали, что никотиновая кислота приводит к меньшему количеству сердечно-сосудистых событий или смерти от ССЗ.

  • Хотя более ранние клинические испытания показали снижение частоты сердечно-сосудистых событий и смертей на фоне терапии ниацином, два более недавних крупных клинических испытания, посвященных исходам сердечно-сосудистых заболеваний, пришли к другому выводу. [3,4] Оба были крупными рандомизированными плацебо-контролируемыми испытаниями, в которых наблюдали за участниками в течение до 4 лет. Добавки ниацина принимались (1500–2000 мг в день) отдельно в одном испытании и со статинами в другом.Оба испытания пришли к выводу, что прием добавок ниацина не дает положительных результатов. Исследование ниацина / статина не показало снижения числа инсультов, сердечных приступов или смертей от сердечно-сосудистых заболеваний, несмотря на значительное улучшение уровней холестерина ЛПВП и триглицеридов. [3] Исследование, в котором принимали только добавки ниацина, не выявило снижения частоты сердечно-сосудистых событий, а также отметило значительное увеличение побочных реакций по сравнению с группой плацебо, включая увеличение частоты диабета 2 типа, желудочно-кишечных кровотечений и язв, а также диареи.[4]
  • Кокрановский обзор 23 рандомизированных контролируемых испытаний добавок никотиновой кислоты для профилактики сердечно-сосудистых заболеваний показал, что эти добавки не снижали общую смертность, смертность от сердечно-сосудистых заболеваний, сердечных приступов и инсультов и были связаны с отрицательными побочными эффектами. [5]
  • Результаты этих и других исследований сердечно-сосудистых исходов привели Управление США по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) к выводу, что «научные данные больше не подтверждают вывод о том, что вызванное лекарством снижение уровня триглицеридов и / или повышение уровня холестерина ЛПВП. у пациентов, принимающих статины, снижает риск сердечно-сосудистых событий.[6] Наряду с этим заключением FDA заявило, что преимущества таблеток ниацина с пролонгированным высвобождением и капсул фенофиброевой кислоты, принимаемых вместе со статинами, больше не перевешивают риски и не должны быть рекомендованы.
Когнитивное здоровье


Тяжелая недостаточность ниацина связана с когнитивными нарушениями, такими как потеря памяти и деменция. Считается, что ниацин защищает клетки мозга от стресса и травм. Однако пока не ясно, могут ли меньшие отклонения в потреблении ниацина с пищей отрицательно повлиять на функцию мозга.

  • Большое проспективное исследование с участием 3718 мужчин и женщин в возрасте 65 лет и старше прослеживалось в течение 6 лет с использованием диетических вопросников и когнитивных оценок. [7] Защитный эффект от болезни Альцгеймера и снижения когнитивных функций был обнаружен при сравнении самого высокого и самого низкого потребления ниацина.
  • В исследовании «Развитие риска коронарных артерий у молодых людей» (CARDIA) участвовали 3136 мужчин и женщин в возрасте от 18 до 30 лет на срок до 25 лет. [8] В исследовании измерялось потребление витамина B с пищей и добавками, а также когнитивные функции.Более высокое потребление витаминов группы B, особенно ниацина, в молодом возрасте было связано с лучшими показателями когнитивных функций в среднем возрасте. Однако когнитивная функция оценивалась только в конце исследования, поэтому какие-либо изменения когнитивной функции с течением времени не были известны.

Исследования в этой области ограничены, но в настоящее время проводится несколько клинических испытаний, которые могут пролить свет на влияние ниацина на здоровье мозга. [9]

Источники пищи

Дефицит ниацина встречается редко, поскольку он содержится во многих продуктах питания как животных, так и растений.

Дополнения

Ниацин доступен в виде добавок в форме никотиновой кислоты или никотинамида. Иногда количества добавок намного превышают рекомендованную суточную норму, что вызывает неприятные побочные эффекты приливов. Добавки ниацина также доступны в виде лекарств, отпускаемых по рецепту, которые используются для лечения высокого уровня холестерина; обычно это форма никотиновой кислоты с пролонгированным высвобождением, которая обеспечивает более медленное, более постепенное всасывание, чтобы не вызывать покраснения. Поскольку необходимы очень высокие дозы никотиновой кислоты, до 2000 мг в день, эту добавку следует использовать только под наблюдением врача.

Признаки дефицита и токсичности
Дефицит

Дефицит ниацина редко встречается в Соединенных Штатах и ​​других промышленно развитых странах, поскольку он хорошо усваивается из большинства продуктов (за исключением некоторых злаков, в которых ниацин связан с его волокнами, уменьшая абсорбцию) и добавляется во многие продукты. и поливитамины. Серьезный дефицит ниацина приводит к пеллагре — состоянию, при котором на участках кожи, подверженных воздействию солнечного света, появляется темная, иногда чешуйчатая сыпь; яркое покраснение языка; и запор / диарея.Другие признаки серьезной недостаточности ниацина включают:

  • Депрессия
  • Головная боль
  • Усталость
  • Потеря памяти
  • Галлюцинации

Группы риска дефицита

  • Ограниченные диеты. Люди, чей рацион ограничен как по разнообразию, так и по количеству продуктов, например, люди, живущие в бедности или очень больные и неспособные придерживаться сбалансированной диеты, подвергаются повышенному риску. Развивающиеся страны, которые употребляют кукурузу или кукурузу в качестве основного источника пищи, подвержены риску пеллагры, поскольку в этих продуктах мало усваиваемого ниацина и триптофана.
  • Хронический алкоголизм. Всасывание некоторых питательных веществ, особенно водорастворимых витаминов, включая витамины группы B, снижается при чрезмерном употреблении алкоголя.
  • Карциноидный синдром. Это болезнь медленно растущих раковых клеток кишечника, которые выделяют химическое вещество, называемое серотонином. Синдром заставляет триптофан, содержащийся в рационе, превращаться в серотонин, а не в ниацин, что увеличивает риск снижения уровня ниацина.
Токсичность

Токсичность при употреблении в пищу продуктов, содержащих ниацин, встречается редко, но может возникнуть в результате длительного приема высоких доз добавок.Покраснение кожи с зудом или покалыванием на лице, руках и груди — распространенный признак. Приливы происходят в основном при приеме высоких доз добавок в форме никотиновой кислоты, а не никотинамида.

Прочие знаки:

  • Головокружение
  • Низкое артериальное давление
  • Усталость
  • Головная боль
  • Расстройство желудка
  • Тошнота
  • Затуманенное зрение
  • Нарушение толерантности к глюкозе и воспаление печени в тяжелых случаях (при очень высоких дозах 3000-9000 мг в день в течение нескольких месяцев / лет) [1]

Знаете ли вы?
  • Считается, что многие витамины группы В помогают увеличить энергию, в том числе ниацин.Поскольку ниацин водорастворим (меньший риск накопления в организме до токсичного уровня), многие люди не задумываются дважды о приеме добавки, которая может содержать в 100 раз больше рекомендуемой суточной нормы витамина. Хотя ниацин помогает некоторым ферментам превращать пищу в АТФ, форму энергии, прием доз, значительно превышающих рекомендованную суточную норму потребления, не даст особого повышения уровня энергии. Сбалансированная диета с разнообразием продуктов — это часто все, что нужно для получения эффекта повышения энергии ниацином.
  • Кукуруза от природы богата ниацином, но она связана с углеводами, что затрудняет их усвоение человеческим организмом.Однако, когда кукуруза никстамализована (традиционный процесс изготовления тортильи, когда кукурузу обрабатывают гидроксидом кальция, варят и измельчают), ниацин становится абсорбируемым из-за обработки гидроксидом кальция.

Связанные

Витамины группы В
Витамины и минералы

Ссылки
  1. Институт медицины. Совет по продовольствию и питанию. Рекомендуемая диета: тиамин, рибофлавин, ниацин, витамин B6, фолат, витамин B12, пантотеновая кислота, биотин и холин .Вашингтон, округ Колумбия: National Academy Press, 1998.
  2. Управление пищевых добавок Национального института здравоохранения: информационный бюллетень по ниацину для специалистов здравоохранения https://ods.od.nih.gov/factsheets/Niacin-HealthProfessional/. Дата обращения 24.01.2020.
  3. Следователи с высокой целью. Ниацин у пациентов с низким уровнем холестерина ЛПВП, получающих интенсивную терапию статинами. Медицинский журнал Новой Англии . 2011 15 декабря; 365 (24): 2255-67.
  4. Совместная группа HPS2-Thrive. Эффекты ниацина с пролонгированным высвобождением с ларопипрантом у пациентов из группы высокого риска. Медицинский журнал Новой Англии . 2014 17 июля; 371 (3): 203-12.
  5. Schandelmaier S, Briel M, Saccilotto R, Olu KK, Arpagaus A, Hemkens LG, Nordmann AJ. Ниацин для первичной и вторичной профилактики сердечно-сосудистых событий. Кокрановская база данных систематических обзоров . 2017 (6).
  6. Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США. Отмена одобрения показаний, связанных с совместным введением со статинами в заявках на таблетки с пролонгированным высвобождением ниацина и капсулы с отсроченным высвобождением фенофиброевой кислоты.18.04.2016. https://www.federalregister.gov/documents/2016/04/18/2016-08887/abbvie-inc-et-al-withdrawal-of-approval-of-indications-related-to-the-coadministration-with- statins Дата обращения: 07.01.2020.
  7. Morris MC, Evans DA, Bienias JL, Scherr PA, Tangney CC, Hebert LE, Bennett DA, Wilson RS, Aggarwal N. Диетический ниацин и риск возникновения болезни Альцгеймера и снижения когнитивных функций. Журнал неврологии, нейрохирургии и психиатрии . 2004, 1 августа; 75 (8): 1093-9.
  8. Цинь Б., Сюнь П., Джейкобс-младший Д.Р., Чжу Н., Давиглус М.Л., Рейс Д.П., Штеффен Л.М., Ван Хорн Л., Сидни С., Хе К.Потребление ниацина, фолиевой кислоты, витамина B-6 и витамина B-12 в молодом возрасте и когнитивные функции в среднем возрасте: исследование развития риска коронарных артерий у молодых людей (CARDIA).

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *